AbMole重磅推薦：人源化單抗動物實驗黃金指南(下)

全人源化抗體是指將人類抗體基因通過轉基因或轉染色體技術，將人類編碼抗體的基因全部轉移至基因工程改造的抗體基因缺失動物中，使動物表達人類抗體，達到抗體全人源化的目的。人源化抗體主要指鼠源單克隆抗體以基因克隆及DNA重組技術改造，重新表達的抗體，其大部分胺基酸序列為人源序列取代，基本保留親本鼠單克隆抗體的親和力和特異性，又降低了其異源性。

單抗命名規則：

最末尾三個字母是mab，表示該產品為單克隆抗體；再往前2個字母，如果是xi，則該產品為嵌合型單抗；如果是zu，則該產品為人源化單抗；如果只有一個u，則表示該產品為全人源化單抗。

了解完單抗的一些小知識後，歡迎大家來繼續和AbMole一起深入了解其他幾個熱門單抗在動物實驗中的運用。

Cetuximab（M6103）

Cetuximab（西妥昔單抗）屬於嵌合型IgG1單克隆抗體，分子靶點為表皮生長因子受體（EGFR）。

首先，分離收集人CD34+造血幹細胞，然後使用伽馬射線輻射新生NSG幼鼠。將人CD34+ CD133+造血幹細胞通過心內注射注入經過輻射的小鼠體內。構建人源化小鼠成功後，通過超聲引導將攜帶螢光素酶的MDA-MB-231乳腺癌細胞移植到正常成年NSG小鼠和人源化小鼠的心腔內，構建小鼠腫瘤模型。對健康或荷瘤小鼠進行腹膜內單一或聯合注射Cyclophosphamide（100 mg / kg）和/或Cetuximab（10 mg / kg），之後數日收穫組織。

結果表明，Cetuximab與Cyclophosphamide聯用能很好地抑制乳腺癌細胞生長。

參考文獻：Cyclophosphamide Enhances Cancer Antibody Immunotherapy in the Resistant Bone Marrow Niche by Modulating Macrophage FcgR Expression

Pembrolizumab（M6102）

Pembrolizumab （派姆單抗）是一種有效的、高選擇性的、人源IgG4-kappa單克隆抗體，同時也是抑制劑，靶向PD-1，具有潛在的免疫檢查點抑制活性和抗腫瘤活性。

將臍帶血CD34 +細胞移植入BRGS（BALB/c Rag2 -/- IL-2Rγc -/- NOD.sirpa ）小鼠，19周後，將從裸鼠獲得的CU-ACC2-M2B PDX組織植入人源化hu-CB-BRGS小鼠，以產生CU ACC2-hu-CB-BRGS小鼠。當腫瘤達到一定體積後，以30 mg/kg的劑量每周兩次將Pembrolizumab注入小鼠腹膜。

結果表明，Pembrolizumab較好地抑制CU-ACC2-hu-CB-BRGS小鼠的腫瘤生長。

參考文獻：Development of an Adrenocortical Cancer Humanized Mouse Model to Characterize Anti-PD1 Effects on Tumor Microenvironment

Ramucirumab（M1629）

Ramucirumab（雷莫蘆單抗）是一種VEGFR2拮抗劑，與VEGFR2的胞外段有很高的親和力，能阻斷VEGFR2與其天然配體（VEGF-A, VEGF-C and VEGF-D）的結合（對鼠類VEGFR-2缺乏活性）。

將人脂肪來源的幹細胞（ADSCs）和內皮集落形成細胞（ECFCs）按1：4的比例混合於Matrigel中後，皮下注射到雌性無胸腺Nude小鼠的腹側。移植後三天內開始血管生成，第四天出現血液灌注。

分別在第0天或第4天使用IgG或Ramucirumab（10 mg / kg）進行腹膜內注射治療。在處理後4天收集固定植入物，並使用對免疫細胞化學染色的切片進行分析（用CD31標記內皮細胞，TER-119抗體標記紅細胞）。

結果表明，在血管形成過程中，越早使用Ramucirumab，就越能更大程度上地抑制血管生成。

參考文獻：Development and characterization of a high-throughput in vitro cord formation model insensitive to VEGF inhibition

Tocilizumab（M6223）

Tocilizumab（託珠單抗）是人源化單抗，可與interleukin-6 receptor結合發揮抑制作用。

利用JIO小鼠模型，在異氟烷麻醉下，通過手術誘導6周齡C57BL / 6雄性小鼠股骨遠端骨缺血性骨壞死。在手術後第3天，每隻小鼠腹腔內注射100μl生理鹽水或100μl Tocilizumab溶液至骨壞死或假手術組。小鼠至多接受六次，每周8 mg / kg 的Tocilizumab注射直至終點。

結果表明，在低氧條件下，進行Tocilizumab治療可影響骨形成、吸收及相關分子的表達。

參考文獻：IL6 receptor blockade preserves articular cartilage and increases bone volume following ischemic osteonecrosis in immature mice

Daratumumab（M1616）

Daratumumab（達雷木單抗）是一種直接靶向CD38的IgG1k單克隆抗體（適用於人源或免疫缺陷型小鼠）。

將混懸於生理鹽水中的CA46-luc細胞經靜脈注射到SCID小鼠體內以構建腫瘤模型。將小鼠隨機分組，並每周一次腹膜內注射200μL含50μg（〜2 mg / kg）CD38特異性hcAbs WF211-hcAb，MU1067-hcAb，JK36-hcAb，同型對照l-15-hcAb或Daratumumab的生理鹽水進行治療。

結果表明，實驗研究的各CD38特異性抗體及Daratumumab均可很好地抑制CA46-luc腫瘤的增長。

參考文獻：Nanobody-based CD38-specific heavy chain antibodies induce killing of multiple myeloma and other hematological malignancies

通過兩期的單抗專題介紹，希望大家對各種人源化單抗在動物實驗中的運用有了更為深入的認識，更多的人源化單抗敬請在AbMole官網查詢。我們將以最為專業的態度為您提供優質的產品服務。