分光光度法定義：基於物質對光的選擇性吸收而建立的分析方法稱為分光光度法,也稱吸光光度法，包括紫外可見分光光度法及紅外光譜法等。
紫外可見分光光度法所用的光譜區域為200-780nm，其中紫外分光光度法為200-400nm，可見分光光度法為400-780nm。紅外光譜法為2.5-1000um。
應用實例：
賽默飛Thermo Scientific NanoDrop One 超微量紫外-可見光分光光度計，寬光譜範圍（190-850 nm）用於測量各種樣品類型，常用檢測功能包括：
多肽測定（205 nm）
純化蛋白質（280 nm）
核酸檢測：檢測dsDNA、ssDNA、RNA等不同類型核酸的濃度及樣品純度（A260/A280 nm 及 A260/A230 nm）
毒理學測定和工業染料（490 nm）
金納米顆粒（520 nm）
Nano-400A為固定波長260nm，280nm雙波長系統，主要用於260/280比值檢測核酸的濃度和純度；還可在280nm處檢測蛋白質的濃度；
Nano 300超微量分光光度計可在200～800nm波長範圍內對 DNA、RNA 和蛋白質樣品檢測，適用於多種樣品類型（DNA、RNA和蛋白質樣品等）的定量、定性和全光譜數據分析。如多肽(205nm)，蛋白A280和A205，比色法測定BCA、Bradford或Lowry標定的蛋白樣品（BCA 562nm、Bradford 595nm、改進的Lowry 650nm、Pierce 660nm）；
分光光度法的發展歷程：
最初人們發現很多物質都具有顏色，例如Mn04- 為紫紅色，Fe3+為黃色，當含有這些物質的溶液濃度改變時，溶液顏色的深淺度也就隨之改變。溶液越濃顏色越深，反之，溶液越稀顏色越淺，因此利用比較溶液顏色深淺的方法來確定溶液中有色物質的含量，這種方法稱為「目視比色法」。
隨後人們又認識到溶液的顏色是由於對光的選擇性吸收而產生的，可以利用濾光片和光電池客觀的測量溶液的濃度，從而出現了「光電比色法」。隨著近代測試儀器的發展，用分光光度計代替比色計，出現了分光光度法。
溶液顏色與光吸收的關係
日常所見的白光，如日光、白熾燈光，都是混合光，即它們是由波長400-780nm的電磁波按適當強度比例混合而成的，這段波長範圍的光是人們視覺可覺察到的，所以成為可見光。當電磁波的波長小於400nm時成為紫外光，大於780nm的稱為紅外光，都是人們視覺覺察不到的光。
互補色光：當將某兩種顏色的光按適當強度比例混合時，可以形成白光，這兩種色光就稱為互補色光。
當一束白光（混合光）通過某溶液時，如果該溶液對可見光區各種波長的光都沒有吸收，即入射光全部通過溶液，則溶液呈無色透明狀。
當該溶液對可見光區各種波長的光全部吸收時，則該溶液呈黑色。
如某溶液對可見光區某種波長的光選擇性地吸收，則該溶液即呈現出被吸收波長光的互補色光的顏色。
例如，當一束白光通過KMnO4溶液時，該溶液選擇性的吸收了綠色波長的光，而將其它的色光兩兩互補成白光而通過去，只剩下紫色光未被互補，所以KMnO4溶液呈現紫色。
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