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《創造亞當》
有些史學家們難以相信整個《創世紀》的構思來自米開朗基羅自己；認為他可能求助於教廷神學家；也有學者相信藝術家自己的構思。不論如何，信仰虔誠如米開朗基羅者，他的一切創作泉源必定還是來自於神的啟發（注58）。西斯汀禮拜堂原本就是依照《列王紀》所描述的所羅門王聖殿的比例(60:20:30)所建，羅馬教廷藉此強調自身在宗教承繼上的正統性。而米開朗基羅繪製的《創世紀》，從神的開天闢地，神與人之間的誓約到人類的墮落與未來救贖，可說更為宏觀的註譯了宗教的意涵，並將與三十多年後完成的《最後的審判》結合，共同組成一首偉大的宇宙史詩。
在結構上，米開朗基羅採用象徵三位一體的數字「三」來劃分天頂為左中右三行，中央《創世紀》故事部分又分為大小輪替的九個畫面，每三個圖為一個組，分別描繪《神創世》、《造人與原罪》、《諾亞的故事》（注59）。
第一部分的《創世》﹕
《創世》過程被簡化成三個場景﹕「創造光」、「創造日月與植物」、「分開陸地和海洋」。創世主，這宇宙最古老的生命是什麼形像呢？米開朗基羅將祂化身為一個白髮長鬚的老人；相貌威嚴，身形魁梧，揮手間帶著無比威勢。
第一個畫面描述的是「混沌之初，神說要有光，於是有了光。」這裡的「光」顯然不是來源於日月星辰，而是來自主神的一念。在柏拉圖理論中，「光」代表著最高的智慧與真理。『神覺得光很美好，就把光和黑暗分開』。也就是說，神給人造的世界是二元的，有了光明與黑暗，在表現上就有了晝、夜；但在另一層意義上也有了陰、陽，正、負，既對比又互補的「相生相剋」的特性。
《創造日月》
第二個畫面中，《神創造了日月》。既然已有了光明與黑暗，為什麼還需要日月呢？因為天體規律運行產生的周期，可以給人時間的概念，作為人類生活作息的依據，進而在其中看到萬物消長、成住壞滅的循環。畫面中造物主出現兩次，先以萬鈞的氣勢在從右邊向我們迎面而來，一手指向前，一手指向後，威嚴的指揮著日月的形成和歸位；然後向左轉身離去，似乎急於下一步驟。這一來一往之間交待了時、空的差距與行動的連帶關係。而這創造日月的一幕已足以代表米開朗基羅作品的典型風格﹕從構圖動勢到人物的外形、神態都流露出一種堅強意志與威嚴的震懾力量，當時人稱為「terribilità」。
接下來的《分開陸地與海洋》相對較為平靜﹕主神漂浮於遼闊的海面上，慈悲俯察著自己的剛剛完成的傑作。鼓脹的鬥篷和擁簇的天使能增加視覺上的份量。
第二部分《人類的創造與墮落》
《創造亞當》
這部分包括《創造亞當》、《創造夏娃》與《人類的墮落（失樂園）》是《創世紀》故事的核心，也正好位於整個壁畫的中央位置，特別是背景空曠明亮的《創造亞當》最為顯眼。
《創造亞當》是一幅表現了神與人之間神聖關係的經典畫面。米開朗基羅描繪的不是造人的過程，而是一個已經形成的完美人體斜倚在土坡上，這個剛剛得到靈魂和自我意識的男人—亞當，正在接受創世主所賜予的人生命應該具備的一切。米開朗基羅沒有採用舊約記載的「上帝對亞當鼻孔吹了一口氣」的情節，而是採用更符合視覺美感的、更具有象徵內涵的構圖。畫面中神與人各自佔了份量相當的左右兩塊面積﹕一邊是位置較高、具有強大意志與積極力量，但威嚴與慈悲同在的主神；一邊是初生而略顯無力，但對神的賜予充滿期待的神之子—人。米開朗基羅保留了中間的空曠地帶，用以突顯兩者以手臂相連的戲劇性時刻，而且就停留在食指幾乎互相碰觸的前一瞬間。咫尺的距離，卻給予人無窮的想像。這個連結又好似臍帶關係﹕人來自於神。但是神為什麼按照自己的形像造人？人為何如此特殊？神給了人什麼？人有什麼使命？這或許要等到《最後的審判》到來，一切真相大白時，世人才會驚覺悔悟。其實《創世紀》不只是描述人與世界的來源，也隱含了主神與人立下誓約以完成救贖的歷史。
有個值得注意的小細節﹕造物主巨大的鬥篷中除了許多小天使，還多了一位女性，這女人正是下一幕要出現的夏娃。這也符合了柏拉圖主義的觀點﹕人間有的，在上界早已先天存在。一切都在主神的計劃中。
在《創造夏娃》中，神幾乎佔了畫面的三分之一，祂抬起厚實的手臂將女人從沉睡的亞當體中喚出。謙卑順從的女人貌似祈求，神像慈父般的給予教導。
到了《亞當、夏娃受誘惑與墮落》情節時，米開朗基羅以一棵智慧之樹將故事的前後因果作了分割。左邊是受蛇誘惑正在摘取禁果的亞當夫婦；右邊是被發現違反禁令而遭天使驅逐的二人。神造的世界中，由於正負因素同時存在，所以也有不善的變異生命，如撒旦或蛇之類。畫中的女身蛇纏繞在樹上誘惑夏娃，然而與舊約敘述不同的是，亞當是自己主動摘取果實，而夏娃反而被動的轉身接過蛇遞給她的禁果。其實，神造人的時候，也給了人自由意志。所以人的為與不為。是人自己的選擇，因此也要自己承受後果。
《墮落與失樂園》
違反禁令被逐出伊甸園的亞當、夏娃變得醜陋。
偷吃了禁果的亞當夏娃有了性意識，發現自己赤身露體很難為情。由於思想不再純淨，也不能在伊甸園待了（神的境界沒有七情六慾）。天使將他們驅逐至園外的蠻荒的世界，生存面臨困難。按上帝的懲罰，男人必需付出血汗勞力才能換得溫飽，女人必需忍受懷孕生產的痛苦才能繁衍後代。更重要的是，他們「來自塵土，必需歸於塵土」，也就是必需面對死亡(注60)，後世子孫代代如此。這也是人類「原罪」的由來。米開朗基羅將二人犯罪後的相貌表情變得衰老而醜陋，也是其理念《容貌是美德的表徵》的再次表現。
第三個部分《諾亞的故事》
這個主題包括了《諾亞的獻祭》、《大洪水》和《諾亞酒醉》，也是整個壁畫中最早完成的部分。其中主畫面《大洪水》中人物有60多人，藝術家表現了人們被洪水衝散並奮力求生的情景。他把人群有條理的分成遠近不同的區塊，每一個部分以簡扼高效的方式表現了悲愴性，強調多是災難中人與人之間的友愛和互助（如前景的互相扶持和右邊老者救人上岸），也有少部分描寫了為求生不擇手段的人性之惡（如中央小船上的打鬥）。左邊一個年輕人正努力爬上一棵光禿禿又傾斜的樹幹，然而在暴漲的水勢中顯得如此脆弱；觀眾可以想像，即使他們獲得暫時的安全，最終仍是難逃滅頂的命運。只有遠處正平穩駛離的方舟，和以及舟上窗口那隻將會回報佳音的白鴿，象徵了善人獲救的希望。
《創世紀》《諾亞的故事》中的大洪水。
《諾亞獻祭》和《諾亞酒醉》都在洪水退去之後發生的事，由於《大洪水》需要較大的畫幅，米開朗基羅把它們安排在《大洪水》前後兩個小的畫面中，而不是按照故事的順序。《獻祭》描寫諾亞一家人獲救後殺牛宰羊準備向神獻祭的情景；《諾亞酒醉》則表現了諾亞在葡萄園醉酒失態時三個兒子的不同態度。米開朗基羅在此仿中世紀的敘事畫法畫出兩個諾亞，一個勤奮工作，一個行為失當；意指即使正直如諾亞著，若不注意也可能落入罪惡。而三個兒子對於父親的狼狽處境，有迕慢不敬的，也有體諒維護的；而諾亞憤怒下詛咒了迕慢的子孫。故事的教訓應是﹕即使人類在遭到毀滅性災難後倖存、繼續繁衍，若不知敬天修德，仍會帶著罪惡因子走向敗壞，在「成住壞滅」規律中面臨下一次的淘汰。
《先知與女巫》
圍繞在中央《創世紀》四周的三角穹隅間有十二個古代的預言家，包括七位希伯來先知和五位異教女祭司，他們都預見並記載了耶穌降世與未來的救贖。米開朗基羅選擇了《舊約》《大先知書》的四位作者—以賽亞、耶瑞米、以西結和但以理，及《小先知書》中的約珥、撒迦利亞、約拿三位。
先知以西結
先知約珥
並根據拉克坦提烏斯的著作《Institution Divines》中挑選了最著名的五位異教女祭司﹕德爾菲、厄利垂亞、庫瑪、波斯和利比亞的女祭司。這些巨大的預言家尺寸甚至超過《創世紀》圖象中的人物，形貌莊嚴生動，卻又各不相同，男、女、老、少、美、醜都有；正面、側面、背面、仰首，低頭，回首的各種角度俱全。除了約拿和耶瑞米之外，每個人都伴有卷冊，或展卷閱讀，或振筆疾書，或掩冊稍息，或翻頁查尋，或轉身放置…，有專注於著述的，的也有分神和身後天使互動的。雖然都是坐姿，米開朗基羅卻能他們的動勢達到最豐富變化，變化時又能自然而不造作。
德爾菲女巫
厄利垂亞女巫
庫瑪女巫
利比亞女巫
沒有書卷的兩位先知中，除了耶瑞米（可能是米氏的自我投射）自顧低頭沉思之外，以約拿的位置和表現手法最為獨特。他被安排在祭壇的正上方，這是一個從中央鬥拱上方向前彎曲連結到天頂的凹弧壁面，繪製的圖象很難不受曲面影響而變形。而天才如米開朗基羅者，卻能以「前縮法」將約拿的身體畫成向後仰、兩腿向前突出的姿態，正好和向前彎的壁面在視覺上互相抵消，反而更為立體生動。
約拿在眾多的先知中地位並不突出。他一直逃避上帝給他的使命，以致被大魚吞入腹內三天。當他悟到天命終不可違，便前往去尼尼微城警告當地人悔過向善，否則將遭毀滅。當尼城君王百姓都真心悔過，上帝將災難免除時，約拿又埋怨上帝讓他沒面子（因為災難沒有發生）。上帝最後用一棵小樹來點化人心太重的約拿﹕『你對一顆小樹尚且吝惜，何況尼尼微這座大城裡面有十二萬無辜的孩童和眾多牲畜呢，我能不憐惜嗎？』
米開朗基羅者以「前縮法」將約拿的身體畫成向後出的姿態，正好和向前彎的壁面在視覺上互相抵消，不僅自然而且更為立體生動。約拿向後仰頭，仿佛正在和神討價還價。
米開朗基羅把先知約拿畫的尤為巨大，他向後仰頭仿佛正在和神討價還價，身邊陪襯的不是書籍，而是故事中的大魚和小樹。米開朗基羅把約拿安排在壁畫的底端中央位置，或許純粹為解決視覺的問題，或許讓他的故事提醒我們，在信仰或修煉的過程中，人心是難免的，但要信賴你的主，奉行神的旨意，完成約定的使命，因為神的旨意必然是善的，垂憐眾生的。@
注58：「…好的畫──米開朗基羅說，…迫近神而和而結合……它只是神的完美的鈔本，神的畫筆的陰影，神的音樂，神的旋律……因此，一個畫家成為偉大的巧妙的大師還是不夠。我想他的生活應當是純潔的，神聖的，使神明的精神得以統治他的思想……」羅曼．羅蘭著《米開朗基羅傳》。p.126
注59：順序的安排是和禮拜堂本身的功能也關的，如創世的部分安排在教皇舉行儀式的祭壇上方；以其接近神的緣故；而人間的故事則放在群眾席的另一端。
《來自塵土，必歸於塵土》比照東方說法，就蘊涵了「在三界中輪迴轉世之苦」的內涵。 雖然西方宗教不提輪迴轉世，但是輪迴轉世的說法也被越來越多的現代西方人所研究和接受。
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