WB又沒有條帶,你考慮過這些嗎?

2021-02-14 抗體圈

知己知彼,百戰百勝。想要獲得目的蛋白,首先得了解它到底是如何表達的:成型表達?還是誘導型表達?時空表達譜有什麼特點?

案例分析 1

事件:2019年7月,客戶反饋Proteintech品牌SURVIVIN抗體(貨號:10508-1-AP)做WB實驗檢測小鼠肝臟沒有條帶。

結果:經多篇SCI文獻確認,同時Proteintech 質檢人員復檢確認,SURVIVIN蛋白在正常成年小鼠肝臟中基本不表達

案例分析 2

事件:2018年5月,客戶反饋Proteintech品牌IDO1抗體(貨號:13268-1-AP)做WB實驗檢測Hela細胞沒有條帶。

結果:經查閱文獻資料,同時Proteintech質檢人員復檢確認,HeLa細胞中IDO1蛋白需要在IFN-γ的刺激下,才會有較高水平表達

知識點: 實驗前,可通過調查相關文獻以及網站,查看靶標蛋白的時空表達情況,確保實驗方案正確。常用的蛋白資料庫有:

UniProt(https://www.uniprot.org/),一個十分強大的蛋白資料庫,可了解靶標蛋白基因信息、別稱、功能、可變剪切、定位及可修飾類型等;

HPA(http://www.proteinatlas.org/),The Human Protein Atlas,簡稱HPA資料庫,主要通過免疫組化技術確定人體組織和細胞中的蛋白表達水平和分布;    

BioGPS(http://biogps.org/),一個基因&蛋白信息資料庫,可通過基因的mRNA表達水平參考不同樣本中靶標蛋白的表達水平。

Expasy(https://www.expasy.org/)一個蛋白質在線分析平臺,可根據蛋白序列信息預測其分子量、等電點、親/疏水性等相關信息。

另外,Paxdb資料庫,NCBI綜合資料庫、UniHI蛋白互作資料庫等同樣也可在線分析靶標蛋白相關信息。

相關焦點

  • 同樣面板的超越 優派VA1912wb測試_優派 VA1912wb_液晶顯示器評測...
    不過相信讀者更關心的是:採用同樣的面板同類顯示器產品,他們之間真的就如同規格上標示的那樣沒有差異嗎?今天我們就來看看同樣基於奇美面板的19寸寬屏優派VA1912wb的表現。    優派VA1912wb的主要規格性能依舊是主流水平,8ms的響應時間、500:1的最大對比和300流明的亮度指標,接口配備也具備D-SUB/DVI-D模擬數字雙接口,雖然數字接口對於19寸解析度下畫質改善的意義沒有想像的大,不過數字接口在抗幹擾性能以及不用調整相位、頻率方面的便捷性讓很多消費者很在意。
  • ,做WB好多雜帶,怎麼辦?
    有童鞋看到雜帶,只懷疑抗體的原因,測完之後,您還認為——「非特異性」條帶一定是抗體的鍋嗎?當然不是。對於CST的抗體,都是內部研發生產並且經過多重交叉驗證之後才提供給客戶的,CST盡全力保證出廠的抗體都具有高靈敏度、高特異性、高度可重複性。
  • 關於靜電,你有過這些疑問嗎?
    失去電子的物體就帶上了正電,得到電子的物體就帶上了負電。2. 我穿了防靜電工作服,就不會產生靜電嗎?經常會遇到朋友跟我講:「我穿了防靜電工作服,不會有靜電的!」這個說法對不對呢?我們先來談談什麼是「防靜電」。「防靜電」或「抗靜電」其實通常是用作導電或耗散性的同義詞,描述一種材料與大地接觸時,能夠把靜電電荷導走。
  • 我終於知道為什麼師兄做 WB,條帶又漂亮、數據又優秀了…
    05:48:35 來源: 生物學霸 舉報     第一次做 WB,詭異的條帶告訴我膠沒配好
  • WB的灰度值計算,你都會了嗎?
    那我們做了western blot,掃膜得到結果之後就萬事大吉了嗎? 我想說這只是剛開始罷了,這時候我們得到的只是蛋白的條帶,當然我們通過觀察處理前後條帶的深淺可以大概的判斷該處理對基因的表達造成了什麼影響。
  • 你有「深海恐懼症」嗎?網友:這些圖能堅持看完,敬你是條漢子!
    要說讓你們暫時性地離開智慧型手機你們能做到嗎?別說長時間了,很多人就是一天沒摸到自己的智慧型手機都會覺得難受,最多能接受的就是一兩個小時的時間沒有手機,否則心理就會很煩躁,絕大部分的人都是這樣,這是因為我們對手機的依賴性太重導致的。
  • 農村廟會上的這些小寵物,你都養過嗎?
    出現在農村廟會上的這些小寵物,你都養過嗎?近日,安徽蕪湖舉辦的一場大型農村廟會上的這些小寵物扎堆,你是不是都養過嗎?小鸚鵡、各種大小的鼴鼠、小白兔子,還有金魚、烏龜,看到很多攤子上都在銷售,吸引了不少小朋友和大人們關注的目光。
  • 養娃路上這些坑,你有沒有踩過?
    但是這些焦慮都是有道理的嗎? 今天給大家分享一篇文章,來自我的好朋友大南南。她是央企同聲傳譯的翻譯官,聯合國、歐盟的議員,家裡有一對叫饅頭、花卷的龍鳳胎寶寶。 特殊的職業社交圈以及兩個孩子生長的差異,讓她對育兒的焦慮有不同的看法。相信這些對大家也有很好的啟發。
  • 這些來自都靈的美景,你都去過沒有?
    14世紀加泰隆尼亞人修建的有哥特風格的聖堂,藏有神奇的聖母瑪利亞和基督的雕像,據說這些雕像是在14世紀的一次海難中,被海水衝上案的。聖堂和長方形會堂在一起顯得有些矮小,二戰時遭到轟炸。位於卡利亞裡的新城Villanova。Basilica是你到卡利亞裡必去的著名景點,哪怕你並不信仰基督教,因為這裡實在是太出名。它不是一個尋常的教堂,它有著傳奇般的色彩。
  • 中國最名貴的5條魚,第5條魚全身都是寶,但價格昂貴!你吃過嗎?
    中國最名貴的5條魚,第5條魚全身都是寶,但價格昂貴!你吃過嗎?魚肉吃起來細嫩爽滑,裡面還含有非常豐富的蛋白質,而且所含脂肪也沒有豬肉那麼多,所以深受很多人的喜愛,尤其是在這樣一個炎炎夏季,當然要多吃這種,又不油膩,又不用擔心長胖的食物,可是說到魚類,我們普通人會想到的就是草魚、白鰱、鯉魚,但是今天小編要給大家介紹的這五種魚,可以說是中國最名貴的五種魚,一般人根本沒有聽說過,吃過三種以上,不是漁民就是土豪!
  • 總結起來,人緣差的人,差不多都有這些特徵,你遇到過嗎
    然而,我們生活中也有相當一部分人緣差的人,他們差不多都有這些特徵,你遇到過嗎?不會寬容,斤斤計較常言道「做人留一面,日後好相見」。無論做人,亦或是做事情,都要給別人留餘地,不能鑽牛角尖,不然有一天,自己會親手埋葬自己的後路。
  • 【實驗貼士】你的蛋白電泳條帶為什麼辣麼醜
    推薦重新倒膠,制膠很關鍵,如果你後續還要做 blot,膠沒有跑好浪費太多。圖2圖2這塊膠每孔上樣量過大。大多數的泳道還是能分清條帶,但是在 3、4 道塗抹痕跡非常明顯。這些泳道的樣品主要含有一種蛋白(血紅蛋白的亞基),與 9、10 道一樣。但是,3、4 道的樣品低估了紅細胞裂解物和紅細胞胞漿組分中的蛋白含量。這些組分包含了過多的蛋白以至於樣品需要稀釋後才能進行蛋白含量測定。但是這名學生卻忘記了這個樣品已經稀釋過了,因此造成了蛋白濃度的低估。(嚴重的失誤)
  • 有轉行想法的護士朋友,你是否認真考慮過?
    轉行可以改變現狀,有一條新的出路,但亦是存在風險的,轉行之前這幾個問題你是否認真考慮過?一、你喜歡這份工作嗎?之所以想要轉行,那原先的工作肯定是你不喜歡或存在幹擾的,轉行之後的工作,你是否喜歡,對於日後的工作展開亦是有影響的,有興趣才有更好的發展。二、想要什麼樣的生活?
  • 大學轉專業,你真的考慮好了嗎?網友:三思而後行
    第二:轉專業學生比普通學生更辛苦在提交申請前,同學們可千萬要考慮清楚了,將自己的實際情況相結合,因為轉專業還是很累、很麻煩的!對於轉入的專業要學習其大一的專業知識、必修課程,也就意味著要一年學兩年的課程,時間是安排的滿滿的,期末也是非常忙碌的,存在掛科風險。
  • 有沒有考慮過可能是你硝化細菌加多了?當心過...
    當時並沒有在意,一划而過。因為最近一直在寫「起底硝化細菌」系列文章,突然又想起這個問題來,於是重新搜索了一下,已經有不少答主做出了精彩回答。 瀏覽這些答案可以發現,沒有人認為魚缸裡硝化細菌加多了,會導致藻類爆發。基本都是回答沒有關係,也有答主認為硝化細菌少了(硝化系統不完善)才容易爆藻,也就是他們認為,硝化細菌對藻類有抑制作用。事實真的是如此嗎?
  • 以食物身份進入中國,卻因含有6千多條寄生蟲被禁,你吃過嗎?
    但是大家知道嗎?當我們在享受著美食的時候,一些寄生蟲也會隨著這些美食進入我們的身體。福壽螺的原產地是南美洲,分布非常的廣泛,在很多國家都能看到它們的身影,而且由於其個頭比較大,所以在這些國家都被當做肉類食物食用。後來在1980年左右,這種生物被作為食物引入了中國。以食物身份進入中國,卻因含有6千多條寄生蟲被禁,你吃過嗎?
  • 從杞人憂天到未雨綢繆,沒有發生的事情,哪些應該考慮?
    還有一種情況就是事情沒有發生,但是發揮想像力去考慮事情可能會往哪一個方向發展。 一,「杞人憂天」式或違背常識規律的事情,不考慮或少考慮。 1,杞人憂天式的事情:地球毀滅,核戰爭爆發等。
  • 你,真的會選擇嗎?你怎樣選擇,決定你過怎樣的生活
    A:1、你選擇的總和,就是你的人生。如果當初賈伯斯沒有選擇退學,就不會有蘋果的誕生;如果宮崎駿沒有選擇把時間都花在漫畫上,就不會有宮崎駿王國的出現;如果村上春樹沒有選擇在空餘時進行寫作,就不會成為諾貝爾文學獎的熱門人選。如果你選擇把所有的空閒時間,都花在吃喝玩樂上,就別指望自己能過一個富有意義的人生。
  • 這些世界上最美的生物你都聽說過嗎?
    這個世界上存在有成百上千的物種,每一種生物都有其自己的生命特色,以各種各樣的形態存活在世界上,之前我們盤點過世界上最美的奇觀,世界上最危險的地方以及世界上最有趣的植物,那麼本章我們盤點一些世界上最美的生物,來看看這些生物你都是否聽說過吧。1.
  • 你需要考慮清楚這些問題
    你需要考慮清楚這些問題 你有沒有覺得現在的自己,前路一片迷茫,不知道做什麼才能夠讓自己生活得更好? 這很正常。 我們每個人都會遇到讓自己感到迷茫的時刻,但怎麼主動去調整自己,啟動思考,讓自己走出困境,才是積極的做法。