常見實驗方法的中英文名稱原理

（1）蛋白質免疫印跡（Western Blot，WB）

是將蛋白質轉移到膜上，然後利用抗體進行檢測的方法。對已知表達蛋白，可用相應抗體作為一抗進行檢測。採用的是聚丙烯醯胺凝膠電泳，被檢測物是蛋白質，探針是抗體，顯色用標記的二抗。

（2）逆轉錄-聚合酶鏈反應（Real-Time，RT-PCR）

將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。

首先經反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴增合成目的片段。

（3）免疫組化(immunohistochemistry,IHC)

抗原抗體反應，即抗原與抗體特異性結合的原理，通過化學反應使標結合的原理，通過化學反應使標記抗體的顯色劑(螢光素、酶、金屬離子、同位素）顯色來確定組織細胞內抗原（多肽和蛋白質）對其進行定位、定性及定量的研究。

（4）蘇木精 - 伊紅染色法 ( hematoxylin-eosin staining，HE )

蘇木精染液為鹼性，主要使細胞核內的染色質與胞質內的核酸著紫藍色 ;伊紅為酸性染料 ，主要使細胞質和細胞外基質中的成分著紅色 。

HE染色法是組織學、胚胎學、病理學教學與科研中最基本、使用最廣泛的技術方法。

（5）掃描電子顯微鏡 (scanning electron microscope，SEM )

它是依據電子與物質的相互作用。當一束高能的入射電子轟擊物質表面時，被激發的區域將產生二次電子、俄歇電子、特徵x射線和連續譜X射線、背散射電子、透射電子，以及在可見、紫外、紅外光區域產生的電磁輻射。同時，也可產生電子-空穴對、晶格振動 (聲子)、電子振蕩 (等離子體)。

（6）TUNEL 染色[terminal dexynucleotidyl transferase(TdT)-mediated dUTP nick end labeling]（末端脫氧核苷酸轉移酶介導的dUTP 缺口末端標記測定法 ）

細胞在發生凋亡時，會激活一些DNA內切酶，這些內切酶會切斷核小體間的基因組DNA。細胞凋亡時抽提DNA進行電泳檢測，可以發現180-200bp的DNA ladder。

基因組DNA斷裂時，暴露的3'-OH可以在末端脫氧核苷酸轉移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上螢光素 (FITC) 標記的dUTP (fluorescein-dUTP) ，從而可以通過螢光顯微鏡或流式細胞儀進行檢測。

（7）免疫螢光(immunofluorescence technic，IF)

免疫學的基本反應是抗原-抗體反應。由於抗原抗體反應具有高度的特異性，所以當抗原抗體發生反應時，只要知道其中的一個因素，就可以查出另一個因素。免疫螢光技術就是將不影響抗原抗體活性的螢光色素標記在抗體(或抗原)上，與其相應的抗原(或抗體)結合後，在螢光顯微鏡下呈現一種特異性螢光反應。

（8）免疫細胞化學(immunocytochemistry，ICC)

免疫細胞化學是將免疫學基本原理與細胞化學技術相結合所建立起來的新技術，根據抗原與抗體特異性結合的特點，檢測細胞內某種多肽、蛋白質及膜表面抗原和受體等大分子物質的存在與分布。

（9）CCK-8檢測

化學名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽

它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪 硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被細胞線粒體中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲臢產物(Formazan)。生成的甲臢物的數量與活細胞的數量成正比。

用酶聯免疫檢測儀在450nm波長處測定其光吸收值，可間接反映活細胞數量。該方法已被廣泛用於一些生物活性因子的活性檢測、大規模的抗腫瘤藥物篩選、細胞增殖試驗、細胞毒性試驗以及藥敏試驗等。

（10）MTT檢測（3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide，Thiazolyl Blue Tetrazolium Bromide）

檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲臢(Zā)(Formazan)並沉積在細胞中，而死細胞無此功能。

二甲基亞碸(DMSO)能溶解細胞中的甲臢(Zā)，用酶標儀在490nm波長處(英文說明書寫的是570nm)測定其光吸收值，在一定細胞數範圍內，MTT結晶形成的量與細胞數成正比。根據測得的吸光度值(OD值)，來判斷活細胞數量，OD值越大，細胞活性越強(如果是測藥物毒性，則表示藥物毒性越小)。

（11）Annexin V/PI檢測細胞凋亡

在正常細胞中，磷脂醯絲氨酸只分布在細胞膜脂質雙層的內側，細胞發生凋亡早期，膜磷脂醯絲氨酸(PS)由脂膜內側翻向外側。Annexin V作為一種磷脂結合蛋白，與磷脂醯絲氨酸有高度親和力，它通過細胞外側暴露的磷脂醯絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結合。因此Annexin V是檢測細胞早期凋亡的靈敏指標。

Propidium iodide(PI)是一種核酸染料，它不能透過完整的細胞膜，但在凋亡中晚期的細胞和死細胞，PI能夠透過細胞膜與細胞核結合呈現紅色。將AnnexinⅤ與PI匹配使用，可以將凋亡早期的細胞和晚期的細胞以及死細胞區分開來。

（12）Elisa檢測（酶聯免疫吸附測定）

基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。

用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體複合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物後，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。

由於酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應的結果，使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA可用於測定抗原，也可用於測定抗體。