新型冠狀病毒肺炎,流式細胞術都有哪些用武之地?

2020-11-24 儀器信息網

在新型冠狀病毒肺炎（Novel coronavirus pneumonia, NCP）的各個診療方案中，我們仍然能夠發現與流式細胞術相關的檢測得到了不少認可與建議，那麼，究竟流式細胞術在新型冠狀病毒感染的診斷與治療中，有哪些用途呢？這些基於流式的檢測又是否對臨床具有實際意義的幫助呢？

我們從現有的已經官方發布的新型冠狀病毒肺炎的診療方案中，尋到了建議進行流式相關檢測的依據。即，對於新型冠狀病毒感染，在有條件的情況下，建議進行淋巴細胞亞群和細胞因子的檢測。


針對已確診的2019-nCoV病人建議留觀後第3、5、7天及出院時依據病情可，若有條件可檢查血細胞，肝腎功能，肌酶+肌紅蛋白，凝血、CRP；第5-7天若有條件可複查PCT及TB淋巴細胞亞群11項。

而進行淋巴細胞亞群和細胞因子的檢測，最常用的檢測方法即流式細胞術。


由於對2019-nCov的機制尚在研究中，我們參考了與之相似性很高的SARS的診治方案和研究結果，來共同探討一下這些檢測的臨床意義。


其他研究顯示，在SARS治療過程中，糖皮質激素的應用會使T淋巴細胞及亞群發生不同程度減低，因此，外周血T淋巴細胞亞群的動態監測，有助於SARS-Cov致病機制的研究和診斷，並對於指導治療（尤其糖皮質激素應用的試劑、劑量等）以及提示預後具有重要價值。3

還有很多研究揭示了細胞因子在冠狀病毒感染中扮演的重要角色。Chen J等人在2010年發表的，利用BALB/c小鼠模式，對SARS-CoV感染的細胞免疫反應進行的研究顯示，細胞因子在病毒感染後的早期（如TNF-α, IL-6, 趨化因子CXCL10, CCL2, CCL3, CCL5等）和疾病進程中（如 TNF-α, IFN-γ, IL-2, IL-5, IL- 6, 趨化因子CXCL9, CXCL10, CCL2, CCL3和CCL5等）均有增高，這些細胞因子的增高，要麼與早期炎症細胞的募集相關，要麼與病毒清除，肺部損傷肺部炎症產生相關。5

另有研究認為，SARS感染後，機體會因為受到較強的外界刺激而產生過度免疫，出現細胞因子風暴。而細胞因子風暴會造成的肺毛細血管內皮細胞以及肺泡上皮細胞的瀰漫性損傷，引發急性呼吸急性呼吸窘迫症候群（acute respiratory distress syndrome, ARDS）。6

最新發表在Lancet上的針對2019-nCoV 感染的研究揭示，感染2019-nCoV的患者有大量的IL1B、IFNγ、IP10和MCP1增高，可能與激活Th1細胞免疫反應有關。然而，2019-nCoV感染也啟動了抑制炎症的Th2細胞因子（如IL4和IL10）分泌的增加，這與SARS-CoV感染還是不同的。進一步比較ICU患者與非ICU患者，發現ICU患者血漿IL2、IL7、IL10、GCSF、IP10、MCP1、MIP1A、TNFα的濃度均高於非ICU患者，提示細胞因子風暴與疾病嚴重程度相關（圖2）。7


由此可見，檢測病毒感染者的細胞因子的情況，有助於了解機體在冠狀病毒感染後的一系列免疫應答狀態，為疾病治療和預後判斷提供重要依據，同時也為探索新型冠狀病毒的致病機制提供更多的線索。

當然，對於新型冠狀病毒的研究仍在繼續，流式細胞術能貢獻的檢測指標也遠不止淋巴細胞亞群和細胞因子，在條件允許的情況下，納入更多有潛在意義的檢測指標，也很有可能為探索新型冠狀病毒感染的更優診療方案，以及致病機制研究帶來新的助益和指引。


參考文獻

1. 新型冠狀病毒感染的肺炎診療方案（試行第四版）

2. 北京協和醫院關於 「新型冠狀病毒感染的肺炎」診療建議方案（V2.0）

3.  傳染性非典型肺炎(SARS)診療方案[J].現代實用醫學,2004(02):119-126.

4. He Z, Zhao C, Dong Q, et al. Effects of severe acute respiratory syndrome (SARS) coronavirus infection on peripheral blood lymphocytes and their subsets[J]. International Journal of Infectious Diseases, 2005, 9(6): 323-330.

5. Chen J, Lau Y F, Lamirande E W, et al. Cellular Immune Responses to Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus (SARS-CoV) Infection in Senescent BALB/c Mice: CD4+ T Cells Are Important in Control of SARS-CoV Infection[J]. Journal of Virology, 2010, 84(3): 1289-1301.

6. 張豔麗, 蔣澄宇. 細胞因子風暴:急性呼吸窘迫症候群中的主宰生命之手[J].生命科學,2015,27(05):554-557.

7. Huang C, Wang Y, Li X, et al. Clinical features of patients infected with 2019 novel coronavirus in Wuhan, China[J]. The Lancet, 2020.



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