流式細胞儀
流式細胞儀是一種測量細胞螢光信號的精密儀器,具備高通量、高靈敏度、高精確度定量及多通道測量等特點,其高速細胞分選的純度更可達99%以上。
流式細胞儀所能測量的細胞指標極多,如細胞形態,細胞表面及胞內抗原、眾多經免疫螢光染色的蛋白,蛋白相互作用,蛋白磷酸化,細胞膜完整性,流動性,膜融合和翻轉,膜電位,胞質Ca2+、PH值,細胞骨架成分, DNA、RNA含量,端粒長度,染色體核型分析乃至染色單體分選等等。
流式細胞儀主要由四部分組成:流動室和液流系統、雷射源和光學系統、光電管和檢測系統、計算機和分析系統。
①流動室和液流系統
流動室由樣品管、鞘液管和噴嘴等組成。樣品管貯放樣品,單個細胞懸液在液流壓力作用下從樣品管射出;鞘液由鞘液管從四周流向噴孔,包圍在樣品外周后從噴嘴射出,鞘液使被檢測細胞被限制在液流的軸線上。
②雷射源和光學系統
經特異螢光染色的細胞需要合適的光源照射激發才能發出螢光供收集檢測。
③光電管和檢測系統
經螢光染色的細胞受合適的光激發後所產生的螢光是通過光電轉換器轉變成電信號而進行測量的。
④計算機和分析系統
經放大後的電信號被送往計算機分析器。多道的道數是和電信號的脈衝高度相對應的,也是和光信號的強弱相關的。對應道數年縱坐標通常代表發出該信號的細胞相對數目。