一、實驗目的
1、掌握PCR產物純化的原理。
2、掌握PCR產物膠回收的操作方法。
二、實驗原理
利用低熔點瓊脂糖凝膠電泳DNA片段，分離目的條帶DNA，然後紫外光下切割含目的DNA條帶的膠塊，利用膠回收試劑盒回收純化DNA片段。
試劑盒的膠回收柱採用特殊矽膠基質材料，在一定的高鹽低pH緩衝系統下能高效、專一地吸附DNA、RNA分子；通過離心吸附柱式結構，使用常規臺式高速離心機，在幾分鐘之內即可以高效回收核酸片段。
三、儀器與試劑
實驗儀器：
1、瓊脂糖凝膠電泳系統
2、紫外觀察分析儀
3、離心機
4、單面刀片
5、恆溫水浴鍋
主要試劑：
1、 DNA膠回收試劑盒
2、50×TAE
3、ddH2O
四、實驗步驟
（一）DNA片段的純化回收
1）在紫外燈下切分含DNA的瓊脂糖塊，儘可能除去多餘的瓊脂糖．放入1.5ml離心管中。
2） 按每100mg瓊脂糖加入100μl 溶液GDP。置55℃水浴加熱約7-10min 至膠完全溶化，期間顛例混勻兩次加速溶膠。
3）將溶化後的瓊脂糖液移入吸附柱，12000rpm 室溫離心1min，倒掉收集管中的液體。
4）再在吸附柱中加入300μI 溶液GDP， 室溫放置1min。12000rpm 室溫離心1min，倒掉收集管中的液體，將吸附柱放入同一個收集管中。
5）再在吸附柱中加入600μI 溶液GW，12000rpm 室溫離心1min，倒掉收集管中的液體，將吸附柱放入同一個收集管中。
6）重複步驟5。
7）12000rpm 室溫離心1min。
8）將吸附柱置於潔淨的1.5ml離心管中，在吸附膜中央加入30μl 無菌水，室溫靜置2分鐘後， 12000rpm 室溫離心1分鐘，將離心管(DNA)貯存於-20℃。
五、注意事項：
1.切膠時應快速操作，在紫外燈下時間長容易傷害到眼睛；
2.膠塊一定要充分融化，否則將會嚴重影響DNA的回收率。
3.把洗脫液加熱，使用時有利於提高洗脫液效率。
六、實驗結果