在學習基因工程時，經常會遇到這類題目，如下：
例一：
現有一長度為3000鹼基對(bp)的線性DNA分子，用限制性核酸內切酶酶切後，進行凝膠電泳，使降解產物分開。用酶H單獨酶切，結果如圖l。用酶B單獨酶切，結果如圖2。用酶H和酶B同時酶切，結果如圖3。該DNA分子的結構及其酶切圖譜是 （ ）
很多同學表示做這個題目時，看不懂圖123，明明是三段為什麼說酶H只有一個切點？明明2000bp大些為什麼那麼短？難道有什麼玄機嗎？實際上要看懂這個圖需要學習下電泳。
電泳(electrophoresis)是帶電物質在電場中向著與其電荷相反的電極移動的現象。各種生物大分子在一定的pH條件下，可以解離成帶電荷的離子，在電場中會向相反的電極移動。在分析核酸、蛋白質等生物大分子時，電泳是一個非常有效的手段。含有電解液的凝膠在電場中，其中的電離子會發生移動，此時移動的速度可因電離子大小、形態及電荷量的不同而有差異。利用移動速度差異，就可以區別各種大小不同的分子。
瓊脂糖凝膠電泳是分子生物學實驗室中分離鑑定核酸的常規方法。核酸是兩性電解質，其等電點為pH2-2.5，在常規的電泳緩衝液中(pH約8.5)，核酸分子帶負電荷，在電場中向正極移動。線狀雙鏈DNA分子在一定濃度瓊脂糖凝膠中的遷移速率與DNA分子量對數成反比，分子越大則所受阻力越大，也越難於在凝膠孔隙中移動，因而遷移得越慢。
下面看小編的實驗：
點樣孔在負極（黑色的），點樣，通電，DNA往正極（紅色的）跑。跑膠開始，出現了一條帶↑DNA帶負電，往正極跑。（從左向右）
出現兩條帶了，由於有兩種染色劑，染色劑可以直觀看出對應大小的DNA所跑的位置.（指示劑不是給DNA染色，只是和相應的DNA大小相同，所以可以顯示出相當於DNA跑的位置，因為DNA在自然光下看不見）↑
DNA在紫外光下呈現出亮光。結果：從下往上第一條帶是無DNA的空帶，所以無螢光，第6和第7條帶是小編的實驗結果，2.3季4.5徐8.9.10.蔣11（最後）標準。很不錯。↑
例一解釋：
下面咱們來解釋下例一的圖123：
從上面的分析很容知道這個圖的2000bp和1000bp指的是2000bp和1000bp大小的DNA所在的位置，由於分子越大跑的越慢，所以圖示點樣孔應在圖的上側，即負極在上側，DNA從上側往下側跑。由圖1可知H酶將3000bp的線性DNA切成兩段，即一個切點，由圖2可知B酶將3000bp的線性DNA切成三段，即由兩個切點。由圖3可知，用酶H和1酶B同時酶切，結果得400bp、600bp、1400bp三種大小的DNA片段，400+600+1400=2400bp，而該DNA分子有3000bp，所以可以斷定還有一個600bp的DNA片段。（因為相同大小的DNA所跑的位置一樣，所以兩段600bp的DNA在相同的位置）
再與選項對比，只有A符合題意。
在看幾個題：
例二：
在DNA 測序工作中，需要將某些限制性內切酶的限制位點在 DNA上定位，使其成為 DNA 分子中的物理參照點。這項工作叫做「限制酶圖譜的構建」。假設有以下一項實驗：用限制酶 HindⅢ，BamHⅠ和二者的混合物分別降解一個 4kb（1kb即1千個鹼基對）大小的線性DNA 分子，降解產物分別進行凝膠電泳，在電場的作用下，降解產物分開，如下圖所示。
據此構建這兩種限制性內切酶在該DNA分子上的「限制酶圖譜」如乙圖，請判斷正確的標示是（ ）
A. 2.8 B. Hind Ⅲ C. 0.3 D. BamHⅠ
答案：C
例三：
現有一長度為1000鹼基對（bp）的DNA分子，用限制性核酸內切酶EcoRI酶切後得到的DNA分子仍是1000bp，用KpnI單獨酶切得到400bp和600bp兩種長度的DNA分子，用EcoRI、KpnI同時酶切後得到200 bp和600 bp兩種長度的DNA分子。該DNA分子的酶切圖譜正確的是的（ ）
答案：D
例四：
基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和質粒，便於重組和篩選。已知限制酶I的識別序列和切點是—G↓GATCC— ，限制酶II的識別序列和切點是—↓GATC—。根據圖示判斷下列操作正確的是（ ）
A．質粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割
B．質粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割
C．目的基因和質粒均用限制酶Ⅰ切割
D．目的基因和質粒均用限制酶Ⅱ切割
答案：A
另一類似的題目：
例五：
細菌蛋白質在極端環境條件下可通過肽鏈之間的二硫鍵維持穩定。已知不同的多肽產物可因分子量不同而以電泳方式分離。下列左圖是一個分析細菌蛋白的電泳結果圖，「-」代表沒加還原劑，「+」代表加有還原劑，還原劑可打斷二硫鍵，「M」代表已知分子量的蛋白質，右側數字代表蛋白質或多肽的相對分子量。根據左側結果，下列哪個圖案最能代表該細菌原本的多肽結構（注意：「一」代表二硫鍵）（ ）
解析：本題是有關多肽結構的判斷。從左圖可以看出該多肽的分子量大約是130，打斷二硫鍵後的片段中，較小的片段分子量大約是30，較大的片段分子量大約是70。由此可以判斷打斷二硫鍵後的片段中有兩個較小的片段、一個較大的片段（分子大小相同的分子電泳時跑在相同的位置），所以選項B是正確的。
答案：B
來個與遺傳結合的：
例六：
下圖1是某家族中甲病（顯性基因為A，隱性基因為a）和乙病（顯性基因為B，隱性基因為b）兩種遺傳病的系譜圖。控制甲乙兩種遺傳病的基因分別位於兩對同源染色體上。經DNA分子結構分析，發現乙病基因與其相對應的正常基因相比，乙病基因缺失了某限制酶的切點。圖2表示甲、乙、丙3人的乙病基因或相對應正常基因的核酸分子雜交診斷結果示意圖。據圖回答下列問題。
（1）從系譜圖上可以看出甲病的遺傳特點是___________；若Ⅱ7和Ⅱ8再生一個患甲病子女的概率為_____________。
（2）已知對Ⅱ3和Ⅲ13進行核酸分子雜交診斷，Ⅱ3電泳結果與圖2中甲相同，Ⅲ13電泳結果與圖2中乙相同，則由此可以判斷乙病的遺傳方式是___________，9號個體的基因型是___________。
（3）若Ⅱ8進行核酸分子雜交診斷，其電泳結果與乙相同。則Ⅲ9和Ⅲ12結婚，生育的子女患病的概率為___________。
（4）目前已發現的人類遺傳病有數千種，其中的多基因遺傳病常表現出___________等特點。
答案：
(1)代代相傳(發病率高) 3/4
(2)常染色體隱性 aaBB或aaBb
(3)25／36
(4)易受環境因素的影響，群體中的發病率比較高，家旗聚集現象(答對其中兩點得1分)
解釋：
正常基因有3個某限制酶切點，經酶切後產生兩個DNA片段，突變基因只有兩個某限制酶切點，經酶切後產生一個DNA片段。
甲電泳後有三種DNA片段，說明甲代表雜合子；乙電泳後有兩中DNA片段，說明乙代表正常基因的純合子；丙電泳後只有一種DNA片段，說明丙代表突變基因的純合子。
例七：
如圖為DNA測序儀顯示的某真核生物DNA片段一條鏈的鹼基排列順序圖片，其中圖甲的鹼基序列已經解讀，其順序是： GGTTATGCGT。圖乙的鹼基序列為：( )
A．GGTTATGCGT B．CCAATACGCA C．GATGCGTTCG D．GCTTGCGTAG
答案：C
生物100——有態度的生物學生物100（ID:bio1297）原創文章，轉載請註明出處。