人腎上皮細胞系293和293T有什麼區別

　　人腎上皮細胞系包括293細胞和293T細胞， 根據文獻資料記載的數據，我們可以對293細胞和293T細胞有一個簡要地了解。293細胞系是原代人胚腎細胞轉染5型腺病毒(Ad 5) DNA的永生化細胞。表達轉染的Ad 5的基因。早期報導認為此細胞含有Ad 5基因組左端和右端，現已清楚僅含有左端序列，此細胞系人腺病毒滴度高。室溫不貼壁，37℃幾日後重新貼壁。表達由整合素beta-1 亞基與玻基結合素受體 alpha-v 亞基組成的玻基結合素細胞表面受體。下面從其來源、形態和染色體核型對293和293T這兩株細胞的進行區分，並介紹一下他們的培養條件。

　　首先關注這兩株細胞的組織來源。293細胞是轉染腺病毒E1A基因的人腎上皮細胞系，293T細胞由293細胞派生，同時表達SV40大T抗原，含有SV40複製起始點與啟動子區的質粒可以複製。用Ca3(PO4)2轉染效率可高達50%。蛋白表達水平高，轉染後2-3天用鹼性磷酸酶分析可較容易地檢測到表達的蛋白。瞬時轉染293T細胞是過表達蛋白並獲得細胞內及細胞外(分泌的或膜)蛋白的便捷方式。

　　293細胞核293T細胞形態均為上皮細胞，生長特性為貼壁細胞，能致瘤。

　　這兩株細胞的染色體核型均為亞三倍體人細胞系。染色體眾數為64，30%的細胞有64 條染色體。4.2%的細胞染色體數目更多。多數細胞der(1)t(1;15)(q42;q13)，der(19)t(3;19)(q12;q13)，der(12)t(8;12)(q22;p13)，還有四條標記染色體，有的細胞另有5條標記染色體。der(1)與M8 (or Xq+)常常成對出現。N17 與 N22各有四條。值得注意的是多數細胞有三條X染色體，兩條Xq+，一條Xp+。

　　293細胞和293T細胞的培養條件是採用ATCC培養基：90%的MEM Eagle，加入2mM L-穀氨醯胺，1.5g/L碳酸氫鈉，0.1mM必需胺基酸，1.0mM丙酮酸鈉;10%加熱滅活的馬血清。於37℃培養。而293細胞與293T細胞的傳代則有些許差別。293細胞的傳代過程為：棄培養基，含0.25%胰酶, 0.03% EDTA 消化液洗滌，棄去，加1-2ml消化液室溫或37℃消化。加入新鮮培養基，吸出，分到新培養皿中。一傳二至一傳四。而293T細胞的傳代過程則為：生長快，通常倍增時間不到一天。每3-4天1：10至1：20稀釋，5% CO2條件下培養。細胞貼壁疏鬆，可只用EDTA消化，不要用胰蛋白酶過度消化。這兩株細胞再進行培養及更換時都是每兩到三天換液一次。293細胞和293T細胞的凍存液均採用95%培養基;5%,DMSO。

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