質粒提取過程中的幾點注意事項

2021-01-11 生物谷
質粒提取過程中的幾點注意事項

來源：小木蟲論壇 2006-12-01 21:55

1.加入溶液2後不要劇烈振蕩，只需輕輕顛倒幾次離心管。

2.加入溶液3後，復性時間不宜過長，一般是5分鐘，否則會使染色體復性。

3.在用苯酚、氯仿抽提時應用TE緩衝液將原溶液的體積擴大，一般是200～ 300 微升，以減少DNA的損失。

以上是本人在提取質粒時的一些體會，希望能對同行有所幫助！

本網站所有註明「來源：生物谷」或「來源：bioon」的文字、圖片和音視頻資料，版權均屬於生物谷網站所有。非經授權，任何媒體、網站或個人不得轉載，否則將追究法律責任。取得書面授權轉載時，須註明「來源：生物谷」。其它來源的文章系轉載文章，本網所有轉載文章系出於傳遞更多信息之目的，轉載內容不代表本站立場。不希望被轉載的媒體或個人可與

我們聯繫

，我們將立即進行刪除處理。

溫馨提示：87%用戶都在

生物谷APP

上閱讀，掃描立刻下載! 天天精彩！

相關焦點

  • 質粒中量提取試劑盒的操作方法與注意事項
    本試劑盒適用於提取5-30 ml過夜培養的大腸桿菌，質粒提取得率和質量與不宿主菌的種類和培養條件、細胞的裂解、質粒拷貝數、質粒的穩定性、抗生素等因素有關。注意：第一次使用前將RNase A加入Solution I中混勻後建議置於4℃保存；Solution III 建議置於4℃保存。 四、注意事項 1、Solution I 在使用前應先加入RNase A（將試劑盒中提供的RNase A全部加入），混勻後4℃保存。
  • 知識分享:質粒提取
    知識分享：質粒提取實驗原理現在較常用的質粒提取方法有三種:鹼裂解法、煮沸法和去汙劑裂解法，前兩種方法較為劇烈，適用於較小的質粒（＜15Kb），而去汙劑裂解法則比較溫合，一般用於分子量較大的質粒（＞15Kb）。
  • 解決在質粒提取過程中遇到的10大基本困惑!
    是不是在質粒提取過程中總會碰到提取的質粒濃度不夠或者純度不夠的情況？其實經常提質粒之後，會發現提質粒是一項非常簡單且基本的實驗操作。但如果真問起一些質粒提取的一些細節，可能很多人回答不了。不信隨我看看。
  • 質粒DNA的提取與純化
    質粒DNA的提取與純化 來源：來源網絡 2007-04-02 16:28 一、實驗目的與原理質粒多為一些雙鏈、環狀的DNA分子，是獨立於細菌染色體之外進行複製和遺傳的輔助性遺傳單位
  • 質粒小量提取跟大量提取有什麼區別
    質粒大用於大量菌液的提取，100ml-500ml 均可，而質粒小量用的菌液量很少，一般1.5-5ml。2、純度不同。一般試劑盒中質粒大量比質粒小量多了溶菌酶、異丙醇（回收沉澱核酸）、含一定量PEG的氯化物（回收質粒DNA）及乙酸銨等，其作用及目的都是有利於細菌的裂解和質粒的純化，所以質粒大量提取的產物比質粒小量提取的量多很多，而且純度很高。3、實驗要求不同。
  • 索氏提取法注意事項
    索氏提取器提取法注意事項 　　脂肪廣泛存在於許多植物的種子和果實中，測定脂肪的含量，可以作為鑑別其品質優劣的一個指標。脂肪含量的測定有很多方法，如抽提法、酸水解法、比重法、折射法、電測和核磁共振法等。
  • 煮沸法快速提取質粒以及瓊脂糖電泳與DNA酶解
    實驗目的： 1、 掌握質粒 DNA 分離，純化的原理 2、 學習煮沸法快速提取質粒 DNA 的方法 3、 學習 DNA的限制性酶切的基本技術 4 、 學習利用瓊脂糖電泳測定 DNA片段的長度 二、 實驗原理 在基因工程中， DNA 分子的切割是由限制性內切酶來完成的。
  • 質粒DNA提取及瓊脂糖凝膠電泳
    質粒DNA提取及瓊脂糖凝膠電泳 來源：來源網絡 2007-03-14 22:30 （一）鹼變性法提取質粒DNA 　　質粒(Plasmid
  • 看懂質粒圖譜,學會同源重組構建質粒
    目的是尋找一種能進入細胞、在裝載了外來的DNA片段後仍能照樣複製的運載體，將DNA分子運送到受體細胞中去。理想的運載體是質粒(plasmid)，在基因工程中，常用人工構建的質粒作為載體。載體構建即是構建含外源DNA的質粒。
  • 質粒DNA提取及瓊脂糖凝膠電泳——萬融實驗
    一、鹼變性法提取質粒DNA質粒（plasmid）是細菌染色體外能自主獨立複製的雙股環狀DNA，帶有遺傳信息，可賦予細菌某些新的性狀。將質粒指紋圖譜分析方法、質粒DNA探針技術及檢測質粒的PCR技術用於臨床感染性疾病的診斷和流行病學調查已成為現實。質粒作為載體在基因工程中起著重要的作用。
  • 【BioLabs Protocol】一種高效的質粒提取新方法
    本文參考質粒提取專利溶液4：40 g PEG8000加很少的水溶解（優點：沒有酚氯仿等有毒試劑；PEG真的超低濃度可以沉澱下來質粒
  • 質粒[plasmid] 的製備
    質粒[plasmid] 的製備 來源：來源網絡 2007-06-20 20:49 質粒是攜帶外源基因進入細菌中擴增或表達的主要載體，它在基因操作中具有重要作用。
  • 質粒DNA提取實驗的?操作步驟
    質粒DNA提取實驗的操作步驟： 　　1. 細菌繁殖：LB培養基，2 ml/20ml，37℃，200 rpm，搖一搖，過夜。 　　2. 離心10 min，5 000 rpm， 4℃;棄上淸液。 　　3.
  • 質粒DNA的分離、純化和鑑定
    在製作酶譜、測定序列、製備探針等實驗中需要高純度、高濃度的質粒DNA,為此需要大量提取質粒DNA。大量提取的質粒DNA一般需進一步純化,常用柱層析法和氯化絕梯度離心法。　　[注意] 1. 提取過程中應儘量保持低溫。　　2. 加入溶液II和溶液III後操作應混和,切忌劇烈振蕩。　　3. 由於RNA酶A中常存在有DNA酶,利用RNA酶耐熱的特性,使用時應先對該酶液進行熱處理(80℃1小時),使DNA酶失活。
  • 養小型犬要掌握對方法,不要錯誤的飼養,給你講幾點注意事項
    現在生活中常見的幾種狗狗，它們大都是體型很小並且長相很可愛的。很多人也都會想要養上一隻，能夠給人帶來非常多的快樂，讓人們生活變得不再那麼的乏味。而由於小型犬的性格和一些小孩特別相像，於是很多家裡有小孩的人都會選擇養一隻小型犬，不過大多都是一些新手。
  • 實驗 質粒DNA的微量製備
    一、實驗目的1 ．了解質粒的特性及其在分子生物學研究中的作用；2 ．掌握鹼裂解法分離、純化質粒DNA的方法。質粒具有自主複製和轉錄能力，能在子代細胞中保持恆定的拷貝數，並表達所攜帶的遺傳信息。質粒的不相容性：利用同一複製系統的不同質粒不能在同一宿主細胞中共同存在。
  • 在沙漠裡騎駱駝,這幾點注意事項一定要知道
    沙漠駱駝那麼駱駝怎麼騎，以下這幾點一定要知道。1、駱駝是一個一個用繩子鏈在一起的，通過6-12個駱駝一鏈，排成一隊走在沙漠中，如果在沙漠裡有兩三臉駱駝排成隊行走，是沙漠中一道美現的風景線；2、正因為是駱駝是繩子鏈在一起的，所以只需要一個人牽引頭陀在沙漠中行走就可以了。3、理解了以上幾點，再看看怎麼樣騎駱駝。
  • UV印表機列印過程中的注意事項
    UV印表機的工作過程，是由操作者、計算機和設備三者共同完成的，缺一不可。計算機是操作者與UV印表機交互的樞紐，而操作者的規範作業是整個列印過程的核心。計算機在UV列印過程中擔當著圖像處理，數據傳輸等重要工作，我們必須保證其安全和穩定。不建議在操控設備的電腦上安裝過多其它應用軟體，如視頻和遊戲，這樣會霸佔計算機的硬體資源。同時，不能在UV印表機工作過程當中進行大容量數據處理，如設計軟體處理大型圖片，以免造成內存不足導致數據處理中斷。
  • RNA提取常見問題及注意事項
    1.RNA在細胞內極易降解，樣本選擇時一定要選取新鮮的樣本組織或者取樣後迅速低溫處理（液氮速凍）；樣本出現多次反覆凍融後，RNA得率會嚴重下降，也會導致RNA降解；RNA提取環境要保持無RNA酶汙染；　　2.RNA容易受到環境汙染導致RNA嚴重降解，建議實驗過程中注意更換實驗手套，使用所有耗材應該均無RNA酶的一次性耗材；
  • 「實驗」質粒DNA的瓊脂糖凝膠電泳檢
    DNA分子在瓊脂糖凝膠中泳動時有電荷效應和分子篩效應。（1）電荷效應DNA分子在PH值高於其等電點的溶液中帶負電荷，在電泳時向陽極移動。不同濃度大小瓊脂糖的有效分離範圍三、實驗儀器、材料、試劑1.實驗儀器及用具電泳儀、移液槍、電磁爐、錐形瓶、容量瓶、紫外分析儀2.實驗材料及試劑實驗材料：上節課提取的質粒DNA