使用血液參數作為評估保育豬健康狀態的早期指標 武漢回盛生物科技...

武漢回盛生物科技有限公司朱秀高（譯）

保育群中大約有1%仔豬會由於體弱、營養不良或行動遲緩以及易感藍耳病或鏈球菌等而造成損失。除此之外，體重較輕或營養不良仔豬也會由於PFTS現象，使其斷奶後沒有出現呼吸、全身性或消化道症狀，但這些豬會因為採食量較低而逐漸變得消瘦。一些仔豬還會出現其他能夠引起食慾下降、發熱、呼吸困難或體重降低的消耗性疾病。採集血液通過對血液成分的測定來診斷、治療和分析許多疾病的預後情況非常有價值。另外，通過對血液成分的測定來監控豬群健康狀況可以在豬群還未表現出發病症狀之前，及早發現異常。因此，將對血液成分的測定作為常規診斷方法有助於我們早期確診疾病或發現保育豬對疾病的易感性，從而減少發病死亡造成的損失。

正常血液成分發生變化能夠說明環境如何影響保育豬的生理狀態，這種關係的確定可以幫助生產人員對豬群採取更好的管理措施，從而提升豬群的健康狀況。本研究作為保育豬安樂死研究的一部分，主要目的是評估血液成分分析能否作為確定保育豬對疾病易感性的指標。

材料與方法

研究中所有的動物使用、處理和樣品採集技術均是按照堪薩斯州立大學動物關懷與使用委員會推薦的方法進行。

實驗中使用了58頭、平均體重為5.6±1.3Kg的斷奶仔豬，這些豬的斷奶日齡在21-28天之間，斷奶時隨機從3個保育舍的14欄中挑選後，將其飼養於環境可控的保育欄內，每個保育欄的面積在2.74m*3.05m，單欄飼養量為27-29頭，欄內安裝有一個自動飲水器和一個雙面式餵料器。日糧以玉米、高粱和大豆粉為基礎配製。實驗第一天採集所有豬的血液樣品（第一天），之後獸醫將豬分為兩類：健康或異常，其中異常豬不是指豬有外傷或膿腫，而是豬有明顯可見的發病症狀，這些症狀包括但不局限於咳嗽、明顯體弱、腹部鼓脹、明顯脫水或營養不良、嗜睡和消瘦等；健康豬則不能出現上述這些症狀。採集血液前飼料正常飼喂。

血液採集與分析

研究中用到的仔豬，由於一些豬的具體出生日期不詳，在實驗的第一天時，其日齡大約為21-28日齡。採血時，在連續3天的採集中，每頭豬由獸醫隨機選擇，其中第一天20頭、第二天22頭、第三天16頭，採完血後豬單獨觀察24-32小時。每頭豬約採集15ml血液，其中9ml放入含K2EDTA的抗凝管內，用於分析一些應激相關激素；6ml放肝素抗凝管內，用於分析血象和離子濃度。樣品採集完後，將豬稱重、打耳標。

肝素抗凝管內的血液在離心前，取出一小部分用於測定乳酸含量、葡萄糖含量、鈣離子濃度、鉀離子濃度、鈉離子濃度、血紅蛋白濃度、紅細胞壓積、pH、氧分壓及二氧化碳分壓。

乳酸和iSTAT測定完成後，將樣品在室溫條件下1000g、離心15分鐘，離心得到的血漿轉移到聚丙烯管內，在進行皮質醇和兒茶酚胺測定前一直冷凍保存。

血漿中皮質醇含量的測定採用Coat-A-Count試劑盒、配合PackardCobra Gamma 計數器進行。該方法的回收率為100.14%、重複性為90.45%。

血漿中的腎上腺素和去甲腎上腺素用活化後的氧化鋁和0.1M的次氯酸分離、並根據Holladay和Edens介紹用HPLC法進行重複測定。該方法採用添加標準添加回收法時，其回收率為83%-87%、樣品內重複間的變異係數（CVs）≤5%，如果測定中樣品的重複性>5%，則應進行重新測定，直至變異係數達到可接受程度。

實驗豬的安樂死與剖檢

實驗結束後，豬只採用逐漸增加的低氧麻醉（約每秒鐘36.9m）或二氧化碳氣體進行安樂死處理。豬只死亡後，將其分為3中類型：死亡前存在病變（病變與安樂死無關）、有明顯的肺部病變（病變與安樂死有關，局限於肺部，不包含肺部的發紺）、沒有明顯病變。基於本文的需要，我們在此討論死亡前存在病變的豬只與它們的健康狀態之間的關係。

統計分析

實驗得到的數據採用多線性模型和卡方方法分析。

結果

各組血液指標的結果見表1。健康保育豬的葡萄糖和鈉離子濃度高於不健康豬；不健康豬的血紅蛋白濃度和血細胞壓積高於健康豬；其他檢測指標如腎上腺素、去甲腎上腺素、皮質醇、鉀離子、乳酸、pH或氧分壓等方面，二者無顯著性差異；健康豬的鈣離子濃度和二氧化碳分壓呈好於不健康豬的趨勢。

表 1 不健康組保育豬（32頭）和健康組保育豬（26頭）的血液指標結果

安樂死後一頭健康豬和兩頭不健康豬的肉眼可見肺部病變確認是與健康狀況有關，而與安樂死無關。這種肺部的病變對任何年齡段、任何健康狀況的豬來說，都較為少見。健康豬和不健康豬群中出現的肺部病變數量無顯著性差異。

討論

本研究中測定的血液指標包含了與應激、代謝或營養狀況相關的指標以及血液成分指標。這些指標發生變化，意味著機體正常生理狀態被打破，因此通過對這些指標的監測，有助於我們早期發現疾病或處於亞臨床狀態的豬只。

從本次研究的結果來看，不健康保育豬主要呈脫水或營養不良狀態，不過，結果並未說明出現這一狀況的原因。Anderson等人發現斷奶後5天小型豬的正常紅細胞壓積為29.8%-32.8%。本研究中，不健康保育豬的平均紅細胞壓積顯著高於健康豬，這一數值的異常升高會影響心臟功能，可能是造成脫水或厭食的原因。例如，Xin等人禁錮22-26日齡的仔豬72小時，他們發現在實驗開始時紅細胞壓積開始升高，並在整個禁錮期內持續升高（33.5%-40.1%）。與之相比，本研究中的仔豬大約為28日齡，且未受到禁錮，但歸類入不健康群的仔豬，其平均紅細胞壓積為35%，這一數值接近Xin等人實驗中的下限，所以該群中的仔豬確實呈不健康狀態。

據報導，21-28日齡仔豬的正常血紅蛋白水平為9.2-10.5g/dL。本研究中，健康仔豬的這一指標位於正常範圍之內；而不健康仔豬的這一指標偏高，分析原因可能是由於脫水或營養不良所致。

我們的實驗顯示，不健康仔豬的葡萄糖濃度低於健康仔豬，這也可能是仔豬出現厭食、脫水或二者都有的反應指標。仔豬的正常血液葡萄糖濃度為65-95mg/dL，本研究中不健康仔豬的葡萄糖濃度在這一參考範圍內，但與健康仔豬相比偏低。這一結果與Gentz等人的結果一致，Gentz等將產房仔豬禁錮120小時，發現初生、1日齡、3日齡、9日齡和16日齡仔豬血糖濃度呈持續降低趨勢。

3周齡仔豬的正常血清鈉離子含量為144.9±2mmol/L。本研究中，兩組仔豬的該指標水平均低於正常水平。Accensi等給3組斷奶仔豬（大約42日齡）分別飼餵DON含量為280、560和840微克/Kg的日糧，結果顯示與對照組相比三組仔豬血液中的鈉含量均無顯著差別，這一結果提示我們，儘管豬只採食量會下降，但血液中的鈉離子水平不一定會降低。本研究中不健康豬的其他血液指標提示我們這些豬可能出現了脫水或營養不良等。結合Accensi等人實驗中的其他結果，我們認為造成這些仔豬血鈉水平偏低的原因可能與其他因素有關。

14-35日齡仔豬的正常血清鈣離子濃度為10.9-11.5mg/L。我們的研究顯示健康豬的鈣離子濃度要高於不健康豬，不過這兩組豬的鈣離子濃度都要低於上述參考值。

豬的正常二氧化碳分壓為40±3mmHg。本研究結果顯示，健康豬的該指標水平高於不健康豬，但後者的水平仍處於參考範圍內。生產中，二氧化碳分壓可以作為應激的指示劑、其與新生仔豬的腎上腺素水平呈正相關。因此，研究中的不健康仔豬可能處於輕微應激狀態。

研究中的兩組實驗豬沒有一組的腎上腺素或去甲腎上腺素顯著升高。其他血液指標如鈉、葡萄糖和紅細胞壓積等的顯著變化，提示我們這些仔豬可能發生了衰弱、呼吸困難、脫水或厭食。不過，能夠引起這些症狀的刺激因素不一定能夠使相關血液指標升高。

仔豬的肺部病變以及其他一些原因導致不健康仔豬逐漸消瘦。

根據本研究結果，仔豬的健康狀況可以在一定時間內通過對血液成分的分析來確定，從而及時發現尚未表現出外觀疾病症狀的不健康豬，進而生產人員能夠提前採取預防措施或對該類豬只早期淘汰。

結論

對血液葡萄糖、鈉、紅細胞壓積和血紅蛋白含量的測定有助於對保育豬消耗性疾病進行早期檢測或研究。

對血液指標的測定結果提示我們，豬群中的不健康豬可能發生了厭食和衰弱情況。