細胞名稱
293 和 293T
種屬
人
組織來源
293細胞是轉染腺病毒E1A基因的人腎上皮細胞系,293T細胞由293細胞派生,同時表達SV40大T抗原,含有SV40復
制起始點與啟動子區的質粒可以複製。用Ca3(PO4)2轉染效率可高達50%。蛋白表達水平高,轉染後2-3天用鹼性磷酸
酶分析可較容易地檢測到表達的蛋白。瞬時轉染293T細胞是過表達蛋白並獲得細胞內及細胞外(分泌的或膜)蛋白的
便捷方式。
形態特點
上皮細胞
致瘤性
+
產物或抗原
大T抗原
染色體核型
亞三倍體人細胞系。染色體眾數為64,30%的細胞有64 條染色體。4.2%的細胞染色體數目更多。多數細胞
der(1)t(1;15) (q42;q13), der(19)t(3;19) (q12;q13), der(12)t(8;12) (q22;p13),還有四條標記染色體,
有的細胞另有5條標記染色體。der(1)與M8 (or Xq+)常常成對出現。N17 與 N22各有四條。值得注意的是
多數細胞有三條X染色體,兩條Xq+,一條Xp+。
生長特性
粘附
文獻評價
293細胞系是原代人胚腎細胞轉染5型腺病毒(Ad 5) DNA的永生化細胞。[RF32725]
表達轉染的腺病毒5的基因。[RF32725]
早期報導認為此細胞含有Ad 5基因組左端和右端[RF32764],現已清楚僅含有左端序列。[RF50113]
此細胞系人腺病毒滴度高。
室溫不貼壁,37℃幾日後重新貼壁。
表達由整合素beta-1 亞基與玻基結合素受體 alpha-v 亞基組成的玻基結合素細胞表面受體. [RF33793]
The Ad5 insert was cloned and sequenced, and it was determined that a colinear seqment from nts 1
to 4344 is integrated into chromosome 19 (19q13.2).
傳代
293:棄培養基,含0.25% 胰酶, 0.03% EDTA 消化液洗滌,棄去,加1-2ml消化液室溫或37℃消化。
加入新鮮培養基,吸出,分到新培養皿中。一傳二至一傳四。
293T:生長快,通常倍增時間不到一天 。每3~4 天1:10至1:20稀釋,5% CO2條件下培養。細胞貼壁疏鬆,
可只用EDTA消化,不要用胰蛋白酶過度消化。
培養基更換
每2-3天一次
凍存液
95%培養基;5%,DMSO;culture medium 95%; DMSO, 5%;
培養條件
ATCC培養基:90%的MEM Eagle,加入2mM L-穀氨醯胺,1.5g/L碳酸氫鈉,0.1 mM必需胺基酸,1.0 mM 丙酮酸鈉;
10%加熱滅活的馬血清
37℃培養