第一篇臨床檢驗基礎
第一單元血液樣本採集和血塗片製備
第一節血液生理概要
血液的組成及生理功能(了解)
1.組成:血液由血細胞(紅細胞、白細胞、血小板)和血漿組成。血清與血漿相比,血清缺少一部分凝血因子,如Ⅰ(纖維蛋白原)、Ⅱ(凝血酶原)、Ⅴ、Ⅷ等凝血因子。
2.血液性質:
(1)血量:血漿佔55%,血細胞佔比45%。
(2)酸鹼度:pH7.35~7.45。
(3)血漿滲透壓:290~310mOsm(kg·H2O)。
(4)健康成年人全血黏度為生理鹽水的4~5倍。
(5)比密:1.050~1.060,男性:1.055~1.063;女性:1.051~1.060。
3.生理功能:運輸功能、協調功能、維護機體內環境穩定和防禦功能。
4.血液特性:紅細胞的懸浮穩定性、黏滯性、凝固性。
第二節採血方法和採血管選擇(熟練掌握)
1.靜脈採血法:成年人靜脈採血常選肘部靜脈(壓脈帶捆綁不超過1分鐘)。
2.真空採血法:真空採血法是一種新的靜脈採血法,又稱負壓採血法。真空採血裝置有套筒式、頭皮靜脈式兩種。
3.皮膚採血法:通常選擇耳垂或手指部位。WHO推薦血常規檢查採集左手無名指指端內側血液,嬰幼兒可選擇大拇趾或足跟內外側緣血液,嚴重燒傷患者可選擇皮膚完整處。
4.方法評價:真空採血法是ICSH推薦的採血方法,也是臨床常用的採血方法。
5.質量控制(了解)
(1)患者:患者活動情況、精神狀態、藥物、年齡、性別、種族、樣本採集時間、吸菸、季節等都會影響檢測結果。
(2)採血:止血帶結紮時間應小於1min。
(3)溶血:容器不潔、接觸水、強力振蕩、操作不慎等可引起溶血,使紅細胞計數、血細胞比容、血漿或血清化學成分(如鉀、鎂、轉氨酶、膽紅素)等多項指標檢驗結果發生變化。
(4)樣本處理:血液樣本採集後應立即送檢,並儘快進行檢查,樣本保存不當直接影響實驗結果。
(5)實驗結果分析:分析結果時,應考慮藥物、飲食等因素對結果的影響。同時,應密切結合臨床。
第三節抗凝劑選擇
常見抗凝劑原理及其用途(掌握)
表1-1-2常用抗凝劑比較
第四節血液塗片製備
考點一、載玻片的清潔(掌握)
新載玻片常帶有游離鹼質,必須用約lmol/L HCl浸泡24h,清水衝洗,乾燥後備用。用過的載玻片可用適量肥皂或其他洗滌劑煮沸20min,趁熱刷去血膜,清水衝洗,必要時蒸餾水浸泡,乾燥後備用。要保持載玻片的清潔、乾燥、中性、無油膩。
考點二、血塗片的製備(熟練掌握)
1.手工推片法:塗片時,推片與載玻片保持25°~30°夾角。
2.厚血膜塗片法:臨床上常用厚血膜法檢查瘧原蟲與微絲蚴。
3.良好血塗片標準:厚薄適宜、頭體尾分明、細胞分布均勻、血膜邊緣整齊、兩側有一定空隙、血膜佔玻片的2/3。
4.方法學評價:手工推片法用血量少、操作簡單,是應用最廣泛的方法。此外,瘧原蟲、微絲蚴等檢查可採用厚血膜塗片法。
5.質量控制:血細胞比容增高,血液黏度較高時,應小血滴、小角度、慢推,反之亦然。新載玻片必須用1mol/L的鹽酸清洗後才能使用。
第五節血液細胞染色
考點一、瑞氏染色(熟練掌握)
瑞氏染色是血塗片最常用、最經典的染色方法,對細胞質和顆粒染色效果好。
1.染液組成:鹼性亞甲藍、酸性伊紅、甲醇(作為溶劑及固定細胞形態)。
2.原理:物理吸附和化學親和作用。
3.染色效果:最適pH為6.4~6.8。若緩衝液偏酸,則紅細胞和嗜酸性粒細胞偏紅,細胞核呈淡藍色或不著色。若緩衝液偏鹼,細胞染色染成灰藍色,顆粒深暗;嗜酸性粒細胞可染成暗褐色,甚至棕黑色;中性顆粒偏粗,染成紫黑色。
4.注意事項:(1)在距玻片另一端2cm處結束塗抹為宜;(2)血塗片上有染料顆粒沉積,可滴加甲醇,然後立即用流水衝洗;(3)染色過淡,可復染,復染時先加緩衝液再加染液;(4)新鮮配製的染液染色效果差,應貯存一段時間,時間越久,染色效果好。
考點二、吉姆薩染色(了解)
吉姆薩染色對細胞核和寄生蟲著色較好。
1.染液組成:天青、伊紅、甲醇、純甘油。
2.原理:同瑞氏染色。
記憶方法:血紅蛋白,嗜酸性顆粒(鹼性蛋白質):具有嗜酸性——伊紅結合;細胞核蛋白、淋巴細胞、嗜鹼性粒細胞胞質(酸性蛋白質):具有嗜鹼性——亞甲藍結合。
第二單元紅細胞檢測
第一節概要
考點一、紅細胞生理(了解)
紅細胞(RBC)是血液中數量最多的細胞成分,成熟RBC的平均壽命為120天、白細胞與血小板7~14天,衰老的RBC主要在脾破壞。
考點二、血紅蛋白(了解)
血紅蛋白分子是有核紅細胞、網織紅細胞內形成的一種含色素蛋白質。色素部分為亞鐵血紅素,蛋白質部分為珠蛋白。亞鐵血紅素由原卟啉、鐵組成。血紅蛋白的合成受紅細胞生成素和雄激素的調節。
第二節紅細胞計數
紅細胞(RBC)計數(掌握)
1.紅細胞計數常用稀釋液
(1)Hayem稀釋液:由NaCl(調節滲透壓)、Na2SO4(提高比重防止細胞粘連)、HgCl2(防腐)和蒸餾水組成;
(2)枸櫞酸鈉稀釋液:由NaCl(調節滲透壓)、枸櫞酸鈉(抗凝作用)、甲醛(防腐)及蒸餾水組成。
2.牛鮑計數板計數RBC
(1)計數公式:紅細胞/L=N×25/5×10×200×106=N(5個中方格的RBC總數)/100×1012。
(2)牛鮑計數板:中央5個中方格是紅細胞和血小板計數區域,四角的4個大方格是白胞計數區域。
3.參考值:成年人:男性4.0~5.5×1012/L;女性3.5~5.0×1012/L;新生兒6~7×1012/L。
4.臨床意義
(1)生理變化:①新生兒、精神刺激、劇烈運動、氣壓減低可導致紅細胞增多;②妊娠期婦女和老年人紅細胞常減低。
(2)病理變化:①急慢性失血、紅細胞壽命縮短,造血原料不足,骨髓造血功能減退可引起貧血,造成紅細胞(或血紅蛋白)減少;②紅細胞增多症、心血管疾病、肺部疾病、嘔吐、嚴重腹瀉、大面積燒傷以及某些藥物均可引起RBC增多。
第三節血紅蛋白測定
血紅蛋白(Hb)測定(掌握)
1.檢測原理
(1)氰化高鐵血紅蛋白(HiCN)測定法:血液中除硫化血紅蛋白(SHb)外的各種Hb均可被高鐵氰化鉀氧化成高鐵血紅蛋白,在540nm處測定吸光度,再換算得到Hb的濃度。
(2)十二烷基硫酸鈉血紅蛋白(SDS)測定法:血液中SHb外的各種Hb均可與低濃度SDS形成棕紅色化合物,在538nm處測定吸光度,再換算得到Hb的濃度。評價:HiCN是目前國際推薦的參考方法,致命缺點是氰化鉀有劇毒,SDS是次選方法。
(3)血紅蛋白成分:HbA:α2β2,佔95%,含量最多;HbF:α2γ2,胎兒血紅蛋白,佔1%;HbA2:α2σ2,佔2%~3%。
2.參考值:成年人:男性120~160g/L;女性110~150g/L。新生兒:170~200g/L。
3.臨床意義:Hb和RBC臨床意義相似,但在臨床判斷貧血程度上,Hb測定優於RBC計數。
4.HiCN法測定注意事項
(1)HiCN轉化液應貯存在棕色有塞玻璃瓶中(不能用塑料瓶);
(2)氰化鉀有劇毒,測定後的廢液應收集於廣口容器中,稀釋後加次氯酸鈉混勻,敞開容器放置15小時以上再排入下水道;
(3)廢液不能與酸性溶液混合,避免產生劇毒氣體。
第四節紅細胞形態檢查
考點一、正常紅細胞形態(掌握)
正常紅細胞形態特點:雙凹圓盤形,大小一致,平均直徑7.2μm,呈淡粉紅色,中央1/3為生理性淡染區,胞質無異常結構,無細胞核。大小改變:小紅細胞直徑<6μm;大紅細胞直徑>10μm;巨紅細胞直徑>15μm。
考點二、紅細胞形態改變常見疾病(掌握)
球形RBC:遺傳性或獲得性球形紅細胞增多症。
鐮形RBC:鐮狀細胞貧血。
棘RBC:遺傳性β脂蛋白缺乏症、尿毒症。
裂RBC:彌散性血管內凝血、正常人(<2%)。
有核RBC:溶血性貧血最常見。
靶形RBC:珠蛋白生成障礙性貧血、缺鐵性貧血。
緡錢狀RBC:多發性骨髓瘤(MM)。
口形RBC:遺傳性口形紅細胞增多症、酒精中毒,正常人(<4%)。
淚滴形RBC:骨髓纖維化和正常人。
考點三、紅細胞內結構異常(掌握)
1.嗜鹼性點彩紅細胞:細胞胞質內出現形態不一,大小不等的藍色顆粒(殘存變性嗜鹼性RNA),常用於鉛中毒的篩查指標。
2.豪焦小體(H-J)小體:又稱染色質小體,是位於成熟或幼稚紅細胞細胞質中的紫紅色小體,已證實為核的殘餘物,見於脾切除後等疾病。
3.卡波環:紫紅色細線圈狀、呈環形或「8」字形,可能是核膜殘餘物、紡錘體殘餘物或脂蛋白變性所致,見於白血病、巨幼細胞性貧血等疾病。
第五節血細胞比容測定
血細胞比容(Hct)測定
1.參考值:溫氏法:男性0.40~0.50;女性0.37~0.48。
(微量法為WHO推薦的常規方法;血液分析儀法:臨床常用;ICSH定為參考方法:放射性核素法)。
2.溫氏法操作要點:標本加入溫氏管離心分5層:自上而下依次為血漿層、血小板層、白細胞層和有核紅細胞層、還原紅細胞層、帶氧紅細胞層。計算時讀取還原紅細胞層(紫黑紅色)。
第六節紅細胞平均指數
考點一、紅細胞平均指數(掌握)
表1-2-1紅細胞評價指數
考點二、貧血形態學分類及意義(掌握)
表1-2-2貧血形態學分類及意義
第七節紅細胞體積分布寬度
考點一、紅細胞體積分布寬度(掌握)
1.紅細胞體積分布寬度(RDW):反映樣本中RBC體積大小的異質程度(客觀指標),常用變異係數(CV)表示。
2.參考值:11.6~14.6%。
3.臨床意義:貧血形態學分類:根據RDW和MCV將貧血分為小細胞均一性、小細胞不均一性、正常體積均一性、正常體積不均一性、大細胞均一性、大細胞不均一性。紅細胞直方圖波峰(主峰)左移:小細胞、MCV↓;波峰右移:大細胞、MCV↑。峰底變寬:不均一,RDW↑;峰底變窄:均一性,RDW正常。
考點二、貧血MCV/RDW分類法(掌握)
表1-2-3貧血MCV/RDW分類
第八節網織紅細胞計數
網織紅細胞(Ret)計數(掌握)
1.原理:網織紅細胞是介於晚幼紅細胞和成熟紅細胞之間的過渡細胞,屬於未完全成熟的紅細胞。胞質內殘存嗜鹼性物質核糖核酸(RNA),可被新亞甲藍、煌焦油藍等染料活體染色呈網狀或顆粒狀結構而得名。
2.分類:
(1)網織紅細胞根據形態特徵和成熟程度分為4型:Ⅰ型(絲球型)、Ⅱ型(網型)、Ⅲ型(破網型)和Ⅳ型(點粒型)。
(2)正常人外周血可見Ⅲ型和Ⅳ型,Ⅲ型佔20%~30%,Ⅳ型佔70%~80%,若骨髓增生明顯,可出現Ⅰ、Ⅱ型。
3.參考值:顯微鏡計數法:成年人0.008~0.02或(25~85)×109/L;新生兒0.02~0.06。
Ret絕對值(×109/L)=紅細胞×Ret百分數(%)。
4.臨床意義
(1)是反映骨髓造血功能的重要指標,當骨髓Ret增多,而外周血Ret減少時,提示釋放障礙。Ret增多:常見於溶血性貧血;Ret減少:常見於再生障礙性貧血。
(2)觀察貧血療效:缺鐵性貧血(或巨幼細胞性貧血)給予鐵劑(葉酸和維生素B12)治療,3~5天Ret開始上升,7~10天達到峰值,2周左右開始下降。Ret是判斷缺鐵性貧血鐵劑治療有效的最快速指標。
5.操作方法
(1)操作步驟:2滴10g/L煌焦油藍溶液和2滴全血立即混勻,37℃放置15~20分鐘,推片製片後,在油鏡下計數至少1000個紅細胞中網織紅細胞數。
(2)計算公式:①常規法:1000個紅細胞中的網織紅細胞數/1000×100%;②Miller窺盤計數公式:大方格B內的網織紅細胞數/(小方格A內的紅細胞數×9)×100%。該方法為ICSH推薦方法。
第九節點彩紅細胞計數
嗜鹼性點彩紅細胞(掌握)
1.操作方法
(1)計數:選擇合適部位,用油鏡計數1000個紅細胞中嗜鹼性點彩紅細胞數。
(2)計算:嗜鹼性點彩紅細胞分數=計數的嗜鹼性點彩紅細胞/1000。
2.參考值:<0.03%。
3.臨床意義
增高常見於:①中毒(鉛、汞等);②各類貧血,如溶血性貧血、巨幼細胞性貧血、惡性貧血等。
第十節紅細胞沉降率測定
紅細胞沉降率(ESR)(掌握)
1.原理:ESR是離體抗凝全血靜置後,紅細胞在單位時間內沉降的速度,分3期:①緡錢狀紅細胞形成期;②快速沉降期;③細胞堆積期。
2.魏氏法:魏氏法為ICSH推薦方法。
3.參考值:魏氏法(正常成年人):男性0~15mm/h;女性0~20mm/h。
4.影響因素:小分子蛋白質如清蛋白、卵磷脂等使血沉減慢;大分子蛋白質如纖維蛋白原、急性反應蛋白、免疫球蛋白、巨球蛋白、膽固醇和甘油三酯等使血沉加快。
5.操作方法
(1)加抗凝劑:取109mmol/L枸櫞酸鈉0.4ml於試管中。
(2)採靜脈血:取靜脈血1.6ml,加入含抗凝劑的試管中,混勻。
(3)裝血沉管:用血沉管吸入混勻全血至刻度「0」處,拭去管外殘留餘血。
(4)立血沉管:將血沉管直立於血沉架上。
(5)讀數:1h末準確讀取紅細胞下沉後暴露出的血漿段高度,即紅細胞沉降率。
第三單元白細胞檢查
白細胞(WBC)計數(掌握)
1.概述:粒細胞發育階段:分裂池(原粒、早幼粒、中幼粒細胞)、成熟池(晚幼、杆狀核粒細胞)、儲備池(杆狀核、分葉核粒細胞)、循環池(白細胞計數值)和邊緣池5個池。
2.原理:白細胞計數是測定單位體積血液中各種白細胞總數,包括顯微鏡計數法和血液分析儀計數法(多採用電阻抗法和光散射法原理)。
3.顯微鏡計數法:①白細胞稀釋液0.38ml加入20ul血液,充分混勻後衝入計數池室溫靜置2~3分鐘,在低倍鏡下計數四角4個大方格內白細胞的總數;②計算公式:WBC數/L=N(4個大方格WBC數)/4×10×20×106=N/20×109/L。
4.參考值:成年人(4~10)×109/L;新生兒(15~20)×109/L;6個月~2歲(11~12)×109/L;兒童(5~12)×109/L。
5.方法學評價:顯微鏡計數法是白細胞分類計數的參考方法;血液分析儀計數法是白細胞分類和篩選的首選方法。
6.質量控制
(1)血塗片上WBC分布密度與WBC數量關係為:(2~4)/HP≈(4~7)×109/L;(4~6)/HP≈(7~9)×109/L;(6~10)/HP≈(10~12)×109/L;(10~12)/HP≈(13~18)×109/L。
(2)大量有核紅細胞可使白細胞計數值假性增高,此時,白細胞計數應進行校正。公式為:校正後白細胞數(L)=校正前白細胞數×100/(100+y),(y為白細胞分類計數時,100個白細胞中有核紅細胞數量)。
7.臨床意義
(1)中性粒細胞:
①病理性增多:急性化膿性感染、廣泛組織壞死、急性溶血和惡性腫瘤等疾病。
②病理性減少:中性粒細胞絕對值<1.5×109/L稱為粒細胞減少。
③粒細胞缺乏症:中性粒細胞絕對值<0.5×109/L稱為粒細胞缺乏症。常見於某些感染(傷寒、副傷寒桿菌)、血液病如再生障礙性貧血、慢性理化損傷、自身免疫疾病如SLE、脾功能亢進等。
④核左移:外周血中性杆狀核粒細胞增多或(和)幼稚細胞>5%。再生性左移:表示機體反應性強、骨髓造血功能旺盛,見於急性化膿性感染、急性中毒、急性溶血和急性失血等;退行性左移:指核左移而WBC不增高甚至減低,見於再生障礙性貧血、粒細胞減低症、嚴重感染(如傷寒和敗血症等)。
⑤核右移:中性粒細胞核分葉5葉以上超過3%。見於營養性巨幼細胞性貧血、惡性貧血、應用抗代謝藥物(如阿糖胞苷、6-巰基嘌呤等)、炎症恢復期。
(2)淋巴細胞:①生理性增多見於兒童;②病理性增多見於急性傳染病(如結核病)、某些白血病、腎移植術後等。
(3)嗜酸性粒細胞:①減低見於長期使用腎上腺皮質激素、傷寒;②增多見於寄生蟲病、變態反應性疾病、皮膚病、血液病和某些惡性腫瘤。
第四單元血液分析儀及其臨床應用
血液分析儀檢測(掌握)
1.電阻抗法:
(1)血細胞計數:脈衝振幅越高,細胞體積越大;脈衝數量越多,細胞數量越多。
(2)白細胞分類計數:將體積為35~450fl的白細胞分成256個通道;淋巴細胞位於35~90fl的小細胞區;單核、嗜酸、嗜鹼、原始、幼稚細胞位於90~160fl的單個核細胞區,又稱中間型細胞;粒細胞位於160fl以上的大細胞區。
(3)正常紅細胞直方圖在36~360fl,血小板直方圖在2~30fl。
2.光散射法:
(1)白細胞計數:①雷射與細胞化學染色法;②容量、電導、光散射(VCS)法;③電阻抗與射頻法;④多角度偏振光散射法。
(2)紅細胞檢測原理:低角度(2°~3°)檢測單個紅細胞體積,高角度(5°~15°)檢測單個紅細胞血紅蛋白濃度。
(3)網織紅細胞計數:新亞甲藍使網織紅細胞RNA著色。
第五單元血型和輸血
第一節紅細胞ABO血型系統
ABO血型系統(掌握)
1.血型鑑定:①正定型:已知抗體(標準血清)+未知抗原(待測紅細胞);②反定型:已知抗原(標準紅細胞)+未知抗體(待測血清);③我國要求標準抗A、抗B的效價均為≥1:128;④ABO血型共4種表現型(A、B、O、AB),6種基因型(AA、AO、BB、BO、BA、OO);⑤血型物質不僅存在於血液成分中,人體體液、分泌物中也存在,但不存於腦脊液中。
2.交叉配血:
(1)主側:受血者血清+供血者紅細胞;次側:受血者紅細胞十供血者血清。
(2)方法:①鹽水法;②抗球蛋白法(Coombs法);③酶介質法;④聚凝胺法(能發現引起溶血性輸血反應幾乎所有的規則和不規則抗體);⑤凝膠法(凝膠微柱卡式)。
第二節紅細胞Rh血型系統
Rh血型系統(掌握)
1.概述:Rh遺傳基因位於第1號染色體的短臂上。Rh抗原中D抗原最強,Rh陰性基因型是cde/cde。
2.Rh血型系統鑑定:Rh抗體屬於IgG,不能在鹽水介質中與紅細胞發生凝集。可採用下列鑑定方法:①低離子強度鹽水實驗;②酶介質法;③聚凝胺法;④Coombs法;⑤人源鹽水介質抗D試驗。
3.新生兒溶血病:受血者或孕婦血漿中含有Rh抗體時,當再與含相應抗原血液相遇,將引起嚴重輸血反應或新生兒溶血病(常為第2胎溶血)。
第三節血液製品的保存
血液保存液(掌握)
1.ACD保存液:A,枸櫞酸;C,枸櫞酸鹽;D,葡萄糖。血液能保存21天。
2.CPD保存液:C,枸櫞酸鹽;P,磷酸鹽;D,葡萄糖。血液可保存28天。在CPD保存液基礎上再加腺嘌呤,即為CPDA-1,紅細胞保存期可達35天。
3.血液保存液主要成分:①枸櫞酸(防止葡萄糖焦化);②枸櫞酸鹽(抗凝,阻止溶血);③葡萄糖(提供營養);④磷酸鹽(提高保存液pH)。
4.血液製品貯存溫度和時間
表1-5-1血液製品貯存溫度和時間
第六單元尿液生成和標本採集及處理
第一節尿液生成
尿液生成機制(掌握)
1.腎小球濾過:原尿除了無血細胞及蛋白含量極少外,其他物質、酸鹼度、滲透壓幾乎與血漿相同。
2.腎小管和集合管重吸收:腎近曲小管是重吸收的主要場所;肌酐幾乎不被重吸收。
3.腎小管分泌:腎小管和集合管泌H +、NH4+的作用和Na+-H+交換作用。
第二節尿液標本採集及處理
考點一、尿標本採集(掌握)
1.患者準備:指導患者正確收集尿標本。如:清潔標本採集部位;明確標記等。
2.標本容器:容器材料不與尿液反應;容器大於50ml;乾燥、清潔、無汙染;帶蓋、無菌容器。
3.尿標本採集種類:
(1)晨尿:適合尿細胞或管型成分檢查(尿沉渣、β-hCG等)。
(2)隨機尿:用於急診檢查。
(3)計時尿:①3小時尿:收集6點~9點尿液,用於檢測尿有形成分,如1小時尿排洩率檢查;②餐後尿:收集餐後到14點的尿液,適合肝膽疾病、腎病、糖尿病、溶血性疾病檢查;③24小時尿:收集早上8點至次日早上8點全部尿液,適合肌酐、蛋白質、電解質等檢測;④無菌尿(中段尿、導管尿、恥骨上穿刺尿):細菌培養。
考點二、尿標本處理(掌握)
1.檢測時限:尿標本採集後應在2小時內及時送檢,最好在30分鐘內完成檢測。
2.保存:2~8℃冰箱保存,但最好不超過6小時。
3.常用防腐劑:
(1)甲醛:尿細胞、管型等有形成分檢測。
(2)甲苯:尿糖、尿蛋白等化學成分定性或定量檢測。
(3)麝香草酚:尿濃縮結核桿菌檢查及化學成分保存。
(4)濃鹽酸:17-羥、17-酮,腎上腺素、兒茶酚胺、Ca2+。
(5)冰乙酸:5-羥色胺,醛固酮等。
(6)戊二醛:尿沉澱物的固定和防腐。
第七單元尿理學檢驗
考點一、尿液理學檢查(掌握)
1.尿量:正常成年人為(1~2)L/24h。①多尿:尿量>2.5L/24h;②少尿:尿量<400ml/24h或尿量<17ml/h;③無尿:尿量<100ml/24h或<17ml/h。
2.尿比密與尿滲量:在4℃時,尿與同體積純水重量之比,比密又稱尿比重(SG)。一般情況下SG的參考值為1.015~1.025。折射計法是NCCLS推薦的參考方法。
3.臨床意義:糖尿病患者尿量增多,尿比密增高;尿崩症患者尿量增多,尿比密減低;急性腎小球腎炎患者尿量減少,尿比密增高。尿滲量在評價腎濃縮和稀釋功能上優於尿比密。
考點二、血尿與膿尿(掌握)
1.鏡下血尿:尿沉渣鏡檢紅細胞>3個/HP(高倍視野)。
2.肉眼血尿:每升尿含血量≥1ml。
3.肉眼膿尿:尿呈乳白色,含有大量WBC甚至出現凝塊。
4.鏡下膿尿:尿沉渣鏡檢WBC>5個/HP。
考點三、尿氣味(掌握)
表1-7-1常見尿液特殊氣味及相關疾病
第八單元尿有形成分檢查
第一節尿有形成分檢測方法
表1-8-1尿有形成分檢查的要求及pH和滲透壓的影響(了解)
第二節尿細胞檢查
尿細胞檢查(掌握)
1.紅細胞(RBC)
(1)正常RBC為雙凹圓盤狀,淡黃色,直徑大約為8μm;
(2)根據尿中RBC形態可將血尿分類均一性、非均一性、混合性紅細胞血尿;
(3)鑑別:①腎性血尿,異形RBC≥80%;②非腎性血尿,異形紅細胞≤50%的,大部分為正常RBC。
2.白細胞(WBC)
(1)形態:①正常白細胞:加入1%乙酸處理,可清晰看見細胞核;②閃光細胞:急性腎盂腎炎可見中性粒細胞內顆粒呈布朗運動,由於光的折射出現似發光現象,稱為閃光細胞;③膿細胞:壞死的中性粒細胞。
(2)臨床意義:①腎盂腎炎,尿培養陽性,多數有白細胞管型;②膀胱炎,尿白細胞增多,常伴膿尿,但無管型;③腎移植排斥反應,尿中有大量淋巴細胞及單核細胞;④某些間質性腎炎、藥源性變態反應可見嗜酸性粒細胞尿。
3.上皮細胞
(1)腎小管上皮細胞:來自腎小管立方上皮,多為圓形或多邊形,尿中增多提示腎小管病變。有時細胞內可見數量不等的含鐵血黃素顆粒或脂肪小滴,稱復粒細胞。
(2)移行上皮細胞:大圓上皮細胞增多見於膀胱炎;尾形上皮細胞增多見於腎孟腎炎。
(3)鱗狀上皮細胞:來自輸尿管下段、膀胱和尿道,是尿液中體積最大的細胞;女性患者多見於尿道炎。
第三節尿管型檢查
表1-8-2尿液管型(掌握)
第四節尿結晶檢查
表1-8-3常見生理性和病理性結晶(掌握)
第五節尿沉渣定量檢查
表1-8-4尿有形成分參考值(掌握)
第九單元尿液化學檢查
考點一、尿液酸鹼度測定 (掌握)
常用檢測方法:
(1)試帶法:最廣泛的篩檢方法。
(2)指示劑法:常用指示劑為0.4g/L溴麝香草酚藍溶液,該法檢測結果不準確。
(3)滴定法:操作複雜。
考點二、尿液蛋白質檢查 (掌握)
1.定義:尿蛋白含量超過0.15g/24h或超過0.1g/L時,蛋白定性試驗呈陽性。
2.參考值:定性試驗:陰性;定量試驗:<0.15g/24h或<0.1 g/L。
3.常用方法:
(1)定性試驗:①試帶法:對清蛋白敏感,對球蛋白不敏感。本法快速、簡便、易於標準化,適合於健康普查和臨床篩檢;②加熱乙醇法:傳統經典方法,能同時檢出清蛋白和球蛋白,但敏感度較低;③磺基水楊酸法:與清蛋白、球蛋白、糖蛋白和本周蛋白等均能發生反應,被NCCLS作為幹化學法檢查尿蛋白的參考方法和確證試驗。
(2)定量試驗:沉澱法、比色法、染料結合法、免疫測定法和尿蛋白電泳法。
考點三、尿液糖檢查(掌握)
1.定義:當血糖濃度超過腎糖閾(>8.88mmol/L)或腎小管重吸收能力下降時,尿糖定性試驗呈陽性,稱為糖尿。
2.方法評價:①班氏法:易受其他還原物質如維生素C幹擾,導致假陽性;②試帶法:特異性強、靈敏度高、簡便快速,適用於自動化分析,維生素C會導致假陰性。
3.參考值:定性試驗,陰性。
考點四、尿液酮體檢查(掌握)
1.定義:酮體是乙醯乙酸(佔20%)、β-羥丁酸(佔78%)及丙酮(佔2%)的總稱。
2.檢測方法:①試帶法:原理為亞硝基鐵氰化鈉法,是臨床上最常用的篩檢方法;②溼化學法:Rothera法、Gerhardt法;③片劑法。上述方法均不與β-羥丁酸起反應。
考點五、尿液膽紅素檢查(掌握)
檢測方法:重氮法,定性篩檢試驗,當高濃度維生素C和亞硝酸鹽存在,可導致假陰性。
考點六、尿血紅蛋白檢查(掌握)
檢測方法:
(1)化學法:常用鄰聯甲苯胺、匹拉米酮法,但試劑穩定性差,特異性低。
(2)試帶法:過氧化物酶可導致假陽性,維生素C可導致假陰性。
(3)膠體金單克隆抗體法:靈敏度高、特異度高、操作簡單。
考點七、其他尿蛋白檢查(掌握)
1.尿本周蛋白:本周蛋白加熱至40~60℃發生凝固,升溫至90~100℃時可溶解,而當溫度降低至56℃左右時,又重新凝固,故又稱凝溶蛋白。
2.尿蛋白電泳:常用十二烷基硫酸鈉-聚丙烯醯胺凝膠電泳法(SDS-PAGE)。
3.尿肌紅蛋白:隱血試驗(OBT)法、80%飽和硫酸銨法、單克隆抗體免疫法(確診試驗)。
4.微量白蛋白:尿微量清蛋白多採用放射免疫法和免疫比濁法,主要用於早期腎損傷的診斷。
考點八、尿hCG和乳糜尿(了解)
1.尿hCG:檢查應採集首次晨尿(中段尿)100ml;尿中FSH、LH、TSH等可與hCG產生交叉反應,出現假陽性。參考值:定性為陰性。
2.乳糜尿:有機溶劑抽取法(用乙醚)可確診為乳糜尿,蘇丹Ⅲ染色可見橘紅色脂肪球。
第十單元尿液分析儀及其臨床應用
表1-10-1尿幹化學檢測(掌握)
表1-10-2尿幹化學分析儀和顯微鏡檢查比較(掌握)
第十一單元糞便檢驗
考點一、糞便檢查質量控制(掌握)
1.採集容器:①常規:清潔、乾淨、無吸水滲漏有蓋容器;②細菌學檢測:無菌,有蓋容器。
2.標本採集:①選取含黏液、膿血等病變成分糞便,量3~5g;②寄生蟲和蟲卵檢查應收集24小時糞便;③阿米巴標本要注意保溫;④標本採集後應1小時內檢驗完畢。
3.隱血試驗:①化學法檢測前3天內禁止食用動物血或肉及藥物(如VitC);②要嚴格控制操作時間,避免結果誤判;③為了避免免疫法後帶效應,應稀釋後檢驗。
考點二、隱血試驗化學法與免疫法比較(掌握)
表1-11-1隱血試驗化學法與免疫法比較
考點三、糞便改變與相關疾病(掌握)
表1-11-2糞便改變與相關疾病
考點四、糞便顯微鏡檢查(掌握)
1.方法:生理鹽水塗片法(最常用)。
2.步驟:①低倍鏡查蟲卵、原蟲、包囊等;②高倍鏡詳查病理成分的形態結構;③染色技術:碘染鑑別阿米巴滋養體和澱粉顆粒;伊紅鑑別阿米巴滋養體;亞甲藍便於白細胞形態學檢查;蘇丹Ⅲ便於脂肪檢查;④原則上要觀察10個以上的高倍鏡視野再報告。
3.細胞:①白細胞:正常糞便中偶見,腸炎症時增多,腸道寄生蟲感染(如鉤蟲和阿米巴痢疾)和過敏性腸炎時嗜酸粒細胞增多;②紅細胞:正常糞便中無,常見於下消化道疾病;③大吞噬細胞:正常糞便中無,可作為急性菌痢的依據;④上皮細胞:正常糞便中很難找到,常見於結腸炎症。
4.夏科-雷登結晶:常見於阿米巴痢疾、過敏性腸炎。
5.細菌:細菌約佔糞便乾重的1/3,糞便中球菌和桿菌比例約為1:10。
第十二單元腦脊液檢驗
腦脊液(CSF)檢驗(掌握)
1.概述:由腦室脈絡叢產生,正常成年人總量為120~180ml(平均150m1)。
2.採集禁忌證:顱內壓增高者,休克、衰竭狀態者,穿刺部位有化膿性感染者,顱後窩有佔位性病變者,腦疝先兆者。
3.標本採集:腦脊液採集標本採3管,每管1~2ml。第一管細菌學檢查;第二管生化和免疫學檢查;第三管細胞計數。
4.顏色:①無色:正常;②紅色:見於穿刺損傷(新鮮出血)或蛛網膜下腔出血;③黃色:陳舊性蛛網膜下隙出血、重症黃疸;④乳白色:化膿性腦膜炎;⑤褐色或黑色:黑色素瘤;⑥綠色:銅綠假單胞菌感染。
5.透明度:①清晰透明:正常;②毛玻璃樣微渾,靜置後表層有薄膜:結核性腦膜炎;③膿樣渾濁或凝塊:化膿性腦膜炎。
6.凝固性:①當CSF中蛋白含量>10g/L時會出現凝塊或沉澱,化膿性腦膜炎CSF在1~2小時內呈凝塊;②蛛網膜下隙梗阻:膠樣凝固,黃變症,蛋白質-細胞分離。
7.生化指標:腦脊液生化檢查:化膿性腦膜炎患者葡萄糖降低最明顯;結核性腦膜炎氯化物降低最明顯;病毒性腦膜炎葡萄糖和氯化物正常。
8.病原學檢查:鹼性亞甲藍染色檢測腦膜炎球菌;抗酸染色用於檢測結核桿菌;印度墨汁染色用於新型隱球菌檢查;革蘭染色用於其他致病菌檢查。
9.細胞參考值:成年人CSF無紅細胞,WBC(0~8)×106/L,主要為單個核細胞,單核/淋巴=7:3。
10.細胞鑑別:①新型隱球菌:不溶於乙酸,經墨汁染色後可見莢膜;②白細胞:不溶於乙酸,加酸後胞質和胞核更加清晰;③紅細胞:加乙酸後溶解。
第十三單元漿膜腔積液檢驗
考點一、漿膜腔積液採集要求與保存(掌握)
表1-13-1漿膜腔積液採集要求與保存
考點二、漿膜腔積液常見顏色與臨床意義(掌握)
表1-13-2漿膜腔積液常見顏色與臨床意義
考點三、漏出液與滲出液鑑別(掌握)
表1-13-3漏出液與滲出液鑑別
考點四、關節腔積液檢查(掌握)
1.理學檢查:正常關節腔內液體量很少,為0.1~2.0ml,呈淡黃色、草黃色或無色黏稠、清晰透明、無凝塊的液體。
2.結晶及其常見疾病:①尿酸結晶:痛風;②焦磷酸鈣結晶:軟骨症;③膽固醇結晶:結核性關節炎、類風溼關節炎;④類固醇結晶:急性滑膜炎。
第十四單元精液檢查
表1-14-1精液檢查(掌握)
第十五單元前列腺液檢查
表1-15-1前列腺液檢查(掌握)
第十六單元陰道分泌物檢查
表1-16-1陰道分泌物檢查(掌握)
第十七單元羊水檢查
羊水檢查(掌握)
1.標本採集:①遺傳性疾病或性別基因診斷:妊娠16~20周,採集20~30ml羊水;②胎兒成熟度檢查:妊娠晚期,採集10~20ml羊水。
2.量:正常妊娠16周約為250ml;妊娠晚期約1000ml;妊娠晚期<300ml為羊水過少,羊水量>2000ml為羊水過多。
3.異常羊水:①黃綠色或綠色:提示胎兒窘迫;②深黃色:胎兒溶血病、胎兒出血等;③膿性渾濁:宮內化膿性感染;④棕紅色或褐色:宮內陳舊性出血。
4.成熟度檢查:
(1)肺:卵磷脂和鞘磷脂是肺泡表面活性的主要物質,其成熟度檢查有:羊水泡沫試驗、羊水吸光度測定(A≥0.075)、卵磷脂與鞘磷脂比值(正常L/S≥2.0)。
(2)腎:羊水肌酐測定、葡萄糖測定(其<0.50mmol/L提示胎兒腎發育成熟)。
(3)肝:膽紅素測定,正常胎兒羊水應<1.71μmol/L。
(4)皮脂腺:脂肪細胞測定,升高代表皮脂腺成熟。
(5)唾液腺:澱粉酶測定。
5.臨床應用:①神經管缺陷:甲胎蛋白測定、羊水膽鹼酯酶測定;②胰腺纖維囊性變檢查;③黏多糖沉積病:甲苯胺藍定性試驗,糖醛酸半定量試驗。
第十八單元脫落細胞檢查
脫落細胞檢查(了解)
1.脫落細胞:正常脫落上皮細胞包括鱗狀上皮、柱狀上皮和子宮內膜細胞。
2.表層細胞:表層細胞根據細胞成熟度分為角化前細胞(核胞質比為1:3~5)、不完全形化細胞(核胞質比約為1:5)和完全形化細胞。
3.核異質:主要表現為核增大、形態異常、染色質增多、分布不均、核膜增厚、核染色較深,胞質尚正常。核異質細胞是介於良性和惡性之間的過渡型細胞,根據核異質細胞形態改變程度,可分為輕度核異質和重度核異質。
4.惡性腫瘤細胞的主要形態特徵
(1)細胞核的改變:核增大、核畸形、核深染、核胞質比失調。
(2)細胞質的改變:胞質量異常、染色加深、細胞形態畸形、有空泡變異、吞噬異物現象。
(3)癌細胞團:塗片中除可見單個散在癌細胞,還可見成團脫落的癌細胞。癌細胞團中,細胞大小、形態不等,失去極性,排列紊亂,癌細胞繁殖快,互相擠壓,呈堆疊狀或鑲嵌狀。
5.癌細胞:①分類:腺癌、鱗狀細胞癌和小細胞未分化癌;②高分化腺癌細胞呈印戒樣,低分化腺癌呈桑葚樣;③肺癌:是導致胸腔積液最常見的惡性腫瘤,以周圍型腺癌為多見;肺部原發性肺癌以鱗狀細胞癌最常見。
6.染色方法:巴氏染色(細胞病理學檢查最常用)、HE染色及瑞-吉氏染色。
摘自:369學習網