MALDI-TOF新技能

2021-01-16 質譜學組

本研究應用MALDI-TOF MS原理,在Clin-ToF-Ⅱ飛行時間質譜系統上,建立了PCR-核酸飛行時間質譜檢測SARS-CoV-2的方法。並通過對 COVID-19 疑似患者的核酸樣本進行檢測,評價檢測性能及實際應用價值。


PCR-核酸飛行時間質譜方法可應用於SARS-CoV-2核酸檢測,有較好的特異性和敏感性,樣本檢出率高於實時螢光定量 PCR 方法,尤其對實時螢光定量 PCR 報告疑似樣本有較高的陽性率,可明確判斷結果,降低漏診率。在現有SARS-CoV-2臨床診斷及密切接觸者確診環節中,存在大量可疑樣本需要實驗室檢測的多次驗證,該方法的建立大大提高了檢測效率,減少了實驗室重複驗證的過程,更早地提供了實驗證據,也為疫情研判縮短了時間。


樣本的病毒含量、標本類型、試劑盒質量、採樣方法,樣本運輸等問題均可能導致核酸檢測結果不準確,且容易出現「假陰性」現象,本研究通過對咽拭子和痰液標本的檢測結果分析,發現無論是實時螢光定量PCR法還是PCR-核酸飛行時間質譜法,疑似COVID-19病例的痰液樣本陽性檢出率明顯高於咽拭子樣本,且假陰性率低於咽拭子樣本。這與SARS-CoV-2 易於在下呼吸道繁殖生長相吻合,提示樣本採集應儘量採集下呼吸道標本。


飛行時間質譜技術在應用方面不僅可以進行蛋白質多肽檢測、微生物鑑定、糖基化檢測,同時還可以進行基因的SNP、突變、甲基化及拷貝數變異(copy number variation,CNV)分析。在臨床檢測領域,其基因檢測的功能還未得到充分的開發,但鑑於其靈敏度高、特異性強,檢測成本低、高通量和高準確性等特點,在核酸檢測方面具有廣闊的應用前景。


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