電穿孔是更快、更有效的轉化方法;然而,化學轉化更便宜

2020-12-05 小侃姐姐

●通過優化參數，如電場強度、電脈衝的波長、DNA濃度和電穿孔緩衝液的組成，能夠獲得超過10'0轉化體/ug DNA的轉化效率(Dower et al. 1988)。

●電穿孔可使培養液中80%以上的細胞轉化成氨苄青黴素抗性的細胞，已報導使用此方法的轉化效率接近每分子質粒DNA可以獲得--個轉化體的理論最大值(Smithetal. 1990)。

●對於大小為2.6~85kb 的質粒，轉化效率可分別達到6X1010~1X 107 轉化體/ugDNA。這比通過化學方法製備的感受態細胞的轉化效率高10~20倍。

●電穿孔對於實驗室最常用的大腸桿菌菌株都適用(Dower et al. 1988; Tung and Chow 1995)。

電穿孔是更快、更有效的轉化方法。然而，化學轉化更便宜，每微克超螺旋質粒DNA的轉化效率雖然稍低，但是並不需要購買釋放電荷的專用設備和在電穿孔過程中承載細菌懸浮液的專用樣品池。高轉化效率對於某些應用是至關重要的，但不是所有情況都需要。

例如，構建文庫就需要儘可能高的轉化效率，電穿孔方法將是最好的選擇：對於亞克隆等常規應用，導入DNA的效率不是一個限制因素，並不需要太多的轉化體，更便宜的化學轉化可完全滿足實驗需要。

菌株基因型可極大地影響質粒DNA轉化大腸桿菌的效率，最近幾年進行了大量的工作以尋找獲得最大轉化效率所需的突變組合。許多電穿孔和化學方法製備的大腸桿菌菌株的感受態細胞可從供應商獲得

相關焦點

  • 熱水撲滅火災比冷水更有效,這是什麼道理?
    但實際上，熱水比冷水能更有效地撲滅火災。這是因為滅火主要靠水變成水蒸氣的過程，這會吸收大量的熱量，遠大於水變熱吸收的熱量。而熱水變成水蒸氣要比冷水更快。得益於水的化學構成，特別是它的熱容量和汽化吸熱能力，水在滅火方面比大多數其他液體更有效。
  • 重組DNA轉化實驗原理及方法
    重組DNA轉化實驗原理： 　　帶有外源DNA的重組體分子在體外構建成後，需要導入適當的宿主細胞內進行繁殖或表達出具有一定生物活性的蛋白。能夠作為重組體轉化的受體，主要有動物細胞、植物細胞、微生物細胞等。導入受體細胞的途徑重要有轉化(轉染)，顯微注射和電穿孔等多種不同的方式。可以根據不同的受體選擇不同的導入方式。
  • 科學家將菠菜作為電池催化劑，效率更高更便宜
    對於高效燃料電池而言，催化劑(用於發生電化學反應產生電流)極其重要，好的催化劑可以使化學反應更快更高效菠菜資源豐富，價格便宜，易於種植，富含鐵和氮，對菠菜的研究由來已久。40多年前科學家就有了利用其光合作用和電化學特性的想法，美國物理學家埃利亞斯·格林鮑姆(Elias Greenbaum)研究過菠菜葉片中基於蛋白質的「反應中心」，這是光合作用的基本機制，即植物將二氧化碳轉化為氧氣和碳水化合物的化學過程。
  • 大腸桿菌電轉化感受態細胞製備及轉化方法
    這都是我幾年來經驗總結啊,覺得有用一定要頂大腸桿菌電轉化感受態細胞製備第一天： 1. 將適合菌株（如XL1-Blue, DH5α）置於LB或其他營養豐富的培養基上，在37°C下過夜培養 2. 高溫滅菌大的離心瓶（250-500ml）以備第二天搖瓶用 3.
  • 新型PEC電池可將光能轉化為電能或化學能並長期有效存儲
    光電化學電池（簡稱PEC）是一種特殊的太陽能電池，它可以收集太陽能並將之電能或化學能——電解水並以氫能存儲，然後供燃料電池使用。
  • 一種檢測上皮-間充質轉化的電化學生物傳感器
    上皮-間充質轉化(Epithelial-mesenchymal transition，EMT)在多種生物學過程中起重要作用。電化學傳感技術為開發更有效的EMT檢測技術提供了可能。
  • 比矽太陽能電池更高效的材料,將太陽能轉化為電能的速度更快
    例如，據報此前的研究，二烯化鈀二維形式可以有效的進行光催化——當暴露在陽光下，水分解成氫和氧的過程，可以用來生產生態燃料。現已知道如何合成單層和雙層PdSe2合成物，但是直到現在，這些材料的優缺點仍然未知。科學家首次採用高精度計算方法，對基於二烯化鈀的單層和雙層材料電子和光學性能進行了詳細研究，結果表明，這種材料比矽基太陽能電池材料更能有效地吸收太陽能。
  • 我科學家實現二氧化碳高選擇性轉化
    【來源：科技日報】科技日報合肥4月12日電 （記者吳長鋒）記者12日從中國科學技術大學獲悉，該校高敏銳教授課題組和俞書宏院士團隊設計了系列具有「富集」效應的納米催化劑，成功實現了二氧化碳到目標產物的高選擇性轉化。
  • 不燥熱,不插電:《自然·化學》帶你靜觀室溫下氨氣轉化為氮氣
    理論上講，如果能反過來將NH3有效地轉化為N2和H2，NH3便可用作氫能源載體在能源開發中得到利用。事實上，NH3作為儲氫載體也的確具有許多優點：能量密度高、安全不易燃、容易液化儲存，且NH3已在工業化生產中發展十分成熟，加上其本身不包含碳原子，也符合低碳能源的要求。
  • 甲烷轉化為CO2或有利於控制氣候變化
    科技日報華盛頓5月20日電 （記者劉海英）將本世紀全球平均氣溫上升幅度控制在2℃以內是《巴黎協定》的主要目標，許多科學家正在為如何達成這一目標而絞盡腦汁。美國史丹福大學一項新研究稱，將溫室氣體甲烷轉化為二氧化碳（CO2），可作為達成該目標的有效補充手段。
  • 碘化銅可讓鈣鈦礦太陽能電池更便宜
    原標題：碘化銅可讓鈣鈦礦太陽能電池更便宜　　科技日報訊 （記者王小龍）據物理學家組織網1月8日（北京時間）報導，美國諾特丹大學的科學家日前發現一種廉價的無機材料，能夠取代鈣鈦礦太陽能電池中昂貴的有機空穴導體，讓這種高效的太陽能電池更加便宜。相關論文發表在《美國化學學會會刊》上。
  • 發現比矽太陽能電池更高效的材料，將太陽能轉化為電能的速度更快
    例如，據報此前的研究，二烯化鈀二維形式可以有效的進行光催化——當暴露在陽光下，水分解成氫和氧的過程，可以用來生產生態燃料。現已知道如何合成單層和雙層PdSe2合成物，但是直到現在，這些材料的優缺點仍然未知。
  • 科學新聞：導水膜幫助二氧化碳更快的轉化為甲醇
    科學家創造了一種導水膜，促進二氧化碳更高效地轉化為甲醇。研究發表在《科學》雜誌上。>甲醇是一種多用途且有效的化學品 將二氧化碳轉化為甲醇是有效利用二氧化碳的一種方法。如今，科學家正在使用多種反應將二氧化碳轉化為甲醇，但副產品是水——這大大降低了生產效率。 現在，研究人員已經開發出一種膜，該膜可以過濾反應中形成的水，其中的沸石晶體可以去除液體而不會影響氣體。
  • 新機制讓彈性能-動能轉化過程更高效
    現在，美國麻薩諸塞大學阿姆赫斯特分校的材料科學家們，也能做到了——他們發現了一種機制，可以有效地將彈簧的彈性能量轉化為動能，用於完成高加速度、極速運動。相關研究成果於9月2日刊登於《物理評論快報》雜誌中。
  • 工程師現在可更快地將天然氣轉化為固態
    New Atlas 消息，新加坡國立大學的工程師找到了一種可更快速將天然氣轉化為固態的方法，可在 15 分鐘完成轉化，涉及使用一種低毒混合物，是目前已公開將天然氣轉化為固態最快的一種方式。氣態的天然氣要安全地運輸和儲存均很困難，所以通常會被轉化為液態來儲存。然而，要將其轉化為液態需要極度低溫，操作不易。將天然氣轉化為固態是一種新的趨勢。
  • 人類為什麼不製造直接將熱轉化為電的發電機?
    然而我們卻無時不在使用電器。事實上沒有哪一項技術特徵能像電的使用那樣完全地滲入當代世界。電氣時代自然而然就離不開發電機，無論是水電站還是核電站，都是另類型的「發電機」！麥可·法拉第 （Michael Faraday，1791年9月22日～1867年8月25日），英國物理學家、化學家，也是著名的自學成才的科學家，出生於薩裡郡紐因頓一個貧苦鐵匠家庭，僅上過小學。
  • 更簡單更快速,更便宜,採用全填充方法製造質量穩定的碳納米管!
    更簡單更快速，更便宜，採用全填充方法製造質量穩定的碳納米管！就像我們中的許多人可能會被堵塞的鹽瓶或尖峰時段的交通一樣，那些努力利用碳納米管的特殊性質的人通常會在這些最小的圓筒在加工過程中充滿水時聳肩。但對於已經達到大力水手門檻並且「不能再站立」的納米管從業者而言，美國國家標準與技術研究院（NIST）已經設計出一種廉價，快速和有效的策略，可靠地提高材料的質量和一致性 - 在新計算技術等應用中有效使用它們非常重要。為了防止用水或其他有害物質填充單壁碳納米管的核心，NIST的研究人員建議用有益的化學性質預先填充它們。
  • 發現比矽太陽能電池更高效的材料,將太陽能轉化為電能的速度更快!
    例如，據報此前的研究，二烯化鈀二維形式可以有效的進行光催化——當暴露在陽光下，水分解成氫和氧的過程，可以用來生產生態燃料。現已知道如何合成單層和雙層PdSe2合成物，但是直到現在，這些材料的優缺點仍然未知。
  • 新型電穿孔方法可溫和轉染貼壁細胞
    電穿孔是一種成熟的方法，可將外源分子導入培養細胞中。
  • 中科大俞漢青Nature子刊:葡萄糖氧化+HER,生物質電化學轉化的又一次嘗試!
    GRA目前主要是通過化學氧化或微生物發酵來製備，前者是GRA生產的主要工業方法。但常規葡萄糖催化氧化為GRA的方法有幾個缺點：（1）需要大量的有毒氧化劑；（2）對GRA的選擇性低；（3）產生多種副產物；（4）需要使用高壓氧氣（或空氣和硝酸）。研究發現，將生物質轉化為商用化學品可減少對化石燃料資源的依賴，而採用電能驅動的電化學方法則是有應用前景的技術之一。