優質的新生牛血清可以培養幹細胞

2020-11-23 騰訊網

新生牛血清被廣泛應用於疫苗產品等大量生產生物製品領域,而培養幹細胞大部分實驗室仍採用品質更高的胎牛血清,其實在培養腸道幹細胞已經有實驗室採用新生牛血清嘗試培養,下面我們來看看相關實驗結果。

腸道幹細胞位於腸隱窩內,在維持腸道屏障結構和功能完整方面扮演著重要角色。用體外培養技術對腸幹細胞進行原代培養,以進一步了解其增殖分化機制,這對治療腸道相關疾病具有重要意義。而血清品質和濃度對原代細胞貼壁和生長則具有相當大的影響。有人曾嘗試採用DMEM加新生牛血清或胎牛血清進行腸道幹細胞的原代培養。嘗試的血清濃度分別為 5%、10%、15%及 20%,並且還加入表皮生長因子20ng/ml、胰島素2 g/ml、穀氨醯胺 2 mmol/ml、青黴素及鏈黴素各 100 U/ml。腸幹細胞的鑑定則採用用角蛋白18抗體(腸幹細胞為陽性)以及波形蛋白抗體(腸幹細胞為陰性,間質細胞為陽性)進行組化染色和鑑定。

作者對胚胎鼠腸組織進行的腸幹細胞的分離和培養。結果顯示,只有採用10%新生牛血清加DMEM的培養方式效果最好,在培養24~48h後,貼壁生長的細胞絕大部分為上皮細胞,上皮樣細胞呈集落狀生長,這與國外報導的細胞形

態基本符合,其雜質細胞卻很少見到。而其他血清加DMEM的培養則鏡下顯示,細胞含有大量呈梭狀的間質細胞,上皮細胞所佔比例不足 5%。由上可見,採

用含10%新生牛血清的細胞培養基進行腸幹細胞群的構建可以獲得較為純化的腸幹細胞群,角蛋白18染色陽性,波形蛋白染色陰性。因此,選擇合適的血清質量和濃度對幹細胞的培養有著十分重要的意義。

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    胎牛血清是實驗室裡細胞培養中用量很大的天然培養基,因為胎牛從未接觸過外界,這使得其血清中所含的抗體和補體極少,幾乎沒有對細胞有害的成分。另外,胎牛血清的免疫球蛋白含量要遠遠低於新生牛血清,胎牛的血清相對來說比較純,所以培養細胞的效果會更佳。 3用途與用法不同 由於胎牛血清與新生牛血清存在細微差異,因此它們的用途與用法也不盡相同。
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    牛血清是細胞培養中用量最大的天然培養基,含有豐富的細胞生長必須的營養成份,常用於動物細胞的體外培養,具有極為重要的功能。 1.提供對維持細胞指數生長的激素,基礎培養基中沒有或量很少的營養物,以及主要的低分子營養物。
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    在生物醫學和生物製藥領域,儘管人類做了很多努力在避免使用動物源的產品,但血清和其他動物源產品仍然在培養基方面扮演著重要角色。動物血是肉類工業的一種副產品,並且是來源於適合人類消費的動物。其中,牛源產品是最常見的。
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