口腔潰瘍是以口腔黏膜組織喪失為特徵的繼發性病變。通常，口腔潰瘍的症狀包括局部創傷、復發性阿弗他口炎（RAS）、病毒和細菌感染、過敏反應、藥物不良反應或全身性疾病。具有疼痛明顯、周期性、復發性及自限性的特點。因此，口腔潰瘍治療藥物也是藥物研發人員一直重點關注的領域。
口炎清顆粒是一款中成藥，由天冬、麥冬、玄參、山銀花、甘草五味中藥組成，具有滋陰清熱、解毒消腫的作用。在中國藥典2015年版中，口炎清顆粒被記載用於治療口腔和咽喉炎性疾病，如RAS、口腔白斑和口腔扁平苔蘚。
在以往的研究中，研究人員通過體外細胞實驗及動物實驗多次證明了口炎清顆粒的抗炎作用。但由於口炎清顆粒中含有大量成分，其發揮口腔潰瘍治療作用的有效機制仍不清楚。因此，在新的研究中，研究人員建立了圖一所示的思路來研究口炎清顆粒抗口腔潰瘍機制。
圖一 口炎清顆粒抗口腔潰瘍機制研究思路
具體來說，首先，採用綜合方法對活性成分和口腔潰瘍病的多個靶點進行檢索和篩選。其次，基於活性成分靶點和口腔潰瘍病靶點，建立了口炎清顆粒的網絡藥理學研究，通過網絡分析獲取了關鍵靶點，並富集其生物學途徑。然後，為了驗證網絡分析的結果並演示活性成分如何作用於靶標，使用Discovery studio軟體進行了分子對接研究。最後，通過動物實驗驗證上述方法的可靠性。
在動物試驗中，研究人員使用了睡眠剝奪的苯酚誘導口腔潰瘍模型來驗證口炎清顆粒對口腔潰瘍的作用機制。這主要是因為口炎清顆粒在我國主要用於治療因失眠而加重的口腔炎症疾病。並由研究已經證實睡眠不足會加重苯酚引起的大鼠口腔潰瘍，延緩癒合過程。
根據上述思路，研究人員首先根據前期的的分析研究進行口炎清顆粒主要化學成分的選取，在分析研究中，研究人員通過高解析度質譜技術對口炎清顆粒主要成分進行了鑑定，發現有16種化合物在其抗炎作用中起重要作用。因此，這16種化合物被視為口炎清顆粒的活性成分，其化學結構見圖二。研究人員通過中藥系統藥理學資料庫和分析平臺（TCMSP）、毒理基因組學資料庫（CTD)和SwissTargetPrediction資料庫（STPD)等多個資料庫對這16種化合物的潛在靶點進行了收集。
圖二 口炎清顆粒主要抗炎活性成分
接著，研究人員又通過OMIM和Genecards資料庫對口腔潰瘍的靶點進行了收集。然後通過String網站進行了蛋白質相互作用（PPI）分析；以及用DAVID資料庫進行了基因本體（GO）富集和通路富集（KEGG）分析；並用Discovery studio對相應的靶點進行了分子對接研究。
為了驗證上述網絡藥理分析及分子對接研究的可靠性，研究人員進行了動物實驗及試劑盒實驗驗證，再次證明了口炎清顆粒的療效和作用機制。
圖三 動物實驗結果分析
新的研究證明了口炎清顆粒多組分、多靶點作用的特點，在口腔潰瘍的綜合治療中具有較大優勢。同時，中藥的現代作用機制一直是中藥開發和推廣的最大瓶頸所在，本研究也為相應中藥現代化研究提供了參考。
*文中圖片出自參考資料1
參考資料：
1. Discovery of the possible mechanisms in kouyanqing granule for treatment of oral ulcers based on network pharmacology，2020；
2. Oral ulcers: clinical aspects. A tool for dermatologists，2009；
3. Sleep deprivation worsened oral ulcers and delayed healing process in an experimental rat model，2019.
作者簡介：雲天，藥物化學博士，主要從事小分子藥物研究，尤其擅長小分子藥物的合成工藝及後期藥物開發研究，已完成多個抗癌藥物分子的合成和活性評估。