組織培養育苗的技術你知道嗎?看完懂了

2021-01-09 新哥侃娛樂

大家好,小編很高興又一次和大家見面了,今天小編給大家講的是組織培養育苗,希望大家能夠學到三農的一些知識。組織培養育苗組織塔養也叫微體繁殖,是根據植物細胞全能性的原理,在無菌的條件下,將離體的植物器官、組織、細胞、原生質等在適宜的培養基上培養,促其分裂分化,變成幼苗和成苗的技術。大花藏蘭、蝴蝶蘭、花燭、風梨、非洲菊、香石竹等重要室內花卉,目前主要用組織培養生產商品苗,上述6種花卉的具體組織培養技術見本書的有關章節。有的脫毒、復壯也用組織培養育苗。

花卉組織培養需要的主要設施和設備(1)化學紫驗室一般需15~20平方米的房間,室內有供儀器洗滌、烘乾、配製藥劑和婚養基的設備:有各種試管、三角瓶、燒杯、量筒、吸管等玻璃器皿:有精確度0.1克天平用來稱量蔗糖、瓊脂:精確度1毫克或0.01克天平用來稱量大量元素;精確度0.1毫克的分析天平用來稱量微量元素和植物生長調節劑(至少要有精確度0.1克和0.1毫克兩種天平);還要有冰箱、烘箱、高壓蒸汽滅菌鍋,水溶鋼等。(2)物質常備的物質有瓊脂,各種無機鹽,如常用的硝酸鉀、磷酸二慈鉀、硫酸鎂、維生素、胺基酸、糖類,細胞分裂素,如6-卡基腺嘌呤(6-BA),植物生長調節劑,如苯乙酸等,(3)接種室接種室由兩間連在一起的房間組成,其中一間作準備室,另一間作接種室,都婆有照明燈和紫外燈。接種室內擺放操作臺,放置酒精燈、接種工具、試管、三角瓶等,有條件的最好用水平淨化工作檯,並將它放在無菌室內,經濟條件差也可用接種箱來接種,但生產量大時用起來不方便和費工。(4)培養室培養室用於將接種到試管、三角瓶、罐頭瓶等玻璃容器內的微小植物體(外植體)進行培養生長的場所,培養室要有放置玻璃容器的培養架;要有控源設備,能調節和保持恆溫的能力:培養室要有補光照明燈和調節光照度的能力,並設有定時器加以自動控制。

母液和培養基把塔養基中的必需元素按原配方量的50倍、100倍或1000倍稱量後配製成一種濃溶液,稱為母液。在配製培養基時按比例分別量取母液稀釋到所需的濃度即可。花卉組培(組織培養)常用的培養基配方很多,以MS培養基應用最多,MS是Mu-rashige和Skoog的縮寫,他們兩人於1962年研究出這種培養基,被廣泛應用,常用培養基還有ER、B.、SH、HE、改良White等。

下面以MS培養基為例,簡要介紹配製方法。母液的配製配製母液時一定要按照下面的要求進行:可能產生化學反應的或溶解後產生沉澱的,不能放在同一個容器中:配製母液要用重蒸餾水:藥物要使用分析純或等級較高的化學純;藥物的稱量和溶液的定容都要準確。每液配好後貼上標籤,放在0~4℃的冰箱中,可使用半年到1年,這樣做可節省許多①母液A:硫服鎂18.5克、萌酸渡82.5克,確酸得95、0克。加水定容到1000毫升、程1升牆養基時量取20毫升母液。母流B:氯化鈣22.0克,加水定容到500毫升,配1升培養基時量取10毫升母液。①母流C:磷酸二氫解8.5克。加水定容到500毫升,濃度為培養基的100倍,配1升培養基時量取10毫升母液。①母液D:乙二胺四乙酸二銷3、73克,硫酸亞鐵2、78克,加水定容到1000毫升,配1升培養基時量取10毫升母液。③母液E:福股620毫克,硫酸錳2230毫克、硫酸鋅860毫克,硫酸鋼2.5毫克,碘化舞83毫克,相酸鈉25毫克,氯化鑽2.5毫克,加水定容到1000毫升、配1升培養基時量取10毫升母液。⑤母液F:肌醇5克,甘氨酸100毫克,煙酸25毫克,鹽酸吡夠醇25毫克,鹽酸硫談素5毫克。加水定容到500毫升,能1升培養基時量取10毫升母液,

牆養基的配製配製每1000毫升培養基,稱取6~10克球脂作凝固劑,具體按配方要求稱量,數在水浴鋼上慢慢溶解、先在量簡內放人一定量的水,按照母液順序和規定量,量取母微、當母流加完腦,根據配方的要求再加人生長測節物橫如引嗓乙酸成察乙酸,還有細胞分裂素等。細胞分裂素應用最多的是6-節基腺嘌呤,加完後倒人已溶化的瓊脂中每1000毫升培養基加人蔗糖30克或根據要求確定,定容到所需的體積。

繼續加溫,直到擦酯完全溶解,用鹽酸或氫氧化鈉對培養基的pH值進行調節,多數培養基的pH值在5.4~6.0,MS培養基的pH值為5.7、將配好的培養基趁熱倒人培養容器中,培養基佔容器體積的1/8-1/4.不要將培養基沾到容器壁上,否則容易被雜菌汙染,然後及時加蓋,進行高壓滅菌,滅菌時要按高壓滅菌鍋的操作規程使用,在121℃、壓力111千帕下維持15~20分鐘,溫度和時間都要嚴格控制,到時間後立即切斷電源,當高壓鍋內壓力降到常壓後,開啟放氣閥,打開鍋蓋,取出滅菌的培養基,放在接種室中培養3天,確定沒被感染後才能用來組織培養。看完小編的文章,大家有什麼想說的嗎?有什麼不同的看法多多給小編留言吧,謝謝大家的觀看,我們明天再見

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