細胞培養用到的血清注意事項

2020-11-23 騰訊網

胎牛血清參與細胞培養實驗為細胞生長提供必要的營養成分，如此重要的胎牛血清當然價格也不會很低，怎麼才能讓它發揮最大作用呢？在使用的過程中都需要注意哪些呢？

1、注意避免沉澱加入培養液

添加胎牛血清的時候要注意避免把沉澱加入培養液，因為如果培養液有沉澱的存在，會使得其中培養的細胞產生大量的黑點，除此之外，細胞的表面還很可能會覆蓋一層油狀物質，總之出現這樣的情況會極其不利於細胞的正常生長。那麼為了最大程度減少血清的損失，可以把所有有沉澱的血清進行收集並做離心處理，之後便可將上清液加入培養液中使用。

2、注意解凍的方法

再高質量的胎牛血清也要在使用的時候堅持謹慎的原則，因此在解凍血清的時候，要細心地考慮到其解凍時體積一般會增大的特點，事先為血清預留出能夠容納膨脹體積的空間。如此一來，便不會發生汙染或者容器凍裂的情況。另外最好採用國際通用的解方式解凍血清。

3、注意血清的滅活方法

胎牛血清的滅活，一般是用水浴加熱的方式來加熱已經完全解凍的血清，那麼需要注意的是，加熱的過程中一定要規則地將血清搖晃均勻。而之所以這麼做，是為了能夠讓血清中的補體成分去活化。不過胎牛血清的滅活並不是強制的要求，客戶可以自行選擇是否進行滅火處理。

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    7.從培養箱內取出細胞：注意取出細胞時要旋緊瓶蓋，用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面，再在鏡下觀察細胞。   8.打開瓶口：將各瓶口一一打開，同時要在酒精燈上燒口消毒。顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若胞質回縮，細胞之間不再連接成片，表明此時細胞消化適度。    3.吸棄消化液加入培養液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養液。
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  • 細胞培養體系中，為什麼要用透析胎牛血清？
    什麼是透析胎牛血清？為什麼要用透析胎牛血清？下面我們一起來探討下，在一些細胞培養體系中，有時需要對培養基中的小分子有更高的要求，例如要求不存在膽固醇，不存在某個胺基酸等等。這時需要用到透析胎牛血清，將天然培養基即胎牛血清中的小分子去除，確保整個培養體系中不存在這類小分子的幹擾。在特級胎牛血清基礎上，透析過濾去除10000D以下小分子（如次黃嘌呤和胸腺核苷），因而能避免外源小分子對細胞產生幹擾。適合脈衝示蹤實驗（例如同位素標記特定小分子，並加入到培養體系中，以研究細胞代謝），也適合轉染CHO後的篩選等應用。
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  • 應選擇較低內毒素的血清中來培養細胞
    生物醫學研究廣泛使用體外培養細胞作為細胞實驗的模型。其中，細胞狀態與實驗進行息息相關。細胞狀態又與培養基密切相關。 胎牛血清和新生牛血清是常用的細胞培養基添加成分。 作為天然培養基，胎牛血清和新生牛血清在細胞培養中佔有重要的位置。