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Cell Counting Kit-8（簡稱CCK-8）試劑可用於簡便而準確的細胞增殖和毒性分析。其基本原理為：該試劑中含有WST-8【化學名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽】。它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）的作用下被細胞中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲瓚產物（Formazan dye）。生成的甲瓚物的數量與活細胞的數量成正比。因此可利用這一特性直接進行細胞增殖和毒性分析。
96 孔板、CO2培養箱、酒精燈、移液槍、酶標儀等；細胞、CCK8等。
取生長狀態良好的對數生長期細胞，每孔按 4×103個接種至 96 孔板中，每組設置8個復孔，置於細胞培養箱中培養，待細胞貼壁後轉染相應質粒後。繼續培養 48h 後，棄含藥培養基，每孔加入新鮮配製的含 10ｕL的毒性檢測液CCK8，置於培養箱中繼續培養 4h 後，用酶標儀測波長為450 nm的OD值。實驗重複 3 次， 取實驗結果的平均值作為最終實驗結果。按公式計算生長抑制率＝[(對照組 OD－實驗組 OD)/對照組 OD] ×100%，以分組為橫坐標，生長抑制率為縱坐標，繪製細胞生長抑制率柱狀圖。
當使用標準96孔板時，貼壁細胞的最小接種量至少為1000 個/孔(100μl培養基)。檢測白細胞時的靈敏度相對較低，因此推薦接種量不低於2500 個/孔(100μl培養基)。酚紅和血清對CCK8法的檢測不會造成幹擾，可以通過扣除空白孔中本底的吸光度而消去。
CCK8可以檢測大腸桿菌，但不能檢測酵母細胞。在細胞增殖實驗每次測定的過程中需要避免細菌汙染，以免影響結果。CCK-8在0-5℃下能夠保存至少6個月，在-20℃下避光可以保存1年。當在培養箱內培養時，培養板最外一圈的孔最容易乾燥揮發，由於體積不準確而增加誤差。一般情況下，最外一圈的孔只加培養基，不作為測定孔用。在培養基中加入CCK8，培養一定的時間，測定450 nm的吸光度即為空白對照。在做加藥實驗時，還應考慮藥物的吸收，可在加入藥物的培養基中加入CCK8，培養一定的時間，測定450 nm的吸光度作為空白對照。金屬對CCK-8顯色有影響：當終濃度為1mM的氯化亞鉛、氯化鐵、硫酸銅會抑制5%、15%、90%的顯色反應，使靈敏度降級。如果終濃度是10 mM的話，將會100%抑制。懸浮細胞由於染色比較困難，一般需要增加細胞數量和延長培養時間。
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