生物醫學研究廣泛使用體外培養細胞作為細胞實驗的模型。其中,細胞狀態與實驗進行息息相關。細胞狀態又與培養基密切相關。
胎牛血清和新生牛血清是常用的細胞培養基添加成分。基礎培養基只含胺基酸、維生素、葡萄糖、丙酮酸鈉、無機鹽等基礎成分,胎牛血清或新生牛血清能提供活性生長因子、激素、胺基酸以及其他更豐富的營養成分,如轉鐵蛋白、胎球蛋白以及其他糖蛋白等。
作為天然培養基,胎牛血清和新生牛血清在細胞培養中佔有重要的位置。但同時由於其採血過程的複雜性,需避免受到外源性汙染。
【內毒素】原本是革蘭氏陰性菌的細胞壁外壁層上的特有結構,主要化學成分是脂多糖中的類脂A成分。它對細胞有著多方面的影響。
內毒素在細胞傳代增殖過程中,會直接參與細胞凋亡的過程,一定劑量下,會給細胞培養帶來很多問題,特別是免疫細胞和幹細胞,例如:誘導免疫細胞釋放炎症因子,抑制小鼠紅細胞集落的形成等。又有人發現,在幹細胞體外培養實驗中,由於幹細胞的乾性,它對內毒素非常敏感,所以,當血清內毒素偏高時,細胞很容易死亡。
因此,血清中內毒素含量越低,對細胞毒性越小,越利於細胞的生長和傳代;反之,內毒素含量過高,會直接導致細胞狀態不良,提前老化,甚至死亡。
因此用於細胞培養的牛血清,要通過嚴格的內毒素水平檢測,通過內毒素的檢測數值,對血清的品質進行分級和評估。
通常國際上要求血清中內毒素含量≤10EU/ml,此時血清被定為特級。
市面上一款Ausbian品牌的進口系列牛血清,目前均來自澳洲,經過嚴格篩選,只挑選內毒素極低的特級血清進口到中國。
所有批次內毒素都低於3EU/ml,其中有的批次可以低至≤1EU/ml。更低的內毒素血清,更利於細胞的生長和傳代。
因此,血清需要在試用前提早參看該批次《檢測報告》,以決定是否入圍進行試用。