優質血清對細胞培養的意義

2020-11-27 騰訊網

培養珍貴的幹細胞必須要用優質的血清,幹細胞相對而言較為脆弱操作不當或培養過程中任何一個環節都有可能造成細胞凋零,為了更好的完成實驗在培養源頭就要把控確保細胞可以生長。

提供細胞生長所需的天然激素或天然的生長因子。

提供天然的結合蛋白,能識別胺基酸、脂質、金屬離子和激素等,能結合併調節它們的活性。已知清蛋白(albumin)即具有上述功能,並對細胞代謝、生物合成、增殖和存活具有潛在的影響。又如胎牛血清中富含胎球蛋白(Fetuin),具有多個鈣離子結合位點,因而能調節和維持血清中的鈣離子濃度。

天然含有粘附蛋白等細胞外基質成分,促進細胞的附著、鋪展。

提供解毒功能。這主要通過血清中的某些蛋白與有毒的金屬離子結合來完成的。如金屬硫蛋白,對多種重金屬有高度親和性,並可清除細胞生長環境中的氧自由基(·O),具有很強的抗氧化活性,可防止細胞衰老。

提供酸鹼度緩衝的作用,以及維持滲透壓。

提供蛋白酶抑制劑,使細胞免受蛋白酶的損傷。因此在細胞消化時,常用含血清的培養液終止胰酶對細胞的作用。

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    什麼是透析胎牛血清?為什麼要用透析胎牛血清?下面我們一起來探討下,在一些細胞培養體系中,有時需要對培養基中的小分子有更高的要求,例如要求不存在膽固醇,不存在某個胺基酸等等。這時需要用到透析胎牛血清,將天然培養基即胎牛血清中的小分子去除,確保整個培養體系中不存在這類小分子的幹擾。在特級胎牛血清基礎上,透析過濾去除10000D以下小分子(如次黃嘌呤和胸腺核苷),因而能避免外源小分子對細胞產生幹擾。適合脈衝示蹤實驗(例如同位素標記特定小分子,並加入到培養體系中,以研究細胞代謝),也適合轉染CHO後的篩選等應用。
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