肌肉乾細胞的檢測_鄭大中科博生

2021-01-07 前沿的中科博生

具中科博生研究表明，肌肉乾細胞主要通過以下幾個方面來檢測。

（1）根據形態和分化特點檢測

肌肉衛星細胞以紡慘形為主，相互之間以細絲拉網，與成纖維細胞有較大差別。成纖維細胞形態扁平、多突起，胞質極其豐富。肌肉衛星細胞的分化與其他細胞有本質的區別，它是單核細胞相互融合最後形成多核細胞(肌管)的過程，產生了質的改變。衛星細胞在培養條件良好時，能形成有收縮能力的幼稚肌纖維也是其特點之一。中科博生。

（2）根據標記分子檢測

傳統方法檢測結蛋白(desmin),但不能排除肌組織塊中血管平消肌的汙染。檢測橫紋肌肌動蛋白可對衛星細胞、成纖維細胞和平滑肌細胞進行區分。衛星細胞能合成骨骼肌特異的磷酸肌酸激酶CK-MM亞型，且含有肌動蛋白與肌球蛋白及其前體蛋白等收縮蛋白，可通過生物化學或免疫化學方法來檢測衛星細胞。側群細胞(SP細胞)是骨髓或肌肉中含有肌肉乾細胞的另一群細胞，其檢測是根據Hoechst33342染色結合流式細胞術來進行的。中科博生。

（3）移植模型

mdx小鼠是研究D uchenne肌營養不良的動物模型。肌肉乾細胞植入後，能恢復mdx小鼠肌細胞增強蛋白的表達，肌細胞增強蛋白與mdx小鼠肌纖維融合，能形成雜交肌纖維並表達肌營養不良蛋白(dystrophin),這是一個很好的檢測肌肉乾細胞功能的模型。當然，人工製成肌肉損傷模型(切除)也是可用的方法。中科博生。

以2-氨基-已苯基口引噪(DAPI)標記肌衛星細胞，自體移植到心肌組織中，4周後顯示未分化的衛星細胞消失，DAPI標記的細胞數量增多，且與周圍心肌細胞結構相同。DAPI和肌衛星細胞結合穩定，在宿主心肌內並不隨細胞的增殖而脫落，可用DAPI作為衛星細胞的標記來研究衛星細胞在心肌內的增殖分化。移植後檢測造血細胞標誌分子如CD45可以檢測肌肉乾細胞向造血系統分化的潛能。

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