磷鉬藍分光光度法測定磷酸根含量實驗提要

2021-02-13 吉大化院分析化學實驗室

實驗目的：

1學習分光光度計、移液槍的使用

2 掌握陰離子光度檢測方法

3 掌握使用Excel等軟體繪製曲線地方法

4，計算摩爾吸光係數


實驗原理

在酸性條件下，正磷酸鹽與鉬酸銨反應生成黃色的磷鉬雜多酸，再用抗壞血酸還原成磷鉬藍，根據比爾定律於最大吸收波長處用分光光度法測定磷酸根濃度。


實驗步驟

1. 取2.00mL磷標準溶液於25mL比色管中，依次加入約5mL水、1mL鉬酸銨溶液，1.5mL抗壞血酸溶液，用水稀釋至刻度，搖勻，於室溫下放置20min.

在分光光度計600-800nm處，用1㎝吸收池，以空白調零測吸光度，間隔10 nm測定吸光度，確定最大吸收波長。


2. 取2.00mL磷標準溶液於25mL比色管中，依次加入約5mL水、1mL鉬酸銨溶液，1.5mL抗壞血酸溶液，用水稀釋至刻度，搖勻，在最大吸收波長處，用1㎝吸收池，以空白調零測吸光度，分別測定在混合1、2、5、10、15、20分鐘後吸光度，確定反應時間。


3. 工作曲線的繪製：分別取0.00（空白），0.10mL，0.20mL，0.50mL，1.00mL，1.50mL，2.00mL，磷標準溶液於7個25mL比色管中，依次向各瓶中加入約5mL水、1mL鉬酸銨溶液，1.5mL抗壞血酸溶液，用水稀釋至刻度，搖勻，於室溫下放置10min.在最大吸收波長處處，用1㎝吸收池，以空白調零測吸光度。以測得的吸光度為縱坐標，相對應的磷酸根量為橫坐標繪製工作曲線。


4, 計算磷酸鹽與鉬酸銨反應的摩爾吸光係數


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