基因組DNA提取,該退出歷史舞臺了

2020-05-14 簡單實驗聚合美

說起提基因組DNA做模板,上千份樣本讓人心煩意亂,每到採樣季,多少研究生都不願想起那些年洗過的研缽和無數的EP管。菌落PCR,各種處理後,酵母、農桿菌等還沒裂開,而做實驗的您估計腦袋快要炸開了!多想有一款靠譜的直接PCR產品來拯救實驗,拉您跳出基因組DNA提取泥潭!聚合美超光速Mix及PCR擴增伴侶,免提基因組DNA,直接PCR,帶您進入偉大的PCR新時代!


聚合美PCR Mix 三部曲


基因組DNA提取,該退出歷史舞臺了


註:聚合美超光速Mix與PCR最佳擴增伴侶是一對最佳搭檔,PCR擴增伴侶(一種新型裂解液)能夠高效的打開細胞釋放基因組DNA, 裂解液帶入後續的PCR體系,也不會影響後續PCR實驗。


最佳搭檔,直接PCR不再是問題


1、大量轉基因植物的陽性苗鑑定

•轉基因擬南芥,水稻,玉米,小麥,大豆,穀子一次轉基因要做幾十甚至上百份材料。

•對100多份苗提取DNA,工作量非常大。

•有時還容易出現交叉汙染

如何解決:MF859簡單處理後做模版 。

葉片樣本:剪很小葉片加入10 µl 裂解液混勻,沸水浴3-5 分鐘,離心取1-2µl作為PCR模板 。


2.作物新基因位點的圖位克隆

•水稻,玉米,小麥,新基因位點的鑑定,一般通過圖位克隆方法鑑定。

•圖位克隆通常涉及1000多份甚至更多植株提取DNA,工作量巨大!

•如何將您從枯燥繁雜的提取實驗中解放出來,是我們的目標!

如何解決:MF859 簡單處理後做模版 。

葉片樣本:剪很小葉片加入10 µl 裂解液混勻,沸水浴3-5 分鐘,離心取1-2µl作為PCR模板 。


實驗示例一:水稻抗稻瘟病位點篩選


基因組DNA提取,該退出歷史舞臺了

以前做法:提取100份基因組DNA ,用時一天,身心俱疲,懷疑人生!

使用超光速Mix:1小時輕鬆處理100份樣品,更早得到實驗結果!


3.酵母/農桿菌/革蘭氏陽性菌/放線菌的菌落PCR失敗?

•酵母/農桿菌/革蘭氏陽性菌/放線菌等微生物有非常厚的細胞壁。

•常規通過95度預處理5-10分鐘,沒法讓細胞破裂 。

•無法釋放DNA做模板,導致PCR失敗。

如何解決:MF859簡單處理後做模版。

菌液樣本:菌液和裂解液體積比1:2混合,沸水浴3-5分鐘,離心取1-2µl作為PCR模板。

菌落樣本:挑少量菌加入10 µl 裂解液混勻,沸水浴3-5 分鐘,離心取1-2µl作為 PCR模板。


實驗示例二:酵母菌落PCR


基因組DNA提取,該退出歷史舞臺了


以前做法:95℃預變性5min,沒結果!10min,還是不行!!!怎麼辦???

使用超光速Mix:使用PCR分子伴侶處理,一次成功


4.鼠尾檢測PCR結果不穩定或者失敗

•常見鼠尾直擴裂解液都是先用強鹼NaOH裂解鼠尾,然後用HCl中和。

•如果稍微加得多點少點,槍頭沾點,都會導致pH急劇變化。

•這樣的粗提物,對後續的PCR有極大的影響,使得結果非常不穩定。

如何解決:MF859 簡單處理後做模版 。

鼠尾樣本:剪很小鼠尾加入10 µl 裂解液混勻,沸水浴3-5 分鐘,離心取1-2µl作為PCR模板 。


因新冠疫情影響,各高校、研究所延期開學,選擇聚合美超光速Mix,把耽誤的時間搶回來!跳過繁瑣的提取基因組DNA步驟,快速處理樣本,直接PCR,實驗頓時輕鬆有木有!!!


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