螢光染料亮度越高,染色係數越高

2020-12-06 每日生物評論

螢光染料是細胞生物學等科學研究中不可或缺的重要工具，螢光濾色塊是螢光顯微鏡中至關重要的一個部件。我們大家在操作螢光染料亮度的時候，我們可以按照上面的比較方法去比較螢光染料的亮度，那麼一般螢光染料亮度怎麼進行比較?

螢光染料的亮度可以用來比較不同螢光染料的螢光標記效果，通過陰性細胞群與陽性細胞群的螢光信號之間的關係來表示。但陰性細胞群的螢光信號受到信號強度、自發螢光、非特異性染色、儀器的電子噪聲等多個因素相關。

螢光染料染色指數是陽性細胞群的平均螢光強度與陰性細胞群的平均螢光強度之差與陰性細胞群螢光強度標準差之間比值的一半。螢光染料染色係數只和抗體克隆與質量、螢光團純度與質量、螢光修飾比、雷射線及其功率、長通和帶通濾光片、目的細胞等因素相關。

螢光染料的染色指數與螢光染料的亮度呈正相關，也就是螢光染料亮度越高，染色係數也就高。

DNA染料：

DAPI螢光染料，超純，AAT-17510

凋亡細胞核酸藍色染料，AAT-17548

圖1.用Cell Navigator脂質液滴螢光測定試劑盒（Cat＃22735）和Nuclear GreenLCS1（Cat＃17540）染色的油酸處理過的HeLa細胞的螢光圖像。

細胞增殖染料：

藍色活細胞螢光探針CytoTell Blue，AAT-22251

圖2.用CytoTellGreen和CFSE進行的細胞增殖測定。在第0天，用CytoTellGreen或CFSE對Jurkat細胞（2×106細胞/ mL）進行染色。在指定的那天，以1：1的比例連續通過細胞。在通過當天，在FITC通道中用ACEA NovoCyte 3000流式細胞儀測量螢光強度。連續幾代人以不同的顏色代表。

細胞活力檢測染料

鈣黃綠素螢光染料，超級純，AAT-22006

圖3.用CytoCalcein Violet 500（Cat＃22013）染色的活HeLa細胞圖像。細胞核用Hoechst 33342（Blue，Cat＃17535）染色。

螢光標記染料

iFluor 350琥珀醯SE，AAT-1020

圖4.將 HeLa細胞與（Tubulin +）或不與（Tubulin-）小鼠抗微管蛋白一起孵育，然後與iFluor488山羊抗小鼠IgG綴合物（綠色，左）或AlexaFluor488山羊抗小鼠IgG綴合物（綠色，右）。細胞核用Hoechst 33342（藍色）染色。

文章來源：每日生物評論

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