生化結果出現負值怎麼辦之二:簡單讀懂反應曲線!

2021-01-09 檢驗視界網

作者:燕子李三

可能很多朋友一看到反應曲線這四個字的時候,都有一種抗拒心理,覺得這個太難了,看不懂。其實吧,看懂生化反應曲線沒想像中的那麼難。

1.反應曲線是什麼?

炒菜,應該大家都會吧?其實,生化項目的檢測過程跟炒菜比較相似,炒菜的基本流程是:放油→放菜→放鹽,如果每隔18秒,對菜的味道進行打分並記錄,再把各個點連接繪成一條曲線的話,炒菜的反應曲線大致是這樣的,見下圖:

如果只是把油→菜→鹽,按順序放進鍋裡,這一鍋菜應該是沒法吃的,對吧?至少得在放油、菜、鹽的時候用鍋鏟攪拌混勻一下,對吧?於是炒菜的反應曲線變成了這樣,見下圖:

那麼,對應的生化項目檢測(以奧林巴斯AU系列為例)是這樣的:首先,儀器會向反應杯加入試劑1(R1),緊接著加入樣本(S), 攪拌混勻,3分鐘後加入試劑2(R2),攪拌混勻。在這個過程中,儀器會每隔18秒測試一次吸光度並記錄,總共28(0-27)個點,然後連接成線,就是我們所看到的反應曲線,見下圖:

所以,反應曲線是項目檢測整個過程的記錄,相當於是一個靜態的錄像。

2.反應曲線怎麼看?

在整個檢測過程中,試劑1(R1)、樣本(S)、試劑2(R2)加入以及攪拌的時間點都是固定的。我們知道了反應曲線是怎麼來的之後,需要知道什麼樣的曲線算正常。

一般正常的反應曲線:a.比較平滑,無明顯的跳點;b.加入R2前後吸光度會發生明顯的變化(低濃度樣本除外);c.終點法的反應曲線,會有一段曲線的吸光度基本無變化;d.速率法的反應曲線,基本成一條直線(兩點速率法除外)。

生化的反應曲線可以分為終點法和速率法兩大類,以下列舉了一些正常的反應曲線供參考:

1) 終點法的反應曲線:

反應到達終點後反應混合物的吸光度不再變化(R1主要用於消除幹擾,R2加入之後,反應啟動),就像你炒好的菜在一段時間內味道是不變的。如下圖:

2) 速率法的反應曲線:

隨著反應的進行,吸光度越來越大,但速率保持不變,R2之後基本成一條直線,無明顯跳點(兩點速率法除外),如下圖:

註:上圖在加入R2之前為虛線,是因為R1+S的體積小於儀器要求的最低的反應總體積。

我們在看反應曲線的時候,眼裡是一條曲線,腦袋裡面浮現的應該是整個的檢測過程,去還原儀器的動作,分析從什麼時候吸光度突然變得異常。你可以想像成這盤菜是怎麼炒出來的。

3.反應曲線有什麼用,什麼時候用得著?

1)結果出現負值(終點法項目):

a.反應曲線有可能是一條直線,樣本或R2有可能沒有加入;

b. R2加入之前的吸光度比加入後還高,試劑1和試劑2位置放反或者嚴重脂血標本。可結合前一篇文章一起看:生化結果為什麼會出現負值?出現負值了怎麼辦?。

2)結果明顯偏低(速率法項目):反應曲線可能變成了類似於終點法的曲線,也就是我們通常說的底物耗盡,需要稀釋重測。

3)試劑過期或汙染、攪拌棒破損、攜帶汙染以及衝洗站滴水也會在反應曲線上有所體現。

4)總之,在結果比較可疑的情況下,可以調出反應曲線看看是否正常,有助於找出問題所在。

4.注意事項:

1)不同廠家或型號的儀器,加入樣本和試劑的順序可能不同,比如,日立是S+R1+R2。

2)部分儀器橫坐標是直接用時間表示,比如貝克曼LX/Dxc系列用的是秒,另外LX/Dxc系列的加樣順序有可能是R1+S+R2或者R1+R2+S。

3)部分儀器沒有把各個點連接起來,所以看到的是由點組成的曲線。

4)看反應曲線時,注意縱坐標的刻度,就像遠看是美女,近看就不一定了。

5)反應曲線界面還可以看到很多的信息,比如:光電校正、試劑空白、定標的時間以及每一點的吸光度,這些都會有助於判斷結果異常的原因。所以,你應該已經意識到,當有人問為什麼某項目的結果偏低、不正常時,僅憑一個結果是很難判斷的。

5.其他:

臨床醫生在診斷病情時一般會參考各科的檢驗報告單,反應曲線相當於是檢驗科判斷結果準確性的「檢驗報告單」。在遇到可疑的結果時,建議大家調出反應曲線看看。另外,其他儀器也有類似的功能,比如:糖化有層析圖,血球儀有散點圖等。希望大家能夠用好各種儀器提供的「檢驗報告單」,提高工作效率。

檢驗視界網微信平臺獨家首發,轉載請註明來源及作者!

相關焦點

  • 生化結果為何出現負值?9大原因,7個處理高招教給你!
    5、樣品針堵塞:樣品沒有被加入到反應杯,沒有發生反應,反應曲線是一條直線,吸光度沒有變化,差值為負,出現負值。  6、試劑R1/R2添加錯誤:很多實驗室應該都是習慣於在試劑快用完了時,往試劑瓶裡面添加試劑的做法,部分生化分析儀加樣順序是:樣本S+試劑R1+試劑R2,因為主要反應物在R2,如果放反了,樣本S和試劑R2直接就開始反應,吸光度上升,等試劑R1加入後吸光度下降,吸光度差值為負,結果出現負值。
  • 為什麼生化檢驗會出現負值?最經典的解釋
    大家總會提出為什麼測定會出現負值的問題,從儀器角度解釋一下測定數據是如何計算出來的,
  • 一文讀懂生存曲線及作圖
    目前臨床或者生命科學領域最常用生存率曲線(也稱Kaplan-Meier曲線)來描述各組患者的生存狀況或者各組實驗動物的存活情況。所以呢,我們今天介紹一種比較簡單地生存曲線的繪圖方法。
  • 為什麼功率因數會出現負值?
    概要:功率因數是衡量電氣設備用電效率的一個重要參數,功率因數低說明電路用於交變磁場轉換的無功功率大,電氣設備的電能利用效率低,線路的供電損耗大,常見都是正值,但現場測試時,會遇到功率因數出現負值或正負跳變,
  • 電腦卡怎麼辦簡單步驟 不用升級也可以讓電腦反應變快
    電腦卡怎麼辦簡單步驟 不用升級也可以讓電腦反應變快時間:2018-03-07 23:03   來源:今日頭條   責任編輯:毛青青 川北在線核心提示:原標題:電腦卡怎麼辦簡單步驟 不用升級也可以讓電腦反應變快 最近DIY市場對我們消費者不太友好,除開上年開始就貴的飛起的內存不談,今年顯卡漲價也漲的飛起,幸好CPU
  • 大量示例+簡單圖像!帶你讀懂神經網絡
    考慮一個二分類問題,目標是根據一組預測變量 x,嘗試將每個觀察結果分為由 y 定義的類別(例如類別或集群)。假設我們想根據患者的特徵來預測患者是否患有心臟病。這裡的因變量是絕對的,存在有限的結果,或者更明確地說是二元的,因為只有兩種類型(yes / no)。
  • 實驗結果表明,各種細胞的靜息電位均為負值
    實驗結果表明, 各種細胞的靜息電位均為負值, 如神經纖維約為-70~-90 m V, 平滑肌約為-50~-60 m V, 心肌細胞約為-90 m V等。值得注意的是, 由於記錄到的靜息電位都是以細胞膜外為零電位記錄的, 所以比較RP的高低都是用細胞膜內電位的負值進行比較的, 即負值越大表示靜息電位越大。
  • 金屬與酸反應曲線
    :m(H2) = 金屬化合價×金屬質量/Ar 根據化學反應方程式,有以下對應關係和質量關係                                Mg-H2  2/3Al-H2  Zn-H2  Fe-H2   24g-2g 18g-2g 65g-2g 56g-2g②、圖像解讀:此類圖像中,曲線的傾斜程度代表的是金屬活潑性
  • y=ax二次函數的基礎
    y=ax(初中3年級) 二次函數的基礎 接下來,我們要學習用二次式表達的二次函數。在初中數學中出現的二次函數,是二次函數最簡單的形式(如下)。y=ax 2 首先將整數-4到4代入y=x 2 中的x,來看看畫出的圖像是什麼形狀。
  • 科目二考試中,方向感很差應該怎麼辦?老司機教你一招
    科目二考試中,方向感很差應該怎麼辦?老司機教你一招文/號外燕姐說汽車 圖/網絡隨著汽車的普及,越來越多的人已經認識到駕照的重要性,要是沒有駕照,即便是自己有錢買車,也沒膽上路,畢竟一旦被交警抓到的話,就會受到嚴重的處罰,實在是有些不值得。
  • 微生物檢驗中常見的生化反應
    這種利用生化方法來鑑別細菌的試驗,統稱為細菌的生化試驗或生化反應,是識別細菌的重要方法之一。微生物生化反應是指用化學反應來測定微生物的代謝產物,生化反應常用來鑑別一些在形態和其他方面不易區別的微生物。因此微生物生化反應是微生物分類鑑定中的重要依據之一。微生物檢驗中常用的生化反應有:不同微生物分解利用糖類的能力有很大差異,或能利用或不能利用,或產氣或不產氣。
  • 【視光理解】第六季-5角膜地形圖裡的e值可以為負值嗎?到底代表什麼意思?
    ,這個負值代表什麼意思?怎麼辦呢?看下面這個值。  e2值這個值也經常在地形圖裡出現,一不小心沒選好設置,地形圖裡打出來不是e值,而是e2值。我們以往理解一個數的平方一定是正值,當你知道這個e2值的定義公式後就不這樣想了,上公式。
  • 出現不良反應怎麼辦?權威回應來了!
    有不良反應怎麼辦?針對公眾關心的問題,有關部門作出權威回應。怎麼預約、誰能儘快打?國家衛健委副主任、國務院聯防聯控機制科研攻關組疫苗研發專班負責人曾益新介紹,2020年12月15日開始,我國正式啟動了重點人群的接種工作。
  • 出現不良反應怎麼辦?權威回應來了!
    出現不良反應怎麼辦?權威回應來了!隨著國產新冠病毒疫苗附條件上市,上海、北京、山東等多個省份加快啟動大規模接種。怎麼預約、誰能儘快打?哪些禁忌症不能接種?有不良反應怎麼辦?科技部副部長徐南平說,根據國家生物信息中心掌握的近30萬條新冠病毒基因組序列的數據監測結果,綜合分析認為,目前觀察到的變異仍屬正常範圍的變異積累。徐南平同時表示,科研攻關組高度重視病毒變異問題,有專門方案,成立多個課題組對病毒變異、檢測試劑、藥物研發、疫苗使用效果等進行專題研究,「寧可備而不用,不可用而無備」。
  • 坤鵬論:讀懂了冪律,就讀懂了成功曲線
    1.通過二八法則理解冪律和冪律分布所謂冪律,其實最好的實例就是二八法則。簡而言之就是:越多的掌握在越少的人手中;等級越高越不均衡;極小或極少,會造成極多或極大的改變。除了二八法則之外,著名的Zipf定律也遵從於冪律,表現為典型的冪律分布。該定律是1932年,哈佛大學的語言學專家喬治·K.齊普夫在研究英文單詞出現的頻率時發現的。其定義為:在英語單詞中,只有極少數的詞被經常使用,而絕大多數詞很少被使用。實際上,包括漢語在內的許多國家的語言都有這樣的特點。
  • 高中數學圓錐曲線-二次曲線弦長萬能公式
    適當掌握些二級結論考試考得好的同學,是簡單的題做得又快又對,在前面的中低檔題中節約時間,為後面的大題預留寶貴的時間;這樣才能在考試中做到從容不迫。為提升同學們的解題速度,本系列以加快解題速度為核心來進行創作,總共有32篇,希望能為同學們提供幫助。
  • 家中出現白蟻怎麼辦?你的第一反應可能是錯的
    家中出現白蟻怎麼辦?你的第一反應可能是錯的 2020-03-24 21:05 來源:澎湃新聞·澎湃號·政務
  • 揭秘生化妊娠:為何受精卵寶寶們出現又離開?
    女人一輩子除了正常孕育,可能還有很多自己不知道的懷孕經歷,也許在你還沒來得及反應過來的時候,Ta就已經悄悄地走了,這就是令很多朋友無可奈何的「生化妊娠」。 對於很多女性來說,生化妊娠是一種得而復失的經歷,那麼生化妊娠到底是什麼回事呢?生化妊娠就是不好嗎?今天讓我們好好了解一下。
  • 細菌鑑定中常用的生理生化反應——萬融實驗
    微生物代謝類型多樣性具體表現在生理生化反應的多樣性。不同細菌具有不同的酶系統,分解糖類、胺基酸等有機物的能力各異,從而使產生的分解產物亦有不同。因此,藉助各種生理生化反應可以鑑別細菌的種類,這是微生物分類鑑定的重要依據。1.大分子物質水解微生物在生長繁殖過程中需要不斷地從外界環境中吸收營養物質。
  • 手把手教你用 GraphPad 繪製藥物劑量反應曲線
    -06-05 01:01:01 來源: 生物學霸 舉報   學腫瘤的親們一定知道藥物劑量反應曲線