林下食用菌生產技術流程
1．母種製作
(1)，母種培殺基製備
①稱取 用天平稱取培養基各種成分的用量。
②配製溶液 為避免發生沉澱，一般是先加緩衝化合物，溶解後加入主要元素，然後是微量元素，再加人維生素等。最好是每種成分溶解後，再加入下一營養成分。若各種成分均不發生沉澱．也可以一起加入。
用馬鈴薯、玉米粉、蘋果、米粉、木屑等作原料時，應先製取這些原料的煮汁，然後再把煮汁與其他成分混合。例如，PDA培養基的配製：把選好的馬鈴薯洗淨去皮，挖去芽眼，切成薄片或1cm大小的方塊，稱取200g放在容器中，加水 1000mL，加熱煮沸20 -30mm，至軟而不爛的程度，用4 層紗布過濾，取其濾液。在濾液中加入瓊脂，小火加熱，用玻璃棒不斷攪拌，以防溢出或焦底，至瓊脂全部溶化，再加入葡萄糖使其溶化，最後加水至1000mL 即成。
③調pH -般用10%HCI或10%NaOH調pH，用pH試紙（或pH計）進行測量。
④分裝 培養基配製好後，趁熱倒人大的玻璃漏鬥中，打開彈簧夾，按需要分裝於試管或錐形瓶內。
注意事項
將漏鬥導管插入試管中下部， 以防培養基沾在試管口或瓶口。
分裝體積：試管以總容量的1/5 - 1/4為宜，錐形瓶以容量的1/3為宜。
⑤塞棉塞 這樣既可過濾空氣，避免雜菌侵入，又可減緩培養基水分的蒸發。制棉塞的方法多種，棉塞形狀各異，總原則如下：用普通棉花製作；鬆緊適合；塞頭不要太大，一般為球狀。
⑥滅菌 將包紮好的試管直立放人手提式高壓滅菌鍋內，蓋上牛皮紙，在121℃、103. 4kPa下滅菌30min。
⑦擺斜面 滅菌後冷卻到 60℃左右，從鍋內取出，趁熱擺成斜面。
製作斜面培養基：一般斜面長度達試管長度的1/2 - 2/3為宜，待冷卻後即成斜面培養基。
製作平板培養基：滅菌後的培養基倒人無菌培養皿中(每皿倒人15 - 20mL)，凝固後即成平板培養基。
⑧無菌檢查 取數支斜面培養基放入 28℃左右的恆溫箱中培養2-3天，若無雜菌生長便可使用。若暫時用不完，用紙包好放人4℃冰箱保存。
(2)接種與培養
從外地購進或分離獲得的母種數量有限，不能滿足生產的需要時，要對初次獲得的母種進行擴大繁殖，以增加母種數量。
①母種擴大 把接種物移至培養基上，在菌種生產工藝上稱為接種。條件：無菌操作（接種箱或超淨工作檯，酒精燈火焰周圍10cm）。將試管菌種接到新的試管斜面上擴大繁殖，稱為繼代培養或轉管。
主要程序：消毒手和菌種試管外壁；點燃酒精燈；用左手的大拇指和其他四指並握要轉接的菌種和斜面培養基，在酒精燈附近拔掉棉塞；在酒精燈火焰灼燒接種鋤和試管口；冷卻接種鋤，取少量菌種（綠豆大小）至斜面培養基上；塞上棉塞，貼好標籤。
整個過程要快速、準確、熟練。1支母種大約可以轉接出30支母種。
②母種培養 接種後要精心培養，創造有利於菌絲生長的各種環境條件（主要是溫度、空氣）。培養場所（培養室）要清潔，事先要殺蟲、消毒；光線暗；空氣清新；保持溫度20 - 25℃、空氣溼度60% - 70%。將斜面朝下斜置、疊放於瓷盤中，放於培養箱中培養。每天都要檢查菌絲生長情況，及時挑揀汙染試管。
分離的母種一定要純化後做出菇試驗：將再生母種擴成原種、栽培種，使其出菇。看產量、質量、形態、長勢、抗性如何，再決定是否取用。
純化試管中的菌絲長至斜面1/2時，挑尖絲轉管，培養成再生母種。
菌齡適宜菌絲即將長滿斜面時（一般7 -10天）終止培養，用於菌種保藏或繁衍原種。
2．二級菌種製作
試管母種一般都不能直接用作栽培接種，而要經過移植馴化，使其適應栽培條件後方可採用。馴化後雖然可以用於栽培播種，但數量太少，不經濟，還要採用同樣的方法將原種擴接培養成栽培種，才能滿足生產上的需要。
(1)原種常用培養基準備
木屑培養基：木屑78%，麩、糠20%，石膏1%，糖1%，水適量，適用於平菇、木耳、香菇、猴頭菇的培養。
棉籽殼培養基：棉籽殼78. 5%，麩、糠20%，石膏1.5%，水適量，適合於平菇、猴頭菇、金針菇、雞腿菇的培養。
糞草培養基：稻草（切碎）78%，幹糞20%，石灰、石膏各1%，水適量，適用於革菇、雞腿菇、姬松茸的培養。
各種培養料應無黴爛、新鮮、乾燥。各種培養基的含水量應保持在60%左右。
(2)培養料裝瓶（或袋）
將培養料拌勻裝人菌種瓶（或袋）內，裝料鬆緊適宜、上下一致，裝料高度以齊瓶（袋）肩為宜。然後用錐形木棒在瓶的中央向下插一個小洞，塞上棉塞。裝好的料瓶（袋）要當天滅菌，以免培養料發黴變質。
(3)原種擴接（超淨工作檯內接種，由試管接到培養瓶或袋）
消毒手和母種試管外壁；點燃酒精燈；拔掉母種瓶棉塞，在酒精燈火焰上灼燒試管口和接種鋤；將母種瓶固定，拔掉菌種瓶棉塞，待接種鋤冷卻後取2 塊1cm2菌種至菌種瓶內；塞上棉塞，貼好標籤。1支母種可以轉接出10瓶原種。
(4)原種培養
①勿堆放過擠 根殺氣溫，菌種瓶或菌種袋可單層或多層疊放，隔4-5。天轉動或調換位置，以利於受溫一致，並避免培養料水分的沉積。
②常挑揀 及時去除出現雜色、黏液及菌種死亡的菌種瓶或菌種袋。
③逐漸降溫 當菌絲長至料深的1/2時，降溫2-3℃，以免料溫升高，並有壯絲作用。
④注意菌齡 原種30 - 40天、栽培種20 - 30天菌絲長滿，再繼續培養7-10天是使用的最好菌齡。
3．三級菌種製作
製作、培養栽培種時，若能選擇優良菌種、正確配方、優質原料，嚴格滅菌，遵循無菌操作規程和科學培育方法，就能培育出優良的栽培種。
(1)栽培種常用培養基準備
木屑培養基：木屑78%，麩、糠20%，石膏1%，糖1%，水適量，適用於平菇、木耳、香菇、猴頭菇的培養。
棉籽殼培養基：棉籽殼78. 5%，麩、糠20%，石膏1.5%，水適量，適用於平菇、猴頭菇、金針菇、雞腿菇的培養。
糞草培養基：稻草（切碎）78%，幹糞20%，石灰、石膏各10%，水適量，適用於草菇、雞腿菇、姬松茸的培養。各種培養料應是無黴爛、新鮮、乾燥。各種培養基的含水量應保持在60%左右。
(2)培養料裝袋
將培養料拌勻裝入菌種瓶（或袋）內，裝料鬆緊適宜、上下一致，裝料高度以齊瓶（袋）肩為宜。然後用錐形木棒在瓶的中央向下插一個小洞，塞上棉塞。裝好的料瓶（袋）要當天滅菌，以免培養料發黴變質。
(3)栽培種擴接
原種瓶棉塞進行消毒處理；消毒手和原種瓶外壁；點燃酒精燈；拔掉原種瓶棉塞，在酒精燈火焰上灼燒原種瓶口和接種匙；將原種瓶固定，拔掉菌種瓶棉塞，將表面的老菌種塊和菌皮挖掉，用接種匙搗碎菌種，取滿勺菌種至栽培袋內。塞上棉塞，貼好標籤。1瓶原種可擴增20瓶栽培種。
(4)栽培種培養
栽培種的培養方法與原種的培養方法相同。
小貼士
菌種培育中出現的異常現象及處理
製作、培養原種和栽培種時，，因種種因素，會出現異常現象，如雜菌汙染，菌絲不萌發、不生長或發生萎縮衰退等。發生異常現象，一定要儘快查明原因，及時採取有效措施加以解決。
(1)「斷苗」
接種後，若菌種瓶內首先出現的是線狀菌絲，在生長過程中某段發生「斷裂」不相連現象，叫「斷菌」。引起「斷菌」的原因是：培養料發酵過熱、含水量過高、培養期間持續高溫等。基於以上原因，要不斷地調節培養料的溫度與水分含量達到 正 常的範圍內， 以杜絕「斷菌」發生。
(2)．退菌
在菌種瓶內的培養基上， 已長好的菌絲萎縮衰退的現象叫「退菌」。其原因是培養料營養不足、料過幹或過松，培養時溫度過高、通風不良或遇 蟲害等，這些因素都會造成「退菌」現象的發生。改善上述不良因素條件即可防止「退菌」的發生。
(3)菌絲徒長
在菌種培養過程中，往往產生菌絲徒長結塊的現象，這是由於菌種本身的氣生菌絲生長過於旺盛，培養料中碳氮比例不當，氮素過多，料過溼， 以及培養室空氣溼度過大所致。預防辦法：移植母種時少挑些氣生菌絲， 多挑些基內菌絲，培養料中含氮素多的物質要少用，料要稍幹，並降低室內溼度。
(4)「不吃料」
接種後有時菌絲出現「不吃料」現象。所謂菌絲「不吃料」，就是接入菌種瓶（袋）內的母種或原種塊的菌絲不生長，有些菌種塊上的菌絲雖然生長，但不往料內生長，以後逐漸萎縮變黃。此種現象發生的原因及預防方法是：
培養料過幹，菌絲不能長進料內。預防的辦法是：補加水分
接種箱內消毒時，燻蒸藥量過多或溫度過高，致使菌絲受藥害死亡。要求消毒用藥必須按規定量，防止過量，接種箱在連續接種時，必須有一個通風冷卻的間歇時間， 防止箱內溫度過高和氧氣缺乏。
高壓滅菌以後，菌種瓶（袋）內溫度尚未冷卻 即接種，致使菌種塊菌絲遇高溫而死亡。預防方法是：高壓滅菌後，菌種瓶（袋）必須在室內自然冷卻至30℃以下。
接種工具未冷卻或茵絲塊靠酒精火焰太近，菌種菌絲被燙死或燒死。預防方法是：在接種時，接種工具在火焰上灼燒後伸 入菌種試管、瓶（袋）內，應在管壁或瓶壁上冷卻後再去取菌種，取出的菌種塊不要靠火焰太近，要迅速通過火焰上方送入菌瓶（袋）內，以免菌絲被燒傷。
培養基配方不合理、配製不科學。如碳氮比不合理、pH不適、有不良氣味 等，致使菌種塊不萌發或不吃料。因此，要選擇科學 配方，原料要新鮮無黴變，調整適宜的pH。
接入的母種或原種的菌絲體， 因在不良環境條件下長期貯藏， 已經衰老，生活力極差，失去生長能力。接種前必須仔細選擇菌絲生長正常、活力強的母種或原種來接種。
菌種瓶（袋）內潛入蟎類，咬食接種塊，致使菌絲消失。應仔細檢查菌種瓶（袋）內是否有蟎類滋生並及時採取殺蟎措施。
掌握林下食用菌生產的主要生產技術流程和技術要點