以下文章來源於BMC科研永不止步 ,作者BMC 中國
近日,華中農業大學劉秀群、趙凱歌研究組和金雙俠研究組聯合西南林業大學陳龍清研究組在Genome Biology 上發表了題為「The chromosome-level wintersweet (Chimonanthus praecox) genome provides insights into floral scent biosynthesis and flowering in winter」研究論文,公布了國傳統名花蠟梅(Chimonanthus praecox)的染色體水平精細基因組圖譜。
該研究綜合解讀了蠟梅基因組基本特徵、以蠟梅為代表的木蘭類植物物種進化位置、蠟梅全基因組多倍化事件以及樟目植物基因組進化歷史;對蠟梅花香合成代謝網絡中相關關鍵基因進行了深入研究;同時系統解析了蠟梅花芽分化到開花的發育過程;為被子植物演化、蠟梅花香生物合成及開花提供了新見解。
蠟梅是木蘭類植物樟目蠟梅科蠟梅屬植物,為我國歷史傳統名花,有上千年的栽培歷史,其花香濃鬱,是稀有冬季開花的木本花卉。花期特殊、花香濃鬱賦予其獨特的觀賞特性,廣泛應用於盆景栽培、園林綠化、切花生產,具有極高的觀賞應用價值。目前,幾乎所有的中國園林綠地中都栽種有蠟梅;近年在上海、重慶、成都開發它作為春節和聖誕節的木本切花;蠟梅作為藥草植物,在木草綱目中已有記載。蠟梅作為木蘭類植物的代表,在被子植物進化歷史過程中具有重要地位。蠟梅基因組的破譯為木蘭類植物系統位置提出了新見解,為解析蠟梅生物學觀賞特性奠定了重要的基礎。
研究團隊利用二代Illumina Hiseq2000和三代PacBio測序平臺進行測序,結合10x Genomics和Hi-C獲得了染色體水平的精細基因組,該基因組大小為695.36 Mb,contig N50為2.19 Mb,Scaffold N50 達到65.35Mb, 99.42%的序列錨定到11條染色體上。同時該團隊利用二代測序技術完成了蠟梅近緣種夏蠟梅的全基因組測序。
研究者利用蠟梅、夏蠟梅以及其他15個具有代表性被子植物的基因組數據,通過溯祖法和串聯法構建了系統進化樹,結果表明木蘭類植物與雙子葉植物互為姐妹關係。
研究者利用蠟梅基因組內、與其他物種基因組間的共線性分析以及Ks分析,檢測到蠟梅經歷兩次全基因組複製事件,校正進化速率以後,估計蠟梅兩次全基因組複製事件分別發生在大約77.8和112.1Ma。其中較古老的全基因組複製事件發生在樟科和蠟梅科分化之前,近期的全基因組複製事件發生在樟科和蠟梅科分化之後。蠟梅基因組在歷史進化中經歷了複雜的染色體斷裂、融合及片段重組過程。
研究團隊結合細胞學和轉錄組學對蠟梅花芽周年發育過程的分子機制進行了研究,對花芽分化、花器官特化以及花器官發育、花芽休眠和抗寒等生物學特性進行了分子解析,鑑定到了大量成花轉變、花發育以及開花時間相關候選基因,為將來功能基因組學研究奠定了良好的基礎。
此外,團隊在高質量基因組圖譜基礎上,解析了蠟梅花香主成分形成的分子機制。單萜化合物芳樟醇是蠟梅花香的主要成分,佔花香總成分將近50%。該類物質主要由單萜合酶催化產生,通過比較基因組分析發現單萜合酶TPS-b亞家族基因在蠟梅中發生了顯著擴張,而這些基因擴張的主要來源是基因的串聯複製事件。為進一步挖掘芳樟醇合成的關鍵基因,研究者結合蠟梅花發育不同階段轉錄組和花香揮發物的代謝組數據,得到了芳樟醇合成的候選基因,然後通過體外酶活及菸草異源穩定轉化實驗進行候選基因功能驗證,成功鑑定到芳樟醇合酶基因CpTPS4。同時發現該基因在基因組還有另外四個拷貝CpTPS17、CpTPS18、CpTPS19和CpTPS50,其中CpTPS17、CpTPS18、CpTPS19在花中高表達。基於蠟梅基因組共線性分析,結果顯示CpTPS17、CpTPS18基因是通過串聯複製進化產生的,串聯複製帶來芳樟醇合成酶劑量上的變化進而導致蠟梅特徵香氣芳樟醇的形成。苯環類化合物乙酸苄脂是蠟梅的特徵香氣成分,研究發現乙酸苄酯合成通路關鍵酶多數是通過全基因組複製和串聯複製事件產生的,尤其是乙酸苄酯合酶BEAT基因。通過蠟梅花發育不同階段轉錄組和乙酸苄酯揮發物釋放量關聯分析鑑定到了乙酸苄酯合成的4個候選基因。此外,用同樣的方法鑑定到三個由串聯複製產生的水楊酸甲酯合成酶SAMT候選基因。
綜上所述,該研究構建了蠟梅高質量染色體水平上的基因組圖譜,為木蘭類植物進化位置提供了新證據,初步解析了蠟梅濃鬱花香形成以及開花的遺傳基礎。高質量的蠟梅全基因組序列有助於進一步深入開展分子遺傳學研究,鑑定控制冬季開花時間、花香花色等眾多性狀的功能基因, 從而推動蠟梅基礎研究的快速發展和加快新品種創製。
華中農業大學園藝林學學院博士研究生尚均忠、田敬璞,諾禾致源公司程繪繪為論文共同第一作者。華中農大碩士研究生嚴喬木、李來,博士研究生Abbas Jamal,以及許忠平博士、向林副教授參與了本項研究,Clemson 大學Christopher Saski博士對論文語言進行了潤色。西南林業大學陳龍清教授、華中農業大學劉秀群副教授、趙凱歌副教授、金雙俠教授為論文共同通訊作者。本研究受到了國家自然科學基金項目的支持。
論文連結:
https://doi.org/10.1186/s13059-020-02088-y