高效免疫組化二抗試劑盒

2020-12-04 ChemicalBook

來源：ChemicalBook

背景及概述[1][2]

背景[1-7]

高效免疫組化二抗試劑盒基於聚合物技術的最新一代免疫組化二抗非生物素檢測系統，與傳統的免疫組化二抗試劑盒相比，具有以下特點：

1.信號更強、操作更加簡單，可有效減少一抗使用量，一抗試劑可再稀釋2-4倍，節省實驗成本；

2.避免生物素的使用，從而避免由生物素引起的非特異性背景顯色，顯色更清晰，背景更乾淨；

3.快速更短的試劑孵育時間，節省時間成本；

免疫組化（IHC）是利用抗原與抗體的特異性結合原理和特殊的標記技術，通過化學反應使標記抗體顯色，對組織細胞內的特異性抗原進行定位、定性、定量檢測的一門技術。本文主要總結二抗原理及其特點，以提供更好的選擇。

檢測方法原理：

1.SABC法

原理：SABC法是利用鏈酶親和素(Streptavidin)與生物素(Biotin)特有的高度親和力這一生物學性質，先將生物素與辣根過氧化物酶(HRP)結合，形成生物素化HRP，然後與鏈酶親和素按一定比例混合，形成SABC複合物。用生物素化二抗與第一抗體結合，再與SABC複合物聯結形成抗原～抗體～生物素化二抗～SABC複合物。最後用底物顯色劑顯色。

特點：該法具有靈敏度高以及低背景染色等特點。

2.SP法

原理：根據生物素(Biotin)與鏈黴親和素(Streptavidin)具有強結合力的原理設計。在一抗（兔源與鼠源）與相應的靶抗原結合後，生物素化標記的抗多價二抗與一抗特異結合；二抗上標記的生物素與標記了辣根過氧化物酶（HRP）的鏈黴親和素結合，形成抗原～特異性一抗～生物素化的二抗～HRP標記的鏈黴親和素複合物。

特點：該法孵育時間短（通常為10min），靈敏度高以及低背景染色等特點。

3.Polymer酶標二抗法

原理：該法採用一段多聚胺基酸聚合物做為載體鏈，將該多聚物與二抗結合，然後可再標記上多個HRP/AP酶分子，所以同樣具有很高的信號放大作用。

特點：靈敏度高；操作步驟簡單；無需進行內源性的生物素封閉。

4.直接酶標二抗法

該法是將HRP/AP酶分子直接標記於二抗上。因此需要普通的酶標二抗即可完成。實驗簡單，成本低，但是因為沒有信號放大作用，所以對很多表達豐度不是很高的抗原就可能檢測不到。

應用[8]

高效免疫組化二抗試劑盒可用於檢測疾病的標記物檢測以及疾病診斷：

例如在診斷麴黴菌性鼻竇炎的實驗中用免疫組化方法在診斷麴黴菌性鼻竇炎。方法:採用Envision免疫組織化學二步法對懷疑麴黴菌性鼻竇炎的標本和對照標本染色,並與真菌學檢查和HE、PAS染色進行對比。結果:40例中真菌培養19例為麴黴,4例汙染菌,常規HE和PAS染色均可見菌絲或孢子,但不能確定種屬,免疫組化染色耗時5~24h,示40例陽性,染色背景清晰,對比度強。4例對照標本免疫組化染色陰性。結論:此方法可敏感、特異地檢出組織中的麴黴菌,為利用免疫組化方法診斷麴黴菌性鼻竇炎提供了實驗依據,有助於臨床診斷和研究。

參考文獻

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[2]Diagnosis of systemic mycoses by specific immunohistochemical tests.Jensen HE,Schonheyder HC,Hotchi M,et al.Acta Pathologica Microbiologica et Immunologica Scandinavica.1996

[3]Production of specific monoclonal antibodies to Aspergillus species andtheir use inimmu-nohistochemical identification of aspergillus.Fenelon LE,Hamilton AJ,Figueroa JI,et al.Journal of Clinical Microbiology.1999

[4]Up-Regulation of the Lymphatic Marker Podoplanin,a Mucin-Type Transmembrane Glycoprotein,in Human Squamous Cell Carcinomas and Germ Cell Tumors[J].Vivien Schacht,Soheil S.Dadras,Louise A.Johnson,David G.Jackson,Young-Kwon Hong,Michael Detmar.The American Journal of Pathology.2005(3)

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[7]Sebaceoma and related neoplasms with sebaceous differentiation:a clinicopathologic study of 30 cases.Misago Noriyuki,Mihara Ichiro,Ansai Shin-ichi,Narisawa Yutaka.The American Journal of dermatopathology.2002

[8]周曉謙,楊秀敏,王毓新,莊逢康.應用Envision免疫組化二步法診斷麴黴菌性鼻竇炎[J].中國麻風皮膚病雜誌,2006(09):720-722.

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