幹細胞的分離純化

具中科博生研究表明，所謂細胞分離（cell isolation）,指的是將組織材料分散製成細胞懸液後,從中獲取目的細胞的過程。

而所謂細胞純化（cell purification）更進一步強調從原代培養前成分混雜的異質性細胞懸液中或者從培養物中獲得單一類型細胞的過程。通過細胞分離和純化過程,使得培養物成為單一型培養物,甚至是遺傳特性完全一致的培養物,後者即細胞系或細胞株。分離和純化兩概念之間沒有截然的界限,許多情況下,細胞分離和純化並不是完全徹底的,培養物中只能達到以某種細胞為主（佔絕大多數）的程度,所以也常稱為富集（enrichment）。中科博生。

分離和純化細胞的過程不僅僅是在原代培養之前進行,有時分離和純化細胞的過程還貫穿於原代與繼代培養的過程中,甚至主要依靠培養過程實現分離與純化細胞的目的。培養物中細胞成分是否單一或者目的細胞在培養物中的比例如何,常是衡量某一培養工作是否成功的重要指標。中科博生。

從成分混雜的細胞懸液中將不同的細胞區分開來達到分離純化,主要是根據|不同的細胞所具有的各種各樣的特性來實現的,也可利用細胞的物理特性如密度、體積、電荷等,以及細胞的生物學特性如特異性表面標誌和功能。一種細胞,其數量稀少又難以識別往往就更不易被分離純化。因此,雖然已經對造血幹細胞的特性了解得比較清楚,但人們仍在努力探索更簡單、更快速的幹細胞分離方法,因為通過常規方法富集得到的幹細胞遠不能滿足幹細胞生物學和調控研究對幹細胞數量和純度的要求。中科博生。

將基於細胞的物理特性和生物學特性的分離純化方法相結合,通常可獲得較好的效果,也只有合理的綜合應用兩種以上不同的分離方法,才可能在細胞回收率、細胞純度及細胞活力等方面達到比較滿意的效果。尤其是幹細胞在組織中比例極低,也使人們不得不採用多步驟的分離方法,通常每一個步驟利用一種不同的分離參數。例如,在採用抗體介導的技術分離之前常先用密度梯度法對目的細胞進行預富集。中科博生。

最初的"預富集"步驟可以看做是減少體積的步驟,這樣可以減少隨後分離步驟中試劑的用量。當採用多級分離步驟時,預先估計整個過程中的細胞損失是非常重要的,因為為了獲得高純度的細胞可能會影響到細胞的回收率。中科博生。

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