「高通量測序」這詞我想大部分人都不會感到陌生，因為現如今它算得上是一個比較熱門的領域，但是您又知道多少關於高通量的知識呢？接下來小編來聊聊它的前世以及今生，帶您走進高通量測序的世界。
所有事物的出現都是有必然聯繫的，不可能憑空出現。對於高通量測序而言也是一樣的。隨著科學技術的進步，人們對環境中微生物的探索也從未終止過。先前依賴於傳統的平板純培養法，然而卻多達99%的微生物在現有實驗條件下無法得到培養鑑定。因此，基於非培養方法的高通量測序技術應運而生。
高通量測序技術（又稱下一代測序技術）是近年來發展的一項技術，能一次並行對幾十萬到幾百萬條DNA分子進行序列測定，具有高效性等特點。隨著科技的進步，高通量測序技術也在逐步的進行更新。
前世
Sanger法第一代測序技術（雙脫氧核苷酸末端終止法）：利用一種DNA聚合酶來延伸結合在待定序列模板上的引物，直到摻入一種鏈終止核苷酸為止。由於存在成本高、速度慢、通量低等不足，逐漸被淘汰。
今生
第二代測序技術（主要包括Roche 454焦磷酸測序，Illumina Solexa測序和ABI SOLID測序），各自優缺點如下：
Roche 454焦磷酸測序技術——依靠生物發光進行DNA序列分析。
優點：讀取序列長（400 bp）、可進行從頭測序（de novo sequence）；
缺點：無法判斷重複鹼基個數。
Illumina Solexa測序技術——原理是可逆終止化學反應。
優點：高度自動化系統、讀取片段多、適合大量小片段的測序（microRNA、lncRNA等）；
缺點：讀取序列較短、不適於de novo sequence。
ABI SOLID測序技術——核心是4種螢光標記寡核苷酸的連接反應。
優點：每個鹼基讀取兩次非常高的準確性，特別是對於SNP的檢測；系統靈活可以進行樣本的pooling、分割測序區域；
缺點：讀取長度受連接反應限制。
以上三種測序方法各有優缺點，目前科學研究中普遍運用的是Illumina的測序技術。
為了滿足日益突出的科研需求，第三代測序技術（單分子實時DNA測序技術，測序過程無需進行PCR擴增）也問世了：主要為單分子螢光測序（SMRT）和納米孔測序（納米孔單分子）。
單分子螢光測序：一種依賴於DNA聚合酶的邊合成邊測序的技術方法，讀長可達100000 bp；
納米孔測序：一種依賴於核酸外切酶的電信號測序的技術方法，具有無限的讀長。
目前由於成本較高，單讀長的錯誤率偏高，生信分析軟體不夠豐富，數據積累少等原因，還沒有得到廣泛的運用。
高通量測序技術的應用
轉錄組測序（RNA-Seq）：研究細胞表現和功能；
甲基化測序：表觀遺傳學標記信息；
外顯子組測序（Exome-Seq）：研究定向富集的DNA；
染色質免疫沉澱-深度測序（ChIP-seq）；
基因組測序；
數字基因表達譜分析；
序列捕獲（Sequence Capture）技術：結合了晶片和深度測序, 利用晶片探針捕獲待測片段, 再用深度測序技術分析核酸序列。
（以上內容和圖片部分來自網絡）