業餘經營，留下一點南方醫的痕跡；如果覺得有用，希望師弟師妹考完試後呢，可以給H師兄發一份考試回憶錄（選擇題、名詞解釋、簡答題、病例分析這些）或者個人的一些備考經驗，任何有用的資料都可以；互幫互助，醫路共勉！
----感謝 兔子inHere 的投稿
報告日期 2019-06-25
1. 實驗目的
（1）學會坐骨神經-腓腸肌標本的製備，學會蟾蜍的基本操作；熟悉 PCLab 的使用。
（2）通過觀察骨骼肌的收縮形式，了解不同刺激強度與頻率對神經-肌肉收縮的影響。
（3）明確閾刺激、閾上刺激、閾下刺激、不完全強直收縮、完全強直收縮的概念。
2.材料與方法
2.1材料或/和動物
動物：蟾蜍
材料：
①藥品：任氏液
②器材：蛙類手術器械1套，刺蛙針1根，鋅銅弓1隻，玻璃分針一根，萬能支架，生物信號採集系統，張力換能器。
2.2方法
2.2.1坐骨神經—腓腸肌標本的製備
（1）破壞腦脊髓：左手握蟾蜍，食指下壓吻端，拇指按壓背部，其餘三指緊貼腹部，找到枕骨大孔刺入1-2MM，分別搗毀腦組織和脊髓。（腦和脊髓完全被破壞的標誌是：呼吸停止，四肢鬆軟並處於對稱部位）
（2）剪除軀幹上部及內臟：在骶髂關節水平上1釐米處剪短脊柱，去除頭，前肢和內臟，保留部分脊柱和下肢。
（3）剝皮：剪去尾骨，剝去剩餘組織的皮膚，沿著脊柱正中到恥骨聯合將標本剪開，標本放在盛有任氏液的燒杯中。
（4）游離坐骨神經：腓腸肌白色肌腱向上將標本固定於蛙板上，順著坐骨神經走向用玻璃分針將坐骨神經上方的肌肉分開，至膝關節處，暴露坐骨神經。在坐骨神經起源下1釐米處剪斷椎骨，剪去坐骨神經周圍的小分支和肌肉，游離坐骨神經。
（5）製成坐骨神經——腓腸肌標本：去除股骨附著的所有大腿肌肉，剪斷股骨（保留約1釐米），在跟腱處結紮並游離腓腸肌，將膝關節以下小腿部分全部剪除，剩下即為坐骨神經-腓腸肌標本。
（6）標本檢驗：用鋅銅弓輕輕刺激坐骨神經，腓腸肌收縮即表示標本製備完好。
2.2.2觀察肌肉收縮的性質
（1）連接刺激器和記錄裝置
①將張力換能器和肌槽固定在鐵支架上，張力換能器的輸出端連接放大器通道Ⅲ。
②以股骨作支點固定，腓腸肌與張力換能器連接，將穿好手術線的坐骨神輕輕提起，放在刺激電極上，並保證接觸良好。
（2）刺激強度對肌肉收縮的影響
①Pc_Lab實驗項目選擇；
②刺激方式用單刺激,刺激電壓初始值設為0V，將刺激強度逐步增大（0.04-0.3 0V,0.5ms），觀察肌肉收縮反應出現和相應增大，讀出閾刺激和最大刺激強度數值。
（3）肌肉的單收縮和強直收縮
①選用串刺激，串脈衝數選「1」，用最大刺激強度採樣，觀察波形的高度與寬度。
②選用串刺激，其他參數與單收縮相同，即可進行採樣，並及時觀察波形變化情況。逐漸增加脈衝數(1,3,6,…,15) ，觀察肌肉收縮形式的變化。
3. 結果與討論
3.1不同刺激強度刺激坐骨神經對腓腸肌收縮張力的影響
圖3-1蟾蜍骨骼肌單刺激結果圖（略）
刺激方式採用單刺激,刺激電壓初始值設為0V，將刺激強度逐步增大刺激坐骨神經，記錄肌肉收縮張力結果如下。由圖可知：在刺激強度為0.04V-0.05V時肌張力處於基線水平，不能引起肌肉發生收縮反應，為閾下刺激；當電壓增加到0.06V時突然出現一個小張力波形，此時肌肉收縮反應出現，說明蟾蜍腓腸肌的閾刺激為0.06V。繼續逐步增大刺激強度，可觀察到肌肉收縮張力也逐步增大，此時刺激的強度超過閾值，即閾上刺激。逐步增大刺激強度達0.15V後，可發現之後不管如何增大刺激強度，都不再引起肌肉收縮張力增加，而是在最大收縮強度附近波動,即0.15V為能引起最大收縮的最小刺激強度，為最適刺激強度。
由該實驗現象可得：0.05V為該蟾蜍坐骨神經的閾下刺激。0.06V為該蟾蜍坐骨神經的閾刺激。0.15V為該蟾蜍坐骨神經-腓腸肌的最適刺激。
3.2不同刺激頻率刺激坐骨神經對腓腸肌收縮張力的影響
圖3-2 蟾蜍骨骼肌串刺激結果圖（略）
由該圖可知，逐漸增加脈衝次數，當脈衝次數為18時，出現鋸齒狀的複合收縮曲線；當脈衝次數增加到26時，出現一個相對平滑的高波曲線，幅度比之前的大，繼續增大脈衝次數，曲線波形無變化。
因此由該實驗結果可知，當脈衝次數增加到18後，出現鋸齒狀複合收縮曲線，說明出現了不完全強直收縮；當脈衝次數增加到26後，鋸齒狀的曲線波形變為一個曲線平滑的高波，波形高度更高，說明出現了完全強直收縮。
3.3討論
3.3.1實驗過程需要注意的是：
（1）製作標本時，不能用金屬器械碰神經幹， 以免損壞神經，影響實驗後續操作；分離神經要將周圍結締組織剝離乾淨；不能用力牽拉損傷神經，經常用任氏液潤溼神經。
（2）固定張力換能器時，多採用「一維微調固定器」，由上下位置調節鈕控制，可在小範圍內（上下）精細的移位。這不僅方便了實驗操作，也有利於前負荷的控制。
（3）測量的方向，即力與位移的方向，要與張力換能器彈性懸梁的前端上下移動的方向保持一致。使能量轉換和線性關係良好，符合張力換能器設計與使用上的要求。
（4）記錄肌肉收縮類實驗指標時，張力換能器金屬彈性懸梁外露的前端向下移位（下拉），收縮曲線為正立的，即肌收縮時，基線上移，舒張時下移，較為符合一般描記觀察的習慣。
（5）在使用時不能用手牽拉彈性梁和超量加載。張力換能器的彈性梁屈服極限為規定量程的2～3倍。有經過防水處理，水滴入或滲入換能器內部會造成電路短路，損壞換能器。
（6）換能器與記錄儀或生理信號採集處理系統配合使用時，為了精確測量，需要調零和定標（自動平衡類產品不需換能器調零）。
（7）不進行正式記錄時，電子刺激器輸出應斷開，以免不必要的、頻繁的刺激；刺激器兩輸出端不要短路。
（8）用剛能引起肌肉最大收縮的強度刺激，不要刺激過強而損傷神經。當直接刺激神經失效時，可直接刺激肌肉。
3.3.2 由圖3-1看出，在一定範圍內，肌肉的收縮張力和收縮頻率（即肌肉收縮性質），與所受刺激的頻率和強度有關。即在一定範圍內，其他條件不變時，肌肉的收縮張力與刺激強度呈正相關，肌肉的收縮頻率與刺激頻率呈正相關。若刺激強度低於該範圍，則表現為肌肉無反應。分析原因可能是由於一塊肌肉由許多肌纖維組成,骨骼肌的收縮受運動神經元的支配。單個運動神經元可支配多根肌纖維，一個運動神經元與它所支配的肌纖維組成一個運動單位。而不同的運動單位興奮閾值不同。低於閾刺激的刺激強度，神經纖維不發生興奮，其所支配的肌細胞也不發生反應；因此當刺激電壓達到閾強度時，神經幹中閾值最低的神經開始興奮，其所支配的運動單位也興奮並發生收縮。刺激強度逐漸增大，神經幹中興奮的神經纖維增加，收縮的運動單位也增加，於是骨骼肌收縮張力增加。當刺激電壓達到最大刺激強度後，所有的神經纖維都興奮，其所支配的所有的運動單位也收縮，所有刺激強度再增大。骨骼肌收縮力也不再增加。
3.3.3 由圖3-2可以看出，對蟾蜍骨骼肌進行串刺激，逐漸增加脈衝次數，結果圖會由數個獨立的單峰變成鋸齒狀複合曲線，再變成一個曲線平滑的高峰。分析原因，可能是蟾蜍腓腸肌在收縮時，肌細胞會相繼出現絕對不應期、相對不應期、超常期和低常期，若在相對不應期或者超常期早期給予細胞另外一個刺激，肌細胞的第一次興奮正處於舒張期，而新的刺激會使得肌肉發生收縮，以致於肌肉會出現持續收縮的狀態，即不完全強直收縮；但若在肌細胞興奮地低常期或者超常期後期給予一個新的刺激，肌細胞此時正處於收縮狀態，新的刺激也會使得細胞收縮，兩次收縮效果相疊加，肌肉處於持續最大收縮狀態，即完全強直收縮。接著隨著刺激頻率增加，每次刺激時間間隔逐漸縮短，肌肉收縮的反應可以融合，開始表現為不完全強直收縮，然後變成完全強直收縮。
4. 結論
在一定範圍內，肌肉的收縮張力和收縮頻率（即肌肉收縮性質），與所受刺激的頻率和強度有關。即在一定範圍內，其他條件不變時，肌肉的收縮張力與刺激強度呈正相關，肌肉的收縮頻率與刺激頻率呈正相關。若刺激強度低於該範圍，則表現為肌肉無反應；若刺激頻率超出該範圍，則表現為完全或不完全強直收縮。