非瘟早期監測事關重大!什麼檢測方法能更早發現病毒?

2020-12-06 騰訊網

本文轉自愛蘇生物

心痛！很多豬場反應，豬都發病了，但豬唾液樣本、環境拭子檢測一直都是陰性！早期監測預警系統為何失靈？

檢測背景：今年6月，中國動物疫病預防控制中心發布了第二批非洲豬瘟現場快速檢測試劑名單，包括26個企業的34個產品。但是實驗室測評和篩選產品時，檢測樣品類型僅限於樣品盤的類型，包括豬血液和豬組織樣品。所以目前市面上的非瘟檢測試劑盒，對於血液樣本的檢出率和檢測效果是毋庸置疑的。樣本處理甚至都不用核酸提取盒，僅需PCR反應試劑盒配套的核酸提取液，就能快速分離病毒核酸，直接檢測。

但是目前豬場要存活下來，就要早期監測生物安全防控效果，用的樣本大多是豬的唾液和環境物質，非瘟病毒含量低，並且不同樣本的核酸含量、酶含量、特殊雜質含量都不一樣。所以說，目前不配套核酸提取試劑盒，僅含有核酸提取液的非洲豬瘟病毒螢光PCR快速檢測試劑盒或提取效率低的核酸提取試劑盒並不能滿足豬場的臨床檢測需求。

唾液樣本的特殊性

唾液中有溶菌酶、唾液澱粉酶、過氧化物酶、鹼性磷酸酶、酸性磷酸酶、葡萄糖-6-磷酸脫氫酶、丙酮酸激酶、穀胱甘肽還原酶等大量酶類物質，會對病毒的核酸有一定的降解作用。

核酸提取基本原理

簡單來講，核酸提取包括樣本裂解和純化兩個步驟。裂解是使樣本中的核酸游離在裂解體系中，純化則是使核酸與裂解體系中的其它成分，如蛋白質、鹽份和其它雜質徹底分離的過程。

唾液樣本核酸提取試劑盒

本試劑盒適用於從唾液或者各類型拭子樣本中提取基因組DNA。試劑盒採用獨特作用的裂解液和緩衝液系統，配合高效吸附DNA的吸附膜，在一定條件下對DNA具有極強的吸附富集能力，當條件改變時又可以可逆地釋放DNA，從而達到快速分離純化DNA、並最大限度地去除蛋白質等雜質的目的，從而保證提取核酸的純度。

唾液提取試劑盒優勢

相對於血液樣本採集方式的複雜性、對豬的傷害應激作用、對疾病傳播的風險評估，唾液樣本採集有著顯著的不可比擬的優勢。對於非洲豬瘟病毒檢測項目而言，唾液樣本核酸含量本身較低，為此，本款專門研製的唾液樣本核酸提取試劑盒更有針對性，能更高效率的提取病毒核酸，最終攜帶微量病毒樣本的陽性檢出率大大提高（提取盒檢測效果見附表）。唾液樣本採集後配合唾液保護液混勻進行核酸提取，效果更好。

附表：唾液樣本核酸提取盒PCR檢測結果對比

【結果分析】某豬場發病早期採集的唾液樣本，其中A、B廠家提取試劑盒提取的唾液樣本核酸陽性檢出率為30-40%，而愛蘇唾液核酸提取盒陽性率80%以上，可疑結果經復檢為陽性。

廣東愛蘇生物科技有限公司生產的唾液樣本核酸提取試劑盒靈敏度更好，更準確。有利於更早發現病毒，更適用於豬場的日常檢測，提高早期「拔牙」的成功率。

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來源：牧康靈

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