DyLight 594(A23430)螢光二抗,兔抗山羊,該抗體與山羊IgG全分子反應。它也與山羊IgG的重鏈,以及山羊其它免疫球蛋白的輕鏈發生反應。它對非免疫球蛋白的血清蛋白沒有反應性。但它可能與其它物種的免疫球蛋白有潛在的交叉反應。
HEp-2細胞,檢測系統為ANA一抗(Bio-Rad) 和不同螢光標記的二抗。使用的抗淬滅封片劑為ProLong Gold (Invitrogen)。Nikon LABOPHOT螢光顯微鏡觀察,Texas Red二抗光下暴露2秒,Alexa 和DyLight二抗光下暴露1秒後選取最亮的部分用Nikon D-70 DSLR相機放大100X拍照。DyLight 594-標記的抗體,其最大吸收在591 nm,最大發射為616 nm。比Alexa 594明顯要亮,亮度和水溶性都比Texas Red好很多。
ProLong Gold封片時,DyLight 594與Alexa 594相比光穩定性相當,比強。Vectashield封片時,DyLight 594和 Alexa 594的光穩定性都比Texas Red弱。含 n-propyl gallate的PBS-甘油封片時,DyLight 594的光穩定性最強.
一、實驗建議:
最佳的工作稀釋比例需要客戶摸索優化。對於大多數免疫螢光實驗,建議的起始稀釋比例為:1:50-1:1000。
二、特點:
DyLight系列染料是一種近年來被廣泛應用的新型螢光染料,其吸收峰最大值可從350nm直到777nm,具有卓越的光譜寬度、更強的螢光強度,更高的光學耐受性(抗淬滅性)、對pH不敏感(pH4-9)、分子較小而滲透性更好,且由於其水溶性可以實現高染料與蛋白質的比例,而不引起共軛物的沉澱的優勢,越來越受到科研客戶的喜愛。
DyLigh系列螢光標記是一種近年來被廣泛應用的新型螢光染料,由於具有很好的光譜寬度、更強的螢光強度,更高的光學耐受性(抗淬滅性)、對pH不敏感、分子較小而滲透性更好的優勢,越來越受到科研客戶的喜愛。DyLight種類齊全,如Dylight 405是藍色螢光,替代Alexa 405;Dylight 488是綠色螢光,可完全替代FITC/Cy2/Alexa 488;完全替代Cy3/Rhodamin/Alexa 546/Alexa 555的Dylight 549;替代Texas Red/Alexa 594的Dylight 594;Dylight 633和Dylight 649(可替代Cy5/Alexa 647)則是更強的紅色螢光;另外,Dylight還有適配Odyssey系統的近紅外和遠紅外二抗Dylight 680和DyLight 800。
文章來源:每日生物評論
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