巴黎巴斯德研究所研究員Dr. Philippe Bastin的主要研究興趣是錐蟲鞭毛中的蛋白轉運過程,這些蛋白分子在細窄(300 nm)的鞭毛中以每秒2-5 μm的速度快速移動,在100 ms的曝光時間下,蛋白即使移動0.5μm都會產生拖尾痕跡,所以對其進行成像是非常具有挑戰性的。一方面要減少曝光時間,提高時間解析度,否則無法捕捉到轉運過程;另一方面,又要達到成像要求的信噪比。這就需要相機具有非常高靈敏度,才能降低曝光時間,提高成像速度。
EMCCD靈敏度雖然高,但像元太大,限制了解析度。因此Dr. Bastin現在選擇使用量子效率95%的背照式sCMOS相機Prime 95B:「即使曝光時間僅為10ms,我們也可以成功的捕捉到蛋白序列。另外,鞭毛的直徑接近解析度極限, Prime 95B 11μm像元配合100x物鏡能夠達到光學解析度極限,是同時滿足速度、信噪比和解析度的最佳選擇。」
Dr. Bastin還預計Prime 95B將在未來用於四標免疫螢光成像。他分享說,「對於長波長染料,如Cy5,量子效率一直是一個問題。我們用Prime 95B進行了測試,相機的高量子效率讓我們非常驚喜。」他還提到,在這些類型的實驗中,大視野相機十分有用,單次採集視野中的細胞越多,採集時間越短。Prime 95B的25mm大視野型號能夠為這些應用提供幫助。
圖1 錐蟲鞭毛蛋白轉運活體成像。Kymograph量化分析表明Prime 95B可以用更少的曝光時間檢測到順行(A)和逆行(R)的蛋白信號。