3．DNA連接酶。因為複製過程中，DNA鏈的合成方向只能由5′端→3′端方向進行，因此其中有一條新鏈的合成是不連續的。起初生成的是許多短鏈。需要DNA連接酶將它們連接起來。
4．參與DNA解旋、解鏈的酶及因子。已知DNA具有超螺旋結構。複製時必須鬆弛DNA模板的超螺旋結構，並使DNA的雙鏈分開，暴露鹼基，否則不可能在模板上按鹼基配對原則合成新的互補DNA鏈。松馳模板DNA超螺旋，分開雙鏈主要由拓撲異構酶，解鏈酶及DNA結合蛋白等來完成。
（三）DNA複製的過程DNA複製大致可分為以下幾個階段。1．起始與引物RNA的合成DNA複製有固定的起始部位，在真核細胞DNA雙鏈上有多個起始部位。複製時，解鏈酶等先使DNA的一段雙鏈解開，形成複製點。這個複製點的形狀象一個叉子，故稱為複製叉。引物酶能辯認起始部位，並以四種核糖核苷酸為底物，以解開的一段DNA鏈為模板，按5′-3′方向合成RNA片段。在這一階段只合成了引物RNA，為DNA鏈的合成做好了準備工作。
2．DNA片段的生成在細胞內，DNA的兩條鏈都可作為模板，同時合成兩條DNA鏈。由於DNA兩條鏈是反向平行的，即一條鏈是5′→3′方向，而另一條鏈則是3′→5′方向。但是，DNA聚合酶催化DNA鏈的合成只能順著5′→3′方向進行。
因此，在新的DNA鏈中有一條連續合成的（稱前導鏈），而另一條是不連續合成的（稱隨從鏈。在隨從鏈合成過程中，先合成的是較短的片段（稱為岡崎片段），然後將這些片段再連結起來，形成完整的DNA鏈。