一圖搞定 ELISA 試驗原理

2021-02-08 檢驗時間

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酶聯免疫吸附試驗（ELISA）是一種酶標固相免疫測定技術。其基本原理是把抗原（或抗體）結合到固相載體上，並將抗原（或抗體）與某種酶連接成酶標記抗原（或抗體）。在檢測時，將待檢樣本和酶標抗原（或抗體）按一定程序與固相載體上的抗原（或抗體）反應，然後用洗滌的方法去除未反應的部分，加入底物後，底物被結合在固相載體上的酶催化產生有色物質，通過定性或定量檢測有色產物量，可確定樣品中待測物質含量。

塑料固相載體一般選用聚苯乙烯，將抗原或抗體結合到固相載體上的過程稱為包被。當包被的蛋白質濃度過低時，固相載體表面不能被完全覆蓋，其後加入的血清標本和酶結合物中的蛋白質也會部分的吸附到固相載體表面，產生非特異型顯色，在這種情況下，需用 1%-5% 牛血清蛋白或 5%-20% 小牛血清再包被一次以消除幹擾，此過程稱為封閉。

ELISA 可用於檢測抗原和抗體。檢測抗原最常用的方法為雙抗體夾心法，檢測抗體時最常用間接法，這兩種方法都屬於非競爭性結合試驗。目前應用較多的競爭性試驗是檢測 HBeAb 和 HBcAb。

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