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CST Tech Tips - 流式細胞術中如何固定和通透細胞?
CST TECH TIPS 系列課程 歡迎關注「CST博士互助平臺」 有關流式細胞術(Flow Cytometry,FCM)實驗步驟中的固定和通透化,你需要了解什麼?進行流式細胞術,如果你所有的靶標均在外表面表達,那麼可使用活細胞。但當你靶向胞內蛋白時,需依次進行固定、通透細胞並用抗體和/或偶聯抗體對細胞進行免疫染色。固定會交聯細胞中的大分子並將靶蛋白鎖定到位。通透化使抗體能夠進入胞內間隙。關於固定、通透化的實驗步驟,有一些注意事項。
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流式細胞術實驗中可能存在的影響因素
流式細胞術(Flow Cytometry ,FCM)實驗操作中存在各種可變因素,包括儀器設備、樣本處理、試劑、操作過程、數據分析等。前期針對流式細胞儀進行了原理的詳細介紹「漲姿勢啦!若在染色前溶血,需確認:1)抗原性不被溶血過程改變2)溶血劑被徹底洗去,細胞和抗體結合的動力反應未受影響3)所用溶血劑不含固定劑,否則會影響細胞活性及表面標記結果。密度梯度離心法,靶細胞回收較好並可能得到富集,同時去除紅細胞、碎片等,但費時,某些重要細胞群體可能被選擇性丟失。
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【Flow Cytometry】流式細胞術
>流式細胞術(Flow Cytometry, FCM)是一種在功能水平上使用流式細胞儀對單細胞或其他生物粒子進行定量分析和分選的檢測手段。它可以高速分析上萬個細胞,並能同時從一個細胞中測得多個參數,具有速度快、精度高、準確性好等優點,成為當代最先進的細胞定量分析技術。流式細胞儀(Flow Cytometor)是一項集雷射技術、電子物理技術、光電測量技術、計算機技術以及細胞螢光化學技術、單克隆抗體技術為一體的檢測儀器。
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BD中國與兒科醫院共建首個「流式學院」,推動流式細胞術應用
原標題:BD中國與兒科醫院共建首個「流式學院」,推動流式細胞術應用新華網上海8月3日電(記者 仇逸)為進一步推動流式細胞術在兒科臨床實踐和科研的應用和發展,優化感染免疫疾病的診療和管理,3日,BD中國生物科學部與復旦大學附屬兒科醫院建立長期戰略合作夥伴關係,攜手建立首個「流式學院」,致力建設流式細胞術臨床應用的示範中心和培訓基地。
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流式細胞術檢測細胞凋亡還有哪些方法?
前面講到利用流式細胞術進行細胞凋亡檢測的annexinV/PI雙染色法,今天主要簡要介紹SYTO/PI雙染色法、細胞DNA含量分析法、TUNEL法。用SYTO染料標記細胞後,尤其是與PI染料共同標記時可以區分活細胞、凋亡細胞和壞死細胞,因此其最主要的應用就是檢測細胞凋亡,其中最具有代表性的是SYTO11、SYTO16、SYTO17和SYTO62等。
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疾病管理、健康管理,流式細胞術來引領
流式細胞術作為細胞分析的關鍵技術之一,可以精準提供疾病動態信息。
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流式細胞術在2020年歐洲血液學年會(EHA)上大放異彩
陸道培醫療集團在CD19嵌合抗原受體T(CD19-CAR-T)細胞治療急性B淋巴細胞白血病(B-ALL)中有豐富的經驗,尤其是橋接異基因造血幹細胞移植,挽救了無數難治復發患者生命。這類疾病的病情監測、療效評價、預後評估中,流式細胞術(FCM)微小殘留病變(MRD)檢測技術起到不可或缺的作用。
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用流式細胞術測量主動脈細胞液相胞飲作用
液相吞飲是所有哺乳動物細胞非受體依賴的內吞作用,可能是巨噬細胞攝取低密度脂蛋白的機制。但目前還沒有測量體內單個主動脈細胞的液相胞飲作用的方法。
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「小貝開講」之流式細胞術在MDS及相關疾病檢測中的應用
時間:2018年5月31日 19:30 - 20:30內容簡介:骨髓增生異常症候群(myelodysplastic syndromes, MDS)是起源於造血幹細胞的一組異質性髓系克隆性疾病,特點是髓系細胞分化及發育異常,表現為無效造血、難治性血細胞減少
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流式細胞術CV值重要嗎?怎麼用?
刀刀明做流式細胞術cv值控制在多少合適,我最近做
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先天免疫缺陷病診療有福音流式細胞術向全國推廣
原發性免疫缺陷病在中國還沒有被普遍認識,家長和部分臨床醫生對原發性免疫缺陷病不了解,患兒的病情容易被混淆,即便及時確診,幫助檢測免疫細胞的重要手段流式細胞術(Flow Cytometry,FCM)的解讀、分析在國際範圍內,目前臨床還缺乏統一的指導原則。
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新型冠狀病毒肺炎,流式細胞術都有哪些用武之地?
在新型冠狀病毒肺炎(Novel coronavirus pneumonia, NCP)的各個診療方案中,我們仍然能夠發現與流式細胞術相關的檢測得到了不少認可與建議,那麼,究竟流式細胞術在新型冠狀病毒感染的診斷與治療中,有哪些用途呢?這些基於流式的檢測又是否對臨床具有實際意義的幫助呢?
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流式細胞術常見問題解答,太實用了!
01 用於做Western 或ELISA的一抗可否用於流式細胞術? 看你說明書上是怎麼說的了,如果沒有說就不可以做流式,需要另外買了。 02 請問流式細胞術單抗直接螢光需要幾種對照? 首先確認你用的直標抗體的螢光染料是什麼,再確定該抗體的來源種屬,選擇相應的同型對照。
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流式細胞儀檢測細胞周期
發送實驗到本公眾號(Freescience聯盟)後臺,查看更多相關推文~周期分析操作篇寫在前面流式細胞術的原理篇我先賣個關子,先來個簡單的周期分析操作篇~通過流式細胞術進行DNA周期分析,可以測定細胞的DNA含量哦~準備工作☞☞☞製備單細胞懸液於200 μl的PBS緩衝液中;加入2 ml預冷的70%乙醇,4 ℃保存;步驟1.腫瘤細胞按300,000-500,000細胞/孔接種於6孔板中;24小時後,加入藥物;24-72小時後,EDTA消化並收集細胞,取單細胞懸液
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包頭市中心醫院檢驗科開展流式細胞術檢測
包頭市中心醫院日前開展了淋巴細胞亞群檢測,通過檢測淋巴細胞表面的CD分子,可以對全血中的B細胞,CD4+ Th細胞,CD8+ Ts細胞,NK細胞等的數量和組成進行分析,從而更清楚地掌握機體的細胞免疫狀態,對多種疾病的診斷,治療及預後提供依據。
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相干雷射解決方案助推流式細胞術的免疫細胞療法等新型應用
北京2020年11月26日 /美通社/ -- 11月24日,來自Coherent相干公司的鄭傑先生在第二屆流式細胞儀網絡會議(iCFCM 2020)上做了關於「流式細胞儀的雷射解決方案」的演講。鄭傑先生現在相干公司負責中國生物儀器市場銷售工作,對於雷射在生命科學領域的應用(如流式、基因測序和共聚焦顯微成像等)有多年的經驗,對該市場發展具有獨到的見解。
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流式中文網已正常訪問;流式監測CD19 CAR T細胞的染色操作
流式中文網(https://www.flowcyto.cn)經過一個月的備案過程,終於備案完成,現已恢復正常訪問。現在速度飛快。
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抗體藥介導NK細胞進行ADCC的檢測
故抗體與靶細胞上的抗原結合是特異性的,NK細胞對靶細胞的殺傷作用是非特異性的。由以上細胞間作用可知,ADCC整個過程有三個重要組成部分:單抗藥物、效應細胞(NK細胞)和靶細胞。因此,體外實驗一般包括靶細胞的確定(細胞表面高表達單抗識別抗原)、效應細胞的選擇和靶細胞活性的檢測。靶細胞的確定: 抗體藥物研發或臨床試驗中所靶向的腫瘤細胞或被病毒感染的細胞。
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BD在首屆全國細胞分析學術年會上發布FACSLyric(TM)流式細胞儀
重慶2019年10月29日 /美通社/ -- 2019年10月24日,全球領先的醫療技術公司、流式細胞術的領導者BD在首屆全國細胞分析學術年會上重磅宣布將為中國生命科學研究領域帶來又一款創新利器BD FACSLyricTM流式細胞儀。
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技術專家眼中流式細胞儀的「用武之地」
來自不同流式細胞儀供應商的三位技術專家分別就流式細胞術的廣泛應用以及在非傳統領域的應用作了分享,供廣大儀器用戶了解學習。最近,流式細胞術已被用於改進小顆粒的分析,例如循環外泌體,其有望用於液體活檢。現如今,流式細胞儀正在進入單細胞分析領域。由於流式細胞儀能夠從小樣本中收集大量信息,我們預計在不久的將來,更多的科學家將對生物和臨床樣本中的單細胞進行分析。