輻照後的血清對細胞培養的影響

2020-08-27 締一生物胎牛

血清為細胞正常生長提供必要的營養成分，而血清也是很容易受到外界因素影響的，所以有些會對血清採取鈷60γ射線照射也就是我們所謂的輻照血清。那麼血清被輻照後會對本身產品品質影響嗎？

早在2004年之前，西北民族大學生命科學與工程學院的研究人員就用已知大腸桿菌噬菌體為陽性的同批新生牛血清進行過測試。他們選擇了一系列不同的輻照劑量，具體為4、8、12、18、24、28、32、40、44、48kGy(所用劑量率為4.37Gy/min），檢測了新生牛血清輻照前後的總蛋白含量，發現其總蛋白含量沒有顯著變化。他們又檢查了輻照前後的大腸桿菌噬菌體。發現在輻射劑量≥8kGy時，能完全殺滅大腸桿菌噬菌體。

他們還檢測了輻照後血清的促細胞生長效應。他們把血清按10%比例添加到MEM中。在96孔板中，細胞培養接種濃度為1X104個/ml，每孔加0.2ml。結果發現，輻照劑量＜16kGy時，輻照後的新生牛血清和輻照前比，Vero細胞的最大增殖濃度無顯著性差異（P＞0.05）。在輻照劑量＜24kGy時，Vero細胞的倍增時間也無顯著性差異（P＞0.05）。但輻照劑量＞24kGy時，Vero細胞的倍增時間則明顯延長1。

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    什麼是透析胎牛血清？為什麼要用透析胎牛血清？下面我們一起來探討下，在一些細胞培養體系中，有時需要對培養基中的小分子有更高的要求，例如要求不存在膽固醇，不存在某個胺基酸等等。這時需要用到透析胎牛血清，將天然培養基即胎牛血清中的小分子去除，確保整個培養體系中不存在這類小分子的幹擾。在特級胎牛血清基礎上，透析過濾去除10000D以下小分子（如次黃嘌呤和胸腺核苷），因而能避免外源小分子對細胞產生幹擾。適合脈衝示蹤實驗（例如同位素標記特定小分子，並加入到培養體系中，以研究細胞代謝），也適合轉染CHO後的篩選等應用。
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