手把手教你學ELISA、PCR、免疫組化

2020-11-30 中科啟帆BioSCI

1.手把手教你學ELISA

ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體 表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。可用於測定抗原 ，也可用於測定抗體。在這種測定方法中有三個必要的試劑：(1)固相的抗菌素原或抗體，即"免疫吸附劑"(immunosorbent);(2)酶標記的抗原或抗體，稱為"結合物"(conjugate);(3)酶反應的底物。根據試劑的來源和標本的情況以及檢測的具體條件，可設計出各種不同類型的檢測方法。

2.手把手教你學PCR

實時螢光定量PCR，簡稱RT-QPCR,屬於Q-PCR的一種，目前該技術已得到廣泛應用，如：擴增特異性分析、基因定量分析、基因分型、SNP分析等。螢光定量PCR最常用的方法是DNA結合染料SYBR GreenI的非特異性方法和Taqman水解探針的特異性方法。視頻使LightCycler 480SYBR Green IMaster試劑盒介紹SYBR Green I的非特異性方法。

3. 手把手教你學免疫組化

抗體和抗原之間的結合具有高度的特異性，先將組織或細胞中的某種化學物質提取出來，以此作為抗原或半抗原，通過免疫動物後獲得特異性的抗體，再以此抗體去探測組織或細胞中的同類的抗原物質。免疫組化(IHC)利用抗體和抗原特異結合原理,通過樣品製備、抗原修復等五個免疫組化步驟,生成文獻級圖像。定位直接準確、定性靈敏度高,適用於腫瘤診斷等醫學領域。

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