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螢光染料,顧名思義,會發出螢光的染料。螢光染料是指吸收某一波長的光波後能發射出另一波長大於吸收光的光波的物質。它們大多是含有苯環或雜環並帶有共軛雙鍵的化合物。螢光染料可以單獨使用,也可以組合成複合螢光染料使用。
圖源:百度百科
一、螢光染料的工業應用
螢光染料常用於螢光染料產品的製備,以及增白洗衣粉中的增白劑,指示信號用的各種螢光路標漆,螢光標誌服等。
螢光染料的其他用途包括: 滲漏汙水系統包括水和工業的汙染物、連接系統、測量發電廠排出的液體、洗手間的滲漏、非法的連接汙水管監察,研究流量和繪圖,分析腐敗的系統,此外還用於纖維織物印染和某些特種標誌(如暗處符號)及軍事追蹤等。
圖源:百度百科
二、螢光染料的科研應用
螢光染料,由於靈敏度高,操作方便,逐漸取代了放射性同位素作為檢測標記,其廣泛應用於螢光免疫,螢光探針,細胞染色等。包括特異性的DNA染色,用於染色體分析、細胞周期、細胞凋亡等相關研究。
另有很多核酸染料在多色染色系統中是非常有用的復染劑,可作為背景對照,標記細胞核使細胞內結構的空間關係一目了然。
1.免疫分析
螢光標記的單克隆抗體技術為流式細胞儀在研究細胞膜和細胞內各種功能性抗原、腫瘤基因蛋白等領域擴展了無限的應用空間。螢光探針可以通過蛋白質交聯劑共價結合在單克隆抗體上。
免疫螢光標記最常用的染料有異硫氰酸螢光素(fluorescein isothiocyanate, FITC)、藻紅蛋白(PE)以及AlexaFluor系列染料等。
2.核酸檢測
核酸螢光染料對細胞核染色後定量測量細胞所發出的螢光強度,就可以確定細胞核中DNA、RNA的含量,並可以對細胞周期和細胞的增殖狀況進行分析。
有多種螢光染料可以對細胞中的DNA或RNA染色,常用的DNA染料包括碘化丙啶(PI)、DAPI、Hoechst 33342等,RNA染料有噻唑橙、吖啶橙等。
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三、螢光染料的亮度如何判斷?
螢光染料是細胞生物學等科學研究中不可或缺的重要工具,螢光濾色塊是螢光顯微鏡中至關重要的一個部件。那麼一般螢光染料亮度怎麼進行比較?
螢光染料的亮度可以用來比較不同螢光染料的螢光標記效果,通過陰性細胞群與陽性細胞群的螢光信號之間的關係來表示。但陰性細胞群的螢光信號受到信號強度、自發螢光、非特異性染色、儀器的電子噪聲等多個因素相關。
螢光染料染色指數是陽性細胞群的平均螢光強度與陰性細胞群的平均螢光強度之差與陰性細胞群螢光強度標準差之間比值的一半。螢光染料染色係數只和抗體克隆與質量、螢光團純度與質量、螢光修飾比、雷射線及其功率、長通和帶通濾光片、目的細胞等因素相關。
螢光染料的染色指數與螢光染料的亮度呈正相關,也就是螢光染料亮度越高,染色係數也就高。
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