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在這次抗擊新冠肺炎疫情中,核酸檢測可謂是功不可沒。那麼關於愛滋病的核酸檢測你是否了解呢?由國家衛生健康委員會發布,2019年7月1日開始實施的《愛滋病和愛滋病病毒感染診斷》WS-293-2019,將核酸檢測納入愛滋病診斷標準。由中國疾病預防控制中心艾防中心組織專家修訂的《全國愛滋病檢測技術規範(2020年版)》中也強化了核酸檢測的診斷價值。今天我們一起來認識一下愛滋病的核酸檢測吧!
核酸檢測適用於哪些情況?有什麼意義?
核酸檢測常用於HIV感染診斷、血液篩查、病程評估及抗病毒治療效果監測等。
對於篩查試驗有反應但抗體試驗不確定或陰性的樣本,可將核酸檢測、臨床病史和CD4+T淋巴細胞計數檢測結果綜合判斷。
對於近期有明確流行病學史的個體,可通過核酸檢測判定是否為急性期感染。劃重點!核酸檢測結果陰性或低於最低檢測限不能排除HIV-1感染哦!
對於HIV-1感染母親所生小於18個月齡的嬰兒,不同時間的兩次HIV-1核酸檢測均為陽性即可作出診斷。
對於獻血者及採供血機構的原料血漿進行核酸檢測,可及時發現窗口期感染,減少二代傳播。
對於經抗病毒藥物治療後的患者,應定期進行HIV-1病毒載量檢測,可幫助判斷是否繼續使用原定的治療方案以及是否需要更改治療方案。
核酸檢測常用的方法有哪些?
HIV核酸檢測主要分為定性和定量試驗,均可作為HIV感染診斷試驗,不同的方法,檢測結果判定和報告也是不同的。
HIV-1核酸定性檢測
包括RNA檢測和DNA檢測。檢測方法主要有實時螢光定量PCR方法、螢光探針PCR法及以焦磷酸化激活聚合酶(PAP)反應為基礎的核酸擴增PCR方法。
檢測結果顯示「有反應」或「檢測到」,報告核酸陽性;檢測結果顯示「無反應」或「未檢測到」,報告核酸陰性。核酸定性檢測陰性不能排除HIV-1感染,還需要根據流行病學史、臨床表現和實驗室其他相關指標進行診斷。
HIV-1核酸定量檢測
RNA檢測主要是定量檢測血漿中的病毒RNA,檢測的主要原理是實時螢光定量PCR。DNA檢測包括全血、幹血斑、PBMC及組織中DNA檢測,同定性檢測一樣,DNA含量測定主要有螢光探針PCR法及以焦磷酸化激活聚合酶(PAP)反應為基礎的核酸擴增PCR方法。另外近幾年迅速發展起來的一種核酸絕對定量分析技術——數字PCR也可用於HIV核酸定量檢測,雖然2020修訂版的規範中還沒有說明,但相信這種技術在愛滋病領域也會很快發展起來。
對於檢測結果:當檢測值>5000 CPs/ml(或IUs/ml),報告檢測值;檢測值≤5000 CPs/ml,再次採樣檢測後報告檢測值,結果>5000 CPs/ml可以作為診斷依據,結果仍≤5000 CPs/ml,則需結合流行病學史、臨床病史等結果進行綜合判斷。檢測值小於檢測下線,報告低於檢測限。劃重點!對於暴露前或暴露後預防用藥的個體,檢測值低於最低檢測限不能排除HIV-1感染,需要根據其他相關指標進行綜合判斷。
核酸檢測應該注意什麼?
對於專業人員來說,應注意樣本採集、送檢和保存,HIV核酸檢測應在符合要求的實驗室中進行,實驗人員應充分了解並嚴格遵守各項規定和掌握操作技能,所用試劑必須是經國家藥品監督管理局註冊、在有效期內的試劑,並嚴格按產品說明書操作。同時要做好質量控制,包括從樣本接收到發出報告各環節的管理過程,人員、實驗室分區和環境、儀器和檢測過程等。
對於患者或者高危人員來說,可以到疾控中心進行免費的核酸檢測,在核酸檢測前一天,要注意多休息,補充維生素,避免食用油膩食物和飲酒,放鬆心情。
核酸檢測知識小拓展
美國CDC在2019年愛滋病診斷大會上發表了HIV核酸定量檢測替代策略的報告,提出了「三步法」替代策略和「兩步法」替代策略,研究發現兩種策略不僅具有良好的檢測準確性,還能有效減少檢測成本,及時排除篩查假反應性,縮短檢測時間,同時能提高HIV-1核酸定量檢測結果在臨床工作中的使用價值,但這也需要更多的研究數據來證明。總體來說這種新策略對於今後愛滋病檢測工作的完善還是具有指導和借鑑意義的!
參考文獻
1.《愛滋病和愛滋病病毒感染診斷標準》中華人民共和國衛生行業標準WS-293-2019,中華人民共和國國家衛生健康委員會。
2.《全國愛滋病檢測技術規範(2020年版)》,中國疾病預防控制中心性病愛滋病預防控制中心。
3. CDC reports on two alternative HIV testing algorithms [R]. CAP TODAY. Amy Carpenter Aquino, 2019.