常用的病毒載體有腺病毒、逆轉錄病毒和慢病毒。逆轉錄病毒載體只能感染分裂期細胞,而且容量有限,腺病毒一般不能整合到染色體上,只能進行瞬時感染。
與其它逆轉錄病毒相比,慢病毒(LV)具有可以感染非分裂期細胞、容納外源性基因片段大,可以長期表達等顯著優點。慢病毒不產生任何有效的細胞免疫應答,可作為一種體外基因運輸的工具。慢病毒載體介導的轉基因表達能持續數月,且無可觀察到的病理學現象。
慢病毒包裝系統一般由慢病毒表達載體和慢病毒包裝載體組成。
而慢病毒包裝質粒可提供所有的轉錄並包裝RNA到重組的假病毒載體所需要的所有輔助蛋白。為產生高滴度的病毒顆粒,需要利用表達載體和包裝質粒同時共轉染細胞,在細胞中進行病毒的包裝,包裝好的假病毒顆粒分泌到細胞外的培養基中,離心取得上清液後,可以直接用於宿主細胞的感染。
慢病毒包裝系統一般都是三質粒或四質粒包裝系統。其中四質粒系統比三質粒系統在生物安全性上更好一些,所以應用較多。
對於一些較難轉染的細胞,如原代細胞、幹細胞、不分化的細胞等,能大大提高目的基因轉導效率,而且目的基因整合到宿主細胞基因組的機率大大增加,這就為RNAi,cDNA 克隆以及報告基因的研究提供了一個有利的途徑。
為活體動物模型實驗提供高質量的包含目的基因的病毒液。