慢病毒載體是什麼?

慢病毒載體可以將外源基因或外源的shRNA有效地整合到宿主染色體上，從而達到持久性表達目的序列的效果。在感染能力方面可有效地感染神經元細胞、肝細胞、心肌細胞、腫瘤細胞、內皮細胞、幹細胞等多種類型的細胞，從而達到良好的的基因治療效果。對於一些較難轉染的細胞， 如原代細胞、幹細胞、不分化的細胞等，使用慢病毒載體，能大大提高目的基因或目的shRNA的轉導效率，且目的基因或目的shRNA整合到宿主細胞基因組的機率大大增加，能夠比較方便快捷地實現目的基因或目的shRNA的長期、穩定表達。

慢病毒載體系統由兩部分組成，即包裝成分和載體成分。慢病毒包裝流程

包裝成分由HIV-1基因組去除了包裝、逆轉錄和整合所需的順式作用序列而構建，能夠反式提供產生病毒顆粒所必需的蛋白。包裝成分通常被分開構建到兩個質粒上，一個質粒表達Gag和Pol蛋白，另一個質粒表達Env蛋白，其目的也是降低恢復成野生型病毒的可能。將包裝成分與載體成分的3個質粒共轉染細胞(如人腎293T細胞)，即可在細胞上清中收穫只有一次性感染能力而無複製能力的、攜帶目的基因的HIV-1載體顆粒。

載體成分與包裝成分互補，即含有包裝、逆轉錄和整合所需的HIV順式作用序列，同時具有異源啟動子控制下的多克隆位點及在此位點插入的目的基因。

為降低兩種成分同源重組恢復成野生型病毒的可能，需儘量減少二者的同源性，如將包裝成分上5′LTR換成巨細胞病毒(CMV)立即早期啟動子、3′LTR換成SV40 polyA等。