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MicroRNAs (miRNAs)在調控基因表達和細胞命運過程中起著重要的作用。然而,如何在活細胞中對miRNAs進行高精度的成像仍然是一個巨大的研究挑戰。湖南大學汪鳳林副教授、董萬榮副教授和Zhan-Ming Ying報導了一種新型遺傳編碼的雙色發光RNA傳感器,並將其用於對miRNAs進行比率成像。
本文要點:
(1)該基因編碼傳感器的設計策略可以實現內參和傳感部件這兩個模塊在單個啟動子條件下的同步表達,而產生的幹擾則可以忽略不計。活細胞成像研究表明,該基因編碼的比率型RNA傳感器對mir-224具有特異性響應。
(2)研究結果表明,sensor-to-Mango的螢光比值與mir-224的濃度呈線性相關,證明了其對活細胞mir-224的濃度具有很好的測定能力。實驗也利用這一基因編碼的發光RNA傳感器在不同的細胞系中實現了對mir-224的比率成像。綜上所述,這一研究為實現對細胞內RNA的比率成像提供了一種通用的新方法,也為研究活細胞中RNA的功能和豐度提供了強大的工具。
參考文獻:
Cai-Xia Dou. et al. Genetically Encoded Dual-Color Light-Up RNA Sensor Enabled Ratiometric Imaging of MicroRNA. Analytical Chemistry. 2021
DOI: 10.1021/acs.analchem.0c04588
https://pubs.acs.org/doi/10.1021/acs.analchem.0c04588
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