關於離心機的RPM與RCF之間的換算,這次讓你徹底明白!

2021-01-16 生物匠ArtisanBio


實驗過程中經常會碰到

RPM與RCF

之間的換算

其中……


RPM:離心速度,即每分鐘的旋轉次數(RPM=Revolutions Per Minute)。

RCF:相對離心力(RCF=Relative Centrifugal Force),RCF通常表現為地球重力加速度的倍數,表示為數字乘以g,例如12000×g,則表示為相對離心力為12000。


怎麼進行RPM與RCF之間的換算呢?


生物匠編輯們通過編譯國外關於離心機的視頻介紹讓大家一目了然!



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關於離心機An introduction to the Centrifuge

離心機是一種全球幾乎所有研究實驗室都在使用的儀器。離心是一個基本的實驗室操作過程,它使用離心機來分離複雜混合物中的組分。在極高速度下離心實驗樣品,混合物中的組分會受到離心力的影響,使得較高密度的粒子離開軸心方向移動,而密度小的顆粒則朝向軸心方向移動。這些顆粒會沉積在管底形成所謂的沉澱物,這樣分離得到的樣品或被成為上清的餘液都可以用作進一步處理或者分析。



離心機部件和離心參數Components of a Centrifuge and Parameters of a Centrifuge Run

離心機的主要原件是轉頭,它是高速離心時轉動的部件。轉頭可以被固定在離心機上,也可以是一個離心機使用多個轉頭,將它們裝在稱為主軸的部件上。離心機轉頭通常還帶有一個蓋子,能緊緊擰上蓋住,防止飛出來。許多離心機會有一個製冷單元,它可以保持內部溫度在離心時得到控制。離心機上還有旋鈕或按鈕,用來輸入每次離心所需要的參數,包括離心時間、溫度和離心快慢。它可以是以速度或以相對離心力為單位。


離心速度以RPM來計量,即每分鐘的旋轉次數(RPM=Revolutions Per Minute)。RPM值有時有誤導性,因為造成顆粒從混合物中分離出來的不是離心的速度,而是作用在這些顆粒上的作用力,這種作用力與離心機轉頭的半徑相關。由於不同的離心機有不同的轉頭大小,這樣在同一個RPM速度下產生的作用力會有不同。離心力也可以用RCF(RCF=Relative Centrifugal Force)相對離心力來定量,RCF通常表現為地球重力加速度的倍數。RCF的計算公式是:轉頭半徑*角速度平方/地球的重力加速度(RCF=rω2/g)。


RCF通過下面的公式與RPM相關

RCF=1.118×10-5×r×RPM2

其中r代表離心機的半徑,以釐米為單位。

對該公式的使用可能會影響到實驗的成功或失敗。但您不必在每個新的操作中都採用這種計算方法,離心機通常都附帶了圖表,來幫助簡單的換算RCF和RPM。用一個尺子連接離心機的半徑和一個已知的RPM數值就可以得到RCF數值。


離心機的使用Operating the Centrifuge

在開始離心您的樣品之前先要考慮溫度。如果您在使用一個冷凍離心機,那麼在開始前,需要將儀器內部的溫度達到您的理想值。或者用別的辦法來給轉頭降溫。離心即將開始前,需確定您所有的管蓋都蓋緊不會鬆開。在將離心管放入轉頭時,要保證每個樣品和另一個相對位置樣品重量一致!如果您只有一個離心管,那麼就要找到另一個等重的離心管來保證平衡;如果您有三個同樣重量的離心管,可以將他們擺成一個三角位置以保證相互平衡。重量平衡在離心中非常重要,離心機的轉頭在高速運動中有很高的動態能量,如果沒有正確平衡好,整個離心單位會脫離它所在的位置,造成嚴重的損害。

一旦您確定轉頭和蓋子都固定好了,就可以開始離心。在速度達到您設定的最高轉速前不要離開。如果您發現問題,找一個有經驗的實驗人員來幫助你。離心結束後,您應當會看見您的生物學樣品位於離心管底部的沉澱中,它已經從稱為上清的餘液中分離出來了。可以通過傾倒,也就是直接倒出來去除上清。也可將上清吸出,就是用真空吸力將其吸出。純化的樣品可以被重新放回溶液中,這個過程稱之為重懸。重複離心細胞,然後吸出上清,留下細胞再用緩衝液重懸細胞,這個過程稱之為細胞洗滌。


離心應用Applications

現在您已經看到一些基本離心技術,下面再來看一下一些離心機的類型,以及您要進行的操作過程。

固定角轉頭離心機,可能是您在實驗室中最常看到的許多臺式離心機就是這種類型。在這種離心機中,離心管呈固定的角度放置,它適用於差異離心方法,在這些方法中,可應用一系列不同速度的離心來純化多種生物樣品,比如動物細胞。通常這些方法會包括幾個細胞洗滌步驟。


與固定角轉頭不同,甩瓶式轉頭有靈活的離心管支架,使得樣品在旋轉時向外甩起。這種轉頭對某些應用很有幫助,如密度梯度離心。可將生物樣品在密度梯度介質中,分離到不同的密度層。這種離心有助於快速分離不同的細胞類型或者分離某種單獨的細胞器。


最後,超速離心機是實驗室中所有離心機的老大哥,它的離心速度可以超過70000rpm。這樣它可以用來分離小顆粒,比如DNA 、或者病毒。因為這種離心機的高速度,要格外小心來保證它的樣品承載得到了正確的平衡,並且要確保轉頭和轉頭蓋都是牢固的。



感謝您的觀看!

記得平衡您的離心管哦


好  消  息!!!


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