默克密理博獨家iPS技術及領先解決方案簡介

2021-01-10 生物谷

作者：李琳

2006年8月，Shinya Yamanaka[1]領導的研究小組在日本京都大學（Kyoto University）利用逆轉錄病毒，將4種轉錄因子Oct4、Sox2、Klf4 和c-Myc轉入小鼠成纖維細胞，首次將體細胞直接重編程為胚胎幹細胞樣的多潛能幹細胞，即誘導多能幹細胞(Induced pluripotent stem cells, iPSCs)，震驚了全世界，也標誌了體細胞重編程為iPS細胞技術的誕生。由於細胞重編程技術對人類疾病和細胞分化等過程的重大意義，以及直接避開了倫理和免疫排斥等問題，iPS技術的研究迅速在全世界展開。迄今為止，人[2, 3]、大鼠[4, 5]、豬[6, 7]、猴[8]和兔[9]等物種的iPS細胞系皆已建立，並已成功的應用於疾病模型的建立與機理研究、藥物的發現與評價等方面，可見iPS技術在人類疾病的臨床治療等方面極具應用前景。


密理博公司作為全球生命科學的領先者，從2008年開始連續3年舉辦「幹細胞與表觀遺傳學」亞洲生物高峰論壇，並且於2010年9月15日~17日與中科院上海乾細胞庫聯合舉辦一期「iPS技術專題培訓班」，有志於讓更多從事幹細胞生物學、表觀遺傳學、醫學等相關領域的科研工作者更快更好的了解iPS技術。此次「iPS技術專題培訓班」採用實驗操作與講座學習相結合的方式，詳細講解了iPS技術相關的慢病毒的包裝，滋養層細胞的製備和鋪制，iPS細胞的產生、培養和鑑定等實驗技術，也為學員們在iPS相關的實驗過程中遇到的各種疑難問題做了詳細解答。此外，培訓中也展示了密理博在iPS研究領域提供的全新工具及解決方案。


在以往的iPS技術中，病毒的滴度不高且多個病毒的導入都使得iPS細胞轉化效率極低，而Millipore和波士頓大學合作研發的STEMCCA試劑盒，採用單一病毒載體提供大於3×108 IFU/ml的高低度病毒，同時表達4個轉錄因子（Yamanaka Factors：Oct4，Klf4，Sox2和cMyc），既簡單方便，更大大減少了病毒整合所帶來的風險。該技術的技術要點主要是2A肽技術（2A Peptide Technology）和內在的核糖體插入位點技術（Internal Ribosomal Entry Site, IRES），並提供兩種選擇：持續表達，可敲除導入基因，後者使得iPS轉化實驗更安全，細胞更易分化。


在篩選iPS克隆時，除了最常用的鹼性磷酸酶檢測試劑盒，Millipore還新推出了Human iPS Selection Kit，可用於hESC和Fully Reprogrammed human iPSC的多能性監測，該試劑盒可以更直觀的監測iPS細胞克隆，簡單快速的進行活細胞篩選，且非破壞性，篩選後的iPSC可繼續培養、傳代。同時，Millipore公司提供從體細胞細胞系，重編程試劑盒，篩選試劑盒，以及一系列的鑑定試劑盒等iPS技術相關的全套產品，為從事該領域研究的科研工作者提供了全方面的周到服務。

產品及技術支持熱線：400-889-1988

聯繫作者：china_bioscience_marketing@millipore.com

參考文獻：

1. Takahashi K, Yamanaka S. Induction of pluripotent stem cells from mouse embryonic and adult fibroblast cultures by defined factors. Cell, 2006, 126(4):663～676

2. Takahashi K, Tanabe K, Ohnuki M, et al. Induction of pluripotent stem cells from adult human fibroblasts by defined factors. Cell, 2007, 131(5):861～872

3. Yu J, Vodyanik M A, Smuga-Otto K, et al. Induced pluripotent stem cell lines derived from human somatic cells. Science, 2007, 318(5858):1917～1920

4. Liao J, Cui C, Chen S, et al. Generation of induced pluripotent stem cell lines from adult rat cells. Cell stem cell, 2009, 4(1):11～15

5. Li W, Wei W, Zhu S, et al. Generation of rat and human induced pluripotent stem cells by combining genetic reprogramming and chemical inhibitors. Cell Stem Cell, 2009, 4(1):16～19

6. Wu Z, Chen J, Ren J, et al. Generation of Pig Induced Pluripotent Stem Cells with a Drug-Inducible System. J Mol Cell Biol, 2009, 1(1):46～54

7. Esteban Ma, Xu J, Yang J, et al. Generation of induced pluripotent stem cell lines from tibetan miniature pig. J Biol Chem, 2009, 284(26):17634～17640

8. Liu H, Zhu F, Yong J, et al. Generation of induced pluripotent stem cells from adult rhesus monkey fibroblasts. Cell Stem Cell, 2008, 3(6):587～590

9. Honda A, Hirose M，Hatori M, et al. Generation of induced pluripotent stem cells in rabbits: potential experimental models for human regenerative medicine. J Biol Chem, 2010 Jul 29, M110.150540

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