一、所有染液配製均需使用蒸餾水，保證其pH，所用容器必須潔淨。
1、使用蒸餾水配製染液是所有特殊染色染液配製最基本的要求，其能夠保證染液pH。
如地衣紅染色（彈性纖維、B型肝炎病毒等），地衣紅染液配製後pH一般在0.8～1.6之間染色效果都較好；若pH大於2.0，則容易引起背景著色，造成對比度下降。
地衣紅染色（B型肝炎病毒） 地衣紅染色（B型肝炎病毒）
背景著色過深,與陽性對比下降 陽性突出,與背景對比清晰
如膠體鐵染色（黏液物質），膠體鐵染液pH非常重要，一般pH在1.4左右著色較好，若pH≥2.0時，酸性黏液以外的物質也會出現非特異性染色。
膠體鐵染色（皮膚）：陽性突出，對比清晰
2、配製染液所使用的玻璃容器（不同規格的量筒、量杯、燒杯、三角燒瓶、漏鬥等）必須使用清潔液浸泡並清洗乾淨，避免殘留的染液造成汙染。
玻璃容器清洗方法：自來水衝洗→毛刷蘸洗衣粉洗擦乾淨→自來水衝洗→晾乾→清潔液（重鉻酸鉀洗液）內浸泡（24小時）→自來水徹底衝洗乾淨→蒸餾水清洗（2次）→自然晾乾/溫箱烤乾、備用。
如配製無色品紅染液要求較高，所用容器及蒸餾水不潔淨，容易導致染液保存使用一段時間後由無色變成淡紅色，從而影響著色。
二、染色中主要染液的濃度和量，必須嚴格按照規範、權威專著所要求配製，不可隨意改動。
1、對配製染液中所使用到的一般儀器（如稱量天平、pH計等計量設備）應定期進行專業校對，確保其準確性。
2、優質化學試劑的選擇是配製合格染液的前提和基礎，與此同時也需注意部分同一類型而試劑分子量不同的染料。
如Masson染色是根據染液中試劑分子量大小而著染不同組織，若配製染液時所用試劑分子量（麗春紅及亮綠/苯胺藍的型號）選擇錯誤，可能導致染色的失敗。
Masson染色（平滑肌瘤）：紅藍對比清晰
優質的染料/染液是做好Masson三色染色的前提
3、嚴格按染液配製要求的濃度進行配製。
（1）嚴格按照染液所要求的「標準濃度」（即規範/專著所要求的濃度）來配製。
（2）對於較難溶解的固體化學試劑，須讓其充分溶解，以免造成所配製的染液濃度降低；對於液體化學試劑，須保證其濃度的準確性。
如顯示網狀纖維（Gomori氫氧化銀氨染色法），所配製的氧化劑高錳酸鉀濃度偏高，則會造成細胞核不著色，對比度下降；高錳酸鉀濃度偏低，則會造成氧化作用不夠，致使網狀纖維著色偏淡。
Gomori氫氧化銀氨染色（肝臟組織）
高錳酸鉀濃度過高/過低：組織細胞核不著色及網狀纖維著色過淡
如在配製羅丹寧原液時，羅丹寧試劑較難溶解，溶解不充分則易導染液作用時間延長或銅著色偏淡。
肝臟銅沉積（羅丹寧染色）：陽性著色強
優質的染液是保證陽性結果的前提
如所使用的氫氧化銨溶液濃度下降（溶液使用時間過久或使用後密封性不好），則會影響到所配製的染液如氫氧化銀氨染液（網狀纖維）、Best胭脂紅染液（糖原）、銀氨染液（黑色素及親銀細胞顆粒）等，從而導致陽性物質著染減弱或染色失敗。
網狀纖維染色及親銀反應染色
染液中氫氧化銨濃度降低致使陽性著色偏淡
4、嚴格按染液配製要求步驟進行配製。
（1）特殊染色染液配製中，一些染液配製並不複雜，只需將化學試劑稱量準確、充分溶解、過濾後即可使用。
如：剛果紅染液、1%阿利新藍（pH2.5）染液、普魯士藍（Perls）染液等。
（2）少部分染液配製相對複雜和繁瑣，必須嚴格按照配製要求進行：掌握每個過程的細節、溫度、所用時間等。
如配製無色品紅染液時，煮沸的溫度和時間需恰當、加鹽酸溶液和偏重亞硫酸鈉的溫度及量需恰當、最後還需觀察染液的顏色情況。只有配製出高質量的無色品紅染液，才可能著染出鮮豔的陽性。
PAS染色(真菌):陽性物質著色強,與背景對比度清晰
PAS染色陽性物質較多,染液配製的質量直接影響多種結果
如配製維多利亞藍染液時，加熱煮沸的時間（直接影響試劑的溶解及溶液呈現凝膠狀態）、維多利亞藍殘渣烤乾乾燥狀態程度均需適當。
維多利亞藍染色（皮膚彈性纖維）：陽性呈藍色
三、自行改良的染色法，需經過大量病例來驗證其有效性。
特殊染色中許多染色方法都是歷經多年的應用，方法/流程較成熟，也較為經典。如在一些方法/流程/染液方面上進行簡化/改良，則須經過大量的相應病例驗證、與原方法的結果進行反覆對比，確認其準確性/有效性。
四、考慮試劑的穩定性，合理的配製用量。用量小及易失效的染液儘量以小劑量來配製。
1、對於容易失效及用量小的染液，多以小劑量來配製和保存；部分染液需臨用前按比例混合或配製。
如：氫氧化銀氨液、核固紅、醛品紅、黏液胭脂紅等染液保存期短，不宜過多配製；Van Gieson染液、膠體鐵染液、1%澱粉酶消化液等需染色前混合/配製使用，不可提前配製好。
網狀纖維(銀氨液2-3個月) 彈性纖維（醛品紅染液3-6個月）
優質染液的重要性
2、對於保存較長、較難配製的染液可適當多配製，分裝保存。
如1%阿利新藍（pH2.5）、維多利亞藍、無色品紅等染液。
AB(pH2.5)染色：黏液藍色 維多利亞藍染色:彈性纖維藍色
性能穩定的染液(阿利新藍、維多利亞藍等)可保存使用數年不失效
五、染液配製完成後，須進行陽性對照驗證，合格後標明染液名稱、濃度、配製日期、有效期限，並根據要求保存，失效後立即廢棄。
1、染液配製後，進行陽性對照切片的染色驗證，判斷染液的有效性/是否合格。
2、合格的染液試劑瓶標註：染液名稱、濃度、配製日期、有效期限。
特殊染色染液的使用有效期限並沒有具體的固定時間，染液有效期限以陽性對照的減弱/不著色（立即更換）進行判別。
3、合格的染液大部分於4°C冰箱保存備用
六、配製過程中要熟知所用化學試劑性質，還要考慮到試劑的危險性，做好相應的防護及環保措施。
特殊染色所用化學試劑較多，必須熟知其化學性質（其中包括許多危險或有毒有害的化學試劑，如：苦味酸、硫酸/鹽酸、苯酚、鉻酸等）。
儲存及配製染液過程中不僅要做好個人的防護，廢液也不可隨意傾倒。
——————————病理染色———————————
歡迎關注病理特殊染色/染色技術。
聲明：本公眾號發表的內容，僅屬作者個人觀點。